吉林省科技厅资助项目(20070924-02)
- 作品数：1 被引量：4H指数：1
- 相关作者：刘畅隋红王志武盛军李校堃更多>>
- 相关机构：长春生物制品研究所吉林农业大学吉林大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人Cu,Zn-SOD基因在毕赤酵母中的表达及稳定性被引量：4
- 2008年
- 目的构建人Cu,Zn-SOD基因的真核表达载体,转化毕赤酵母,并检测表达产物的稳定性。方法根据酵母密码子偏好性,合成人Cu,Zn-SOD基因,克隆至真核表达载体pPIC9k中,转化毕赤酵母GS115。甲醇进行诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。优化表达条件,并检测粗酶液的稳定性。结果经SDS-PAGE和Western blot检测,表达的目的蛋白相对分子质量为18000左右;最佳表达条件为pH6.0,甲醇浓度1.5%,持续培养96h;目的蛋白占分泌蛋白总量的27%,最高表达量为91mg/L;最佳条件下培养液上清的酶活性最高达334U/ml,粗酶对氯仿和乙醇稳定,对H2O2不稳定,对温度有一定的耐受性,pH在6和8时较稳定。结论在毕赤酵母GS115中成功表达了具备酶活性的人Cu,Zn-SOD基因。
- 迟春萍隋红李雨桐薛向光王志武牛灵刘畅王艳芳吴晓娟郭立君盛军李校堃
- 关键词：真核表达毕赤酵母稳定性
