国家自然科学基金(30672178)
- 作品数：51 被引量：314H指数：11
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- 烫伤大鼠高迁移率族蛋白B1的变化及其对脾淋巴细胞免疫反应的影响被引量：4
- 2007年
- 目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在大鼠烫伤延迟复苏模型中的变化规律及其对淋巴细胞免疫功能的影响。方法96只大鼠随机分为假伤组(n=32)、烫伤组(n=32)和丙酮酸乙酯(EP)治疗组(n=32),分别于伤后1、3、5、7天活杀动物。应用Western blot方法检测血浆中HMGB1含最,采用噻唑蓝法和ELISA检测脾淋巴细胞增殖能力及培养上清中白介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)浓度。结果与假伤组相比,烫伤后1、3、5天大鼠血浆HMGB1含量显著升高(P<0．05或P<0．01)。同时,脾淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应在伤后1～7天明显受抑制(P<0．05);伤后1、3天脾淋巴细胞培养上清中IL-4水平明显增加(P<0．05),而伤后7天IFN-γ含量显著降低(P<0．05)。给予丙酮酸乙酯(EP)治疗组1、3、5天血浆HMGB1含量均明显下降(P<0．05),并明显减轻伤后1～7天脾淋巴细胞的增殖抑制状态,同时提高IFN-γ水平(P<0．05),而IL-4水平在伤后1、3天显著降低(P<0．05)。结论HMGB1对烫伤大鼠脾淋巴细胞免疫功能具有显著影响,它参与了烫伤延迟复苏后机体细胞免疫功能紊乱的发病过程。
- 董月青姚咏明董宁于燕盛志勇
- 关键词：高迁移率族蛋白B1淋巴细胞丙酮酸乙酯
- 不同细胞刺激剂对小鼠调节性T细胞功能活化的影响被引量：15
- 2007年
- 目的研究体外实验中不同细胞刺激剂对小鼠调节性T细胞（Treg）表面T淋巴细胞毒性相关抗原-4（CTLA-4）及叉头翼状螺旋转录因子（Foxp3）表达的影响，并对不同细胞刺激剂在Treg抑制活性发挥中的作用进行比较。方法免疫磁珠法分离健康清洁级BALB／c小鼠脾脏CD4＋CD25＋Treg。采用植物凝集素（PHA，20mg／L）、刀豆蛋白A（ConA,5g／L）及固相包被抗CD3（1mg／L）刺激Treg，观察刺激后24、48和72hCTLA-4及Foxp3表达的时间一效应关系。结果PHA刺激对小鼠Treg细胞表面CTLA-4及Foxp3表达均无显著影响（P均〉0．05）；而ConA表现出一过性的Treg活化作用，24hCTLA-4表达明显上调（P〈0.01），但随刺激时间延长作用减弱，48h和72h后其表达已接近未刺激前的范围，同时ConA未能明显诱导Foxp3表达（P〉0．05）；抗CD3可有效刺激Treg活化，在24、48和72hCTLA-4及Foxp3表达均明显上调（P〈0．05或P〈0．01），其中以作用24h和48h表达上调尤为显著（P均〈0.01）。结论抗CD3在体外实验中能明显刺激Treg活化并诱导其抑制性相关分子CTLA-4及Foxp3的表达，为进一步探讨CD4＋CD25＋Treg的免疫调节效应提供了可能。
- 张莹姚咏明常青董宁
- 关键词：调节性T细胞抗CD3
- 半胱天冬蛋白酶-3在高迁移率族蛋白B1诱导小鼠巨噬细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2008年
- 目的观察半胱天冬蛋白酶（Caspase）-3与核转录因子（NF）．KB在高迁移率族蛋白B1（HMGBl）诱导小鼠腹腔巨噬细胞凋亡中的作用。方法分离培养小鼠腹腔巨噬细胞，随机分为对照组、HMGB1组与抑制剂组（HMGB1作用前1h加入Caspase-3抑制剂Z，DEVD-FMK）。采用Hoechst33342染色观察凋亡的形态学变化、流式细胞术检测巨噬细胞凋亡百分率的变化；应用原位荧光染色及流式细胞术检测Caspase-3活性的变化；同时应用酶联免疫吸附试验检测NF—KBp65蛋白的变化。结果HMGBl组巨噬细胞凋亡率为（38．21±4．