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国家高技术研究发展计划(2006AA10A206)

作品数：44 被引量：209H指数：8
相关作者：焦新安张培君赵战勤贺云霞孙慧玲更多>>
相关机构：华中农业大学扬州大学首都师范大学更多>>
发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 44篇期刊文章
  • 3篇会议论文

领域

  • 35篇农业科学
  • 10篇生物学
  • 5篇医药卫生

主题

  • 30篇杆菌
  • 9篇嗜血杆菌
  • 9篇免疫
  • 9篇副猪嗜血杆菌
  • 9篇大肠杆菌
  • 6篇蛋白
  • 6篇疫苗
  • 6篇支气管败血波...
  • 6篇沙门氏菌
  • 6篇波氏杆菌
  • 5篇活性
  • 5篇基因
  • 5篇减毒
  • 4篇胸膜肺炎
  • 4篇胸膜肺炎放线...
  • 4篇鼠伤寒
  • 4篇免疫原性
  • 4篇克隆
  • 4篇减毒沙门氏菌
  • 4篇DNA疫苗

机构

  • 12篇华中农业大学
  • 11篇扬州大学
  • 10篇首都师范大学
  • 10篇北京市农林科...
  • 4篇河南科技大学
  • 4篇中国农业科学...
  • 3篇东北农业大学
  • 3篇吉林大学
  • 3篇中国农业大学
  • 2篇长江大学
  • 1篇江苏农牧科技...
  • 1篇华中师范大学
  • 1篇湖北大学
  • 1篇河南农业大学
  • 1篇西南大学
  • 1篇延边大学
  • 1篇中国兽医药品...
  • 1篇中国农业科学...
  • 1篇中国农业科学...
  • 1篇辽宁省重大动...

作者

  • 10篇焦新安
  • 9篇赵战勤
  • 9篇叶飞
  • 9篇贺云霞
  • 9篇张培君
  • 8篇潘志明
  • 8篇吴斌
  • 8篇王宏俊
  • 8篇陈焕春
  • 8篇龚玉梅
  • 8篇孙慧玲
  • 6篇徐慧
  • 5篇陈祥
  • 5篇薛云
  • 5篇刘秀梵
  • 4篇黄金林
  • 4篇丁轲
  • 4篇王臣
  • 4篇高崧
  • 4篇程相朝

传媒

  • 14篇微生物学报
  • 4篇畜牧兽医学报
  • 3篇黑龙江畜牧兽...
  • 3篇动物医学进展
  • 2篇安徽农业科学
  • 2篇中国人兽共患...
  • 1篇中国兽医学报
  • 1篇中国生物制品...
  • 1篇华北农学报
  • 1篇中国兽医杂志
  • 1篇中华微生物学...
  • 1篇畜牧与兽医
  • 1篇河南农业科学
  • 1篇病毒学报
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇东北农业大学...
  • 1篇中国预防兽医...
  • 1篇吉林大学学报...
  • 1篇Journa...
  • 1篇河南科技大学...

