国家自然科学基金(20674038) 作品数:9 被引量:40 H指数:4 相关作者: 徐虹 朱宏阳 李莎 汪芙蓉 冯小海 更多>> 相关机构: 南京工业大学 江苏大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 化学工程 更多>>
枯草杆菌NX-2聚谷氨酸解聚酶的克隆表达及其降解性质研究 被引量:3 2007年 利用PCR技术从γ-聚谷氨酸产生菌Bacillus subtilisNX-2的基因组DNA上扩增出聚谷氨酸内切解聚酶基因(ywtD),克隆后测序,对该基因编码区进行了序列分析,比对结果表明扩增的ywtD基因编码与文献报道的序列相似性为99.0%,碱基的差异均表现为碱基取代,仅有一个碱基取代导致编码氨基酸的变化,即第349位密码子由GCC变为GTC。将ywtD基因克隆入表达载体pET15b中,该载体转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经0.5mmol/LIPTG诱导,外源解聚酶蛋白获得高效表达。利用酶的初提液对聚谷氨酸进行降解,结果显示经72小时解聚酶作用后,γ-PGA分子量从700kDa降到20kDa,此后随作用时间的延长,聚谷氨酸分子量趋于定值。 金晶 姚俊 徐虹 许琳关键词:聚谷氨酸 枯草芽孢杆菌 分子量 Alcaligenes sp.NX-3产威兰胶的补料分批发酵工艺研究 被引量:11 2009年 在7.5L发酵罐上考察了Alcaligenes sp.NX-3产威兰胶的发酵工艺。选用葡萄糖为碳源,通过分析比较不同初糖浓度下的细胞比生长速率和产物比合成速率,进一步研究了不同补料方式对产胶的影响。结果表明,采用分批补糖发酵工艺,威兰胶产量较分批发酵提高了13.6%,而且有效地缩短了发酵周期。在50L发酵罐上进行补料分批发酵放大实验,威兰胶产量高达27.0g/L,葡萄糖转化率由初始的44%提高到54%。 李会 李莎 冯小海 汪芙蓉 徐虹关键词:ALCALIGENES 补料分批发酵 分批发酵 Gluconobacter oxydans木糖醇脱氢酶基因的克隆表达及木糖醇的转化分析 被引量:4 2009年 从氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)的基因组DNA上扩增出木糖醇脱氢酶基因xdh,构建了诱导型表达载体pSE-xdh,导入E.coliJM109后获得了高效表达木糖醇脱氢酶基因的重组菌JM109/pSE-xdh。通过HisTrap HP亲和层析和SephacrylS-300分子筛两步纯化从细胞中得到纯酶,并对酶学性质进行研究。XDH最适还原反应的pH值为5.0,最适还原反应的温度为35℃;最适氧化反应的pH值为11.0,最适氧化反应的温度为30℃。重组菌中的XDH依赖NADH,对NADH的米氏常数Km=57.8 mmol/L,最大反应速率Vmax=1209.1 mmol/(ml.min)。重组菌的XDH酶活力为13.9 U/mg。利用重组菌和原始菌混合静止细胞转化D-木酮糖,16 h28.0 g/L D-木酮糖生成16.7 g/L木糖醇,而原始菌单独转化只生成8.3 g/L木糖醇。 沈晓波 齐向辉 朱宏阳 徐虹关键词:木糖醇脱氢酶 克隆 木糖醇 新型绿色阻垢剂γ-聚谷氨酸的阻垢性能 被引量:4 2010年 以实验室自制的低相对分子质量γ-聚谷氨酸(LMPGA)为研究对象,系统研究其阻碳酸钙垢、硫酸钙垢性能及其相关影响因素。