85）％、抑制剂组为（16．47±3．91）％，均显著高于对照组（4．21±1．64）％（P〈0．01）。经Hoechst33342染色，荧光显微镜观察HMGBl组凋亡细胞明显增多；原位荧光染色观察到HMGB1组Caspase．3荧光强度明显增强，Caspase-3阳性细胞百分率（29．74±4．55）％显著高于抑制剂组（3．02±1．91）％与对照组（7．19±2．46）％（P〈0．01）。同时，HMGB1组、抑制剂组细胞核NF．KB活性较对照组显著降低（P〈0．05或P〈0．01）。结论Caspase-3和NF-KB是HMGB1诱导巨噬细胞凋亡的重要途径，caspase-3抑制剂可部分阻断HMGB1诱导的巨噬细胞凋亡。
- 姚咏明刘峰董宁于燕盛志勇
- 关键词：高迁移率族蛋白B1脱噬作用巨噬细胞半胱天冬蛋白酶-3核因子KB
- 高迁移率族蛋白B1对小鼠调节性T细胞表达T淋巴细胞毒性相关抗原-4水平的影响及受体机制被引量：3
- 2009年
- 目的观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对小鼠调节性T细胞（Treg）表达细胞毒性T淋巴细胞相关抗原（CTLA）-4水平的影响及其受体机制。方法免疫磁珠法分离正常C3H／HeN[（Toll样受体4（TLR4）野生型）]小鼠脾脏CD4＋CD25＋Treg，接种于细胞培养板，各细胞培养孔均加入可溶性抗CD3和可溶性抗CD28作为辅助活化剂。应用／不应用抗TLR4抗体预封闭CD4＋CD25＋Treg表面TLR4，观察HMGB1刺激CD4＋CD25＋Treg表达CTLA-4的时间．效应关系和剂量-效应关系。结果HMGB1（0．1mg／L）刺激CIM＋CD25＋Treg，cTLA-4在24、48、72h表达水平（47．56±5．49、35．83±4．96和31．94±4．65）较正常对照组水平（79．42±2．79）均显著下降（P〈0．01），以48、72h组下降尤为明显；不同剂量HMGB1刺激CD4＋CD25＋Treg48h其CTLA-4表达水平显著下调（P〈0．01），其中以0．1mg／L和1mg／L组表达水平（分别为33．34±4．00和29．90±4．30）降低幅度尤为明显。经封闭TLR4预处理后，给予HMGB1（0．1mg／L）刺激24、48和72hCD4＋CD25＋Treg表达CTLA-4的水平（90．39±8．80、93．13±4．80和80．29±4．31）均较对正常照组（71．03±4．34）显著增强（P〈0．05或P〈0．01）；而不同剂量HMGB1刺激CD4＋CD25＋Treg48h，仅以0．1mg／L组能显著上调CTLA-4的表达水平（P〈0．01）。结论HMGB1通过TLR4负向调节CD4＋CD25＋Treg表达CTLA-4水平，从而影响Treg的免疫活性。
- 许长涛姚咏明李为民邹一平
- 关键词：高迁移率族蛋白B1TOLL样受体4调节性T细胞
- 肝脏热缺血再灌注损伤的研究进展被引量：4
- 2009年
- 肝脏热缺血再灌注（ischemic reperfusion，IR）损伤是肝脏手术、肝移植、出血I生休克以及严重感染中常见的病理生理过程。因此对肝脏IR损伤的机制研究成为肝外科的研究热点之一，本文就目前国内外关于肝热IR损伤的进展作一综述。
- 谭向龙姚咏明
- 凝溶胶蛋白与创伤后炎症反应被引量：4
- 2010年
- 凝溶胶蛋白（gelsolin,GSN）是机体内重要的肌动蛋白结合蛋白,对肌动蛋白的聚合/解聚具有重要调节作用。其生理效应不仅在于维持细胞结构稳定,而且参与多种细胞活动的调节过程,是一种重要的细胞功能调节蛋白。血浆型GSN是血浆肌动蛋白清除系统主要成员之一,对维持内环境稳定非常重要。严重创伤后血浆中GSN水平显著而持续降低,且与患者预后密切相关。本文综述GSN与创伤后炎症反应的关系。
- 祝筱梅姚咏明盛志勇
- 关键词：凝溶胶蛋白炎症
- 血必净注射液对烫伤大鼠高迁移率族蛋白B1表达和急性肝损伤的影响被引量：3
- 2009年