年份

  • 1篇2016
  • 1篇2015
  • 8篇2011
  • 11篇2010
  • 7篇2009
  • 10篇2008
  • 9篇2007
共 44 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
大肠杆菌Ee株SLT-IIeB与FedF基因在大肠杆菌中融合表达\及抗血清的中和特性
根据猪水肿病大肠杆菌Ee株主要免疫原性片段SLT-IIeB和FedF的基因序列,利用PCR技术克隆目的片段,并将SLT-IIeB和FedF基因依序串联于谷胱甘肽-S-转移酶(GST)表达系统的GST下游,在大肠杆菌中成功...
刘国平吴斌林艺远胡长敏郭爱珍金梅林陈焕春
文献传递
副猪嗜血杆菌外膜蛋白TbpB基因的克隆和表达
2011年
为了克隆和表达副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)外膜蛋白TbpB基因,试验采用基因工程的方法对已发布的HPS外膜蛋白P5序列进行相关序列分析,设计并合成引物,以HPS血清5型基因组为模板,通过PCR扩增HPS外膜蛋白P5编码基因,获得长为1 116 bp的预期基因片段。该基因编码372个氨基酸的蛋白质,预测分子质量约为41 ku,将该基因片段定向克隆至表达载体pGE X-6p-1中。结果表明:诱导表达后分子质量约为67 ku,与副猪嗜血杆菌阳性血清发生了特异性反应。说明该蛋白与抗体发生了反应,有一定免疫原性。
叶飞张培君田德雨孙慧玲王宏俊龚玉梅贺云霞
关键词：副猪嗜血杆菌克隆
抗菌肽CAP18在大肠杆菌中表达、纯化及活性的初步鉴定被引量：2
2008年
根据抗菌肽CAP18活性片段的氨基酸序列,采用SOE技术,设计合成了CAP18的编码基因,将其克隆至pMD18-T载体,进行序列测定后亚克隆至pET-32a(+)表达载体中,在E.coli BL21(DE3)中表达融合蛋白CAP18。经Ni2+亲和层析后回收CAP18融合蛋白,纯度达到了85%以上。对纯化的融合蛋白进行酶切,用液体生长抑制方法检测切割后样品的活性,结果表明重组抗菌肽CAP18对大肠杆菌具有抑制活性。
徐灵龙石星明王云峰史春林王玫孙妍童光志
关键词：融合基因抑菌活性
副猪嗜血杆菌15个血清型标准分离株对小鼠毒力的研究被引量：10
2011年
为了确定Balb/c小鼠是否适合作为副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)的试验动物模型,试验用1～15血清型HPS标准菌株感染Balb/c小鼠,每只小鼠接种量为1.0×109 cfu。结果表明:用血清型1,2,5,10,12,13,14接种的5只小鼠均死亡4只,用血清型4,15接种的5只小鼠分别死亡2,3只,用血清型3,6,7,8,9,11接种的5只小鼠均没有死亡;各血清型的毒力与猪体试验的结果基本相符。说明Balb/c小鼠适合作为副猪嗜血杆菌的试验动物模型。
贺云霞徐慧叶飞孙慧玲王宏俊龚玉梅张莉黄秀芬张培君
关键词：副猪嗜血杆菌标准菌株小鼠毒力
禽致病性大肠杆菌未知功能基因突变株的构建及致病特性分析
2015年
采用抑制差减杂交技术(SSH)对禽致病性大肠杆菌(APEC)高致病株E037(血清型O78)与非致病菌株K-12 MG1655进行基因组差异片段克隆与分析。从E037株中共检出17个特异性差异片段,选取其中的编号为88#的基因进行突变株的构建。通过PCR扩增出88#的目的基因片段,并插入到T-easy载体的多克隆位点中,随之克隆到p MEG-375自杀性载体中,构建自杀性载体p MEG375-88#,将突变载体转化到受体APEC E037中,根据同源重组原理,筛选出E03788#基因插入突变株E037-1。对21日龄白来航SPF鸡右胸气囊分别接种E037、E037-1株0.1 mL(108cfu/mL),在6,24和48 h分别扑杀SPF鸡,无菌采集血液、心脏、肝、脾、左肺、肾进行细菌学检查,同时进行病变观察。结果显示:接种鸡6 h后,E037-1在肝、脾和肺中的细菌数比E037明显降低,差异极显著(P<0.01);接种鸡24 h后,E037-1在心脏、肝、脾和肺中的细菌数与E037比较有所降低,差异显著(P<0.05);接种鸡48 h后,E037-1在心、肝中的细菌数比E037明显降低,差异极显著(P<0.01),说明E037-1突变株的致病性明显下降。结果显示88#基因可能是APEC的致病相关基因,其功能值得进一步研究。
刘静徐亚亚卢炜陈祥高崧
关键词：禽致病性大肠杆菌抑制差减杂交
稳定携带新城疫病毒DNA疫苗减毒沙门氏菌的构建及其免疫原性
采用PCR技术从重组质粒pVAX1-F中扩增出新城疫病毒JS5株的融合蛋白(F)基因,将其克隆入真核表达质粒pmcDNA3.1+中,获得重组表达质粒pmcDNA3.1-F。通过电穿孔转化法将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌...
潘志明程宁宁游猛崔一晨黄金林焦新安刘秀梵
关键词：新城疫DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌质粒稳定性免疫效力