结果表明:LMPGA的平均相对分子质量在5.0×103和7.0×103时,具有相近的阻碳酸钙垢性能,且在药剂投加质量浓度达到20 mg/L时,阻垢率可达88%左右;随着Ca2+浓度、pH值、恒温温度及恒温时间的增加,其阻碳酸钙垢性能发生下降;LMPGA是一种优良的硫酸钙阻垢剂,在药剂投加质量浓度达10 mg/L时,其硫酸钙阻垢率可达90%以上。 徐浩 梁金丰 朱宏阳 李莎 徐虹关键词:Γ-聚谷氨酸 低相对分子质量 阻垢剂 1株产D-阿拉伯糖醇的菌株的分离筛选及鉴定 被引量:9 2009年 从含糖量高的自然界样品中分离获得1株耐高渗酵母NH-9,在对其常规形态学及生理生化特性鉴定的基础上,对部分长度的18S rDNA同源性进行了分析,发现NH-9菌株与奥默柯达菌相似度100%,命名为Kodamaea ohmeri NH-9,这也是首次发现此属酵母能够产生D-阿拉伯糖醇。 蔡莉 张扬 朱宏阳 赵敏 徐虹关键词:耐高渗酵母 菌株 利用^(13)C标记葡萄糖分析γ-聚谷氨酸的代谢途径 被引量:2 2007年 本实验室筛选的菌株Bacillus subtilis NX-2以葡萄糖和谷氨酸共同作为碳源生产γ-聚谷氨酸(γ-PGA).为探讨这2种碳源在γ-PGA合成中的作用,在培养基中加入标记的[U-13C]-葡萄糖,检测产物γ-聚谷氨酸的核磁共振碳谱信号强度,从而计算葡萄糖代谢进入产物的量.在培养基中葡萄糖浓度为4%时,γ-PGA的碳骨架中由葡萄糖进入的比例为9%左右.当葡萄糖浓度为3%时,由葡萄糖进入γ-PGA的比例降至6%.证明葡萄糖主要用于能量代谢和菌体合成,只有少量参与γ-PGA合成,而谷氨酸为γ-PGA单体的主要来源. 石宁宁 徐虹 姚俊 王军关键词:Γ-聚谷氨酸 代谢途径 核磁共振 海藻糖在生物组织器官保护方面的新应用 被引量:3 2009年 海藻糖是具有独特生物学功能的二糖,它在生物活性材料的保护保存等方面起着不可估量的作用,是一种非常优良的生物活性保护剂。综述了海藻糖在血液、脂质体、气管、肝、肺、肾、胚胎等器官保护中的应用情况及新的发展动态。 齐向辉 陈华友 蒙健宗 侯守海 梁淑华 徐虹 黄日波关键词:海藻糖 器官 外源有机酸对于Propionibacterium freudenreichii CCTCC M207015发酵生产丙酸的影响 被引量:1 2009年 考察了外源有机酸(丙酸、乙酸、琥珀酸)对于游离细胞与纤维床反应器生产丙酸的影响。结果表明,以Propionibacterium freudenreichii CCTCC M207015为生产菌株时,纤维床反应器具有比游离细胞更强的丙酸、乙酸耐受性,其中丙酸的抑制现象比乙酸的更加严重。此外,外源琥珀酸可以作为丙酸合成的前体物质对P.freudenreichii CCTCC M207015发酵生产丙酸产生促进作用。 王桂兰 冯小海 吴波 李莎 徐虹关键词:PROPIONIBACTERIUM 琥珀酸 产D-塔格糖菌株的筛选与鉴定 被引量:3 2009年 从土壤、泡菜汁、牛奶等样品中筛选获得2株高产D-塔格糖的菌株,根据16S rDNA序列比对并结合菌株的形态特征、生理生化特征分析,鉴定其分别为发酵乳杆菌和植物乳杆菌,且命名为Lactobacillus fermentumNXTag-1和Lactobacillus plantarum NXTag-2。菌株NXTag-1和NXTag-2表现出不同的产L-阿拉伯糖异构酶的能力,其最高酶活分别为5.93U/mL和5.05U/mL,以80g/LD-半乳糖为底物,分别产30g/L和26g/L的D-塔格糖。 汪芙蓉 徐虹 李莎 朱宏阳 环民霞关键词:乳酸菌 生物转化 D-塔格糖