- 目的了解血必净注射液对烫伤大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达及急性肝损伤的影响。方法制作大鼠30％TBSAm度烫伤模型，将78只大鼠按随机数字表法分为假伤组（18只）、烫伤组（30只）和血必净治疗组（30只），分别于伤后8、24、72h处死取材。观察肝组织病理学变化；测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平；RT—PCR法检测肝组织HMGB1 mRNA表达，蛋白质印迹法及免疫组织化学法检测肝组织HMGB1蛋白相对表达量，结果分别以积分吸光度比值、吸光度值表示。结果光学显微镜下可见烫伤组大鼠肝组织有大量炎性细胞浸润，以伤后24h较多；治疗组则明显减少。与假伤组比较，烫伤组大鼠血清ALT、AST水平显著增高（P〈0．05或P〈0．01），肝组织HMGB1基因和蛋白表达于伤后8～72h显著增强（P〈0．05或P〈0．01）。与烫伤组比较，治疗组大鼠血清ALT、AST水平有不同程度下降（P〈0．05或P〈0．01）；伤后24、72h肝组织HMGB1 mRNA表达分别为0．60±0．15、0．55±0．07，蛋白水平分别为163±13、160±16，显著低于烫伤组的0．75±0．12、0．78±0．11和200±13、175±14（P〈0．05或P〈0．01）。结论HMGB1作为晚期炎性因子，参与了严重烫伤大鼠肝组织炎性反应的病理过程。血必净治疗可明显下调HMGB1表达，有助于减轻延迟复苏导致的急性肝损伤。
- 王彦博姚咏明王强王文江
- 关键词：烧伤血必净注射液
- 高迁移率族蛋白B1诱导的树突状细胞对T淋巴细胞增殖及功能性极化的影响被引量：5
- 2008年
- 目的观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）诱导的树突状细胞（DCs）对大鼠脾T淋巴细胞增殖反应及功能性极化的影响，并探讨其作用机制。方法分离正常Wistar大鼠脾脏DC后置于24孔培养板（1×10^6／孔），采用1mg／L的HMGB1刺激48h，DC与脾T淋巴细胞的细胞比例分别为1：50、1：100、1：150、1：200混合，于共同作用后3、5d观察脾T淋巴细胞增殖及功能性极化的情况。结果DC与T淋巴细胞以1：50、1：100、1：150、1：200的比例相互作用，脾T淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应均明显增强、上清液中干扰素（IFN）-γ含量显著升高和白细胞介素（IL）-4含量明显降低（P〈0．01），其中细胞比例1：150组最为明显。脾T淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应增强、IFN-γ含量增加和1L4含量降低均以第3天最为显著[分别为（0．646±0．028）、（268．08±14．07）、（6．16±0．59）ng／L，P值均〈0．01]。结论HMGB1诱导的DC使脾T淋巴细胞对丝裂原刺激的增殖反应明显增强，并促进T淋巴细胞向Th1功能性极化。
- 徐姗姚咏明董宁刘峰于燕盛志勇
- 关键词：高迁移率族蛋白B1树突状细胞T淋巴细胞增殖反应
- 烧伤脓毒症发病机制与防治对策被引量：34
- 2008年
- 脓毒症指由感染引起的全身炎性反应综合征，证实有细菌存在或有高度可疑感染灶。脓毒症是创伤、烧伤、休克、大手术等临床急危重患者的严重并发症之一，进一步发展可导致脓毒性休克、多器官功能障碍综合征（MODS），系当前烧伤外科面临的棘手难题，已成为提高临床危重患者救治成功率的主要障碍。因此，深入了解脓毒症的发病机制及其可能防治策略具有重要意义。
- 姚咏明盛志勇柴家科
- 关键词：烧伤脓毒症多器官功能衰竭抗生素预防
- 高迁移率族蛋白B1的组织损伤效应及其干预途径被引量：39
- 2007年
- 高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是严重感染所致脓毒症的重要晚期介质,参与了包括肺脏、肝脏、肠道在内的多器官损害过程。采用HMGB1中和抗体或特异性拮抗剂抑制其分泌(丙酮酸乙酯、α7烟碱乙酰胆碱受体激动剂)或下调其基因表达(正丁酸钠、信号通路抑制剂)的干预方法有助于减轻组织损伤效应,并可能为严重脓毒症的防治开辟新途径。
- 姚咏明徐珊盛志勇
- 关键词：高迁移率族蛋白B1脓毒症多器官功能障碍综合征干预策略
