武汉市科技攻关计划项目(20036004)
- 作品数：3 被引量：20H指数：3
- 相关作者：王戎王华均曹颖光宋珂吴慧华更多>>
- 相关机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：武汉市科技攻关计划项目更多>>
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- TGF-β1基因真核表达载体的构建及在BMSCs中的表达被引量：12
- 2005年
- 目的 研究真核表达载体pCDNA3 .1 (+) TGF- β1 在骨髓间充质干细胞(BMSCs) 中的表达。方法 基因克隆构建pCDNA3 .1 (+) TGF- β1 真核表达载体, 转染大鼠BMSCs, G418 筛选获得稳定转染的细胞, RT- PCR、ELISA和免疫细胞化学检测其表达, MTT 法检测其增殖活性。结果 成功构建含TGF- β1 基因的真核表达载体; RT- PCR、ELISA、免疫细胞化学证实了TGF- β1基因在BMSCs中至少可以表达一个月; MTT法提示转染TGF- β1基因可以促进BMSCs增殖。结论 pCDNA3. 1 (+) TGF -β1转染BMSCs可获得稳定表达。
- 王戎曹颖光王华均吴慧华
- 关键词：骨髓间充质干细胞转化生长因子Β1基因转染
- TGF-β1、EGFP双基因修饰骨髓间充质干细胞的体外实验研究被引量：3
- 2007年
- 目的:构建pTGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,检测其在骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达,为研究基因修饰细胞回植后的迁移转归及成骨作用提供实验基础。方法:构建p TGF-β1-IRES2-EGFP双顺反子真核表达载体,p TGF-β1-IRES2-EGFP与pIRES2-EGFP分别转染BMSCs,并设空白对照。荧光显微镜和细胞免疫组化分别检测GFP和TGF-β1的表达。结果:成功地构建含TGF-β1基因和EGFP基因的真核表达载体。G418筛选10-15 d后有抗性克隆形成。pTGF-β1-IRES2-EGFP转染组抗性克隆中,GFP表达的同时有TGF-β1的表达,而部分抗性克隆(约20%)中有TGF-β1表达的却无GFP表达。pIRES2-EGFP转染组的抗性克隆中有EGFP表达,但无TGF-β1表达。结论:利用IRES构建的含TGF-β1基因和GFP基因的双顺反子真核表达载体,能在部分BMSCs中同时获得表达,可以作为TGF-β1基因修饰BMSCs体内回植后追踪其成骨作用的方法。
- 曹颖光王戎宋珂王华均
- 关键词：转化生长因子Β1增强型绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞
- 转化生长因子-β1基因治疗对种植体周骨质疏松的影响被引量：6
- 2007年
- 目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)基因治疗对种植体周围骨质疏松和骨缺损的影响。方法构建pCDNA3.1(+)-TGF-β1真核表达载体,转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并与聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)体外黏附。制备骨质疏松大鼠股骨植入钛种植体模型,将24只Wister大鼠随机分为实验组、对照组和空白对照组,实验组为在种植体周骨缺损处植入TGF-β1基因修饰BMSCs复合PLGA;对照组为BMSCs复合PLGA。术后第4和8周取标本行免疫组化和组织学分析,观察种植体周骨组织中TGF-β1的表达和组织学变化。结果术后第4周,实验组骨缺损区的TGF-β1表达较对照组和空白对照组明显;第8周实验组骨缺损区被新生骨充填,骨质较对照组和空白对照组明显改善。结论TGF-β1基因修饰BMSCs体内回植后,可在种植体周围骨组织内表达TGF-β1,并可以影响种植体周骨缺损的修复和骨质疏松状况。
- 曹颖光王戎宋珂熊宗强杜建明王华均
- 关键词：转化生长因子-Β1骨髓间充质干细胞基因治疗种植牙