文献传递
支气管败血波氏杆菌dnt基因的克隆、表达及活性鉴定被引量：3
2010年
通过PCR扩增获得支气管败血波氏杆菌的全长4 395 bpdnt基因,并利用pET-28a/BL21系统对其进行了融合表达。Western-blot检测结果表明,表达产物具有良好的免疫学活性。使用His-band purification kit纯化后,得到纯度为93.2%的融合蛋白HIS6-DNT。在乳鼠皮肤坏死试验中,表达产物HIS6-DNT和天然DNT均能导致乳鼠皮肤产生坏死性病变。在乳鼠皮肤坏死阻断试验中,兔抗HIS6-DNT血清能中和天然DNT,使其失去对乳鼠皮肤的坏死毒性。试验结果表明,重组蛋白具有天然DNT的生物学毒性和免疫原性,所产生的抗体具有中和活性,为DNT的结构和功能研究奠定了基础。
赵战勤薛云裴洁王臣丁轲程相朝
关键词：支气管败血波氏杆菌
融合蛋白MBP-enterocin A的表达、纯化及抗菌活性检测被引量：4
2010年
以重组质粒pGAIF为模板,PCR扩增编码细菌素enterocin A的基因片段OAH,克隆到表达载体pMAL-p2x中正确构建重组表达质粒pMA。将pMA转化大肠杆菌DH5α,构建enterocin A融合表达系统。加入IPTG诱导目的基因的表达,然后通过亲和层析方法纯化表达产物,并采用琼脂打孔扩散试验或者琼脂点种试验检测抗菌活性。SDS-PAGE分析结果显示,大肠杆菌表达系统能够高效表达可溶性的融合蛋白MBP-enterocin A,其相对分子质量与推测值(约47 000)相符。抗菌活性结果表明,MBP-enterocin A具有抗李斯特菌活性,而对金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠杆菌O157∶H7均不表现活性;以无害李斯特氏菌LIN3为指示菌,MBP-enterocin A纯化样品的抗菌活性可表示为800 BU/mL。
赵爱珍韩文瑜徐兴然
关键词：ENTEROCIN抗菌活性
选择性捕获禽病原性大肠杆菌体内转录序列被引量：8
2007年
采用选择性捕获转录序列(SCOTS)方法鉴定禽病原性大肠杆菌E037株(血清型O78)在感染SPF鸡过程中的转录表达基因。通过总RNA分离、cDNAs合成、PCR扩增和SCOTS对cDNAs选择和致病性特异转录序列的富集,致病性特异的cDNAs被分离鉴定,共获得31个转录序列(命名为aec),其中分别有2、1、4、14、2和8个aec序列与黏附素、LPS的合成、铁的摄取系统、质粒编码基因、噬菌体编码基因和一些其它功能基因相关;从气囊中分离到16个aec序列,心包膜中分离到15个aec序列;有3种与质粒编码基因相关序列在气囊和心包膜中都被分离到。结果显示APEC致病性特异序列包括黏附素、LPS的合成、铁的转运、质粒编码基因、噬菌体编码基因和一些其它功能基因等。通过SCOTS方法建立了一种体内表达致病性特异基因的方法和APEC在自然宿主感染模型中致病性相关基因的表达谱的筛选方法。
陈祥高崧王晓泉焦新安刘秀梵
关键词：禽病原性大肠杆菌
Construction of Mutation Library in Haemophilus parasuis by Inserting Tn5 Transposon and the Screening of Attenuated Strain被引量：1
2011年
[Objective] The study aimed to obtain attenuated strain of Haemophilus parasuis.[Method] Tn5 transposon technology was used to construct a library of mutants.Positive mutants were screened by kanamycin resistance.False positive was identified by PCR and then removed.Mice were infected to detect the virulence of mutants.The bionomics of attenuated strains were detected,too.[Result] The attenuated mutants showed similar reproductive activity to that of wild strain.The virulence of mutants was still stable after 30 passages.[Conclusion] This study provided foundation for exploring the virulence factors and pathogenic mechanism of HPS.
贺云霞徐慧叶飞孙慧玲王宏俊龚玉梅张莉黄秀芬张培君
关键词：TRANSPOSON
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