广东省大学生创新实验项目(KY1039)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 相关机构：广东医学院江门市中心医院广东医科大学更多>>
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- 人肥大细胞羧肽酶真核表达重组质粒DNA的免疫原性观察
- 2011年
- 目的观察人肥大细胞羧肽酶(hMC-CP)真核表达重组质粒DNA的免疫原性。方法以分泌性和非分泌性hMC-CP真核表达重组质粒(pcDNA3.1/S-CP,pcDNA3.1/CP)DNA为免疫原,分别以皮下及肌肉两种途径免疫BALB/c小鼠,间隔免疫时间2周,共免疫3次;末次免疫后第7天,采用ELISA法检测血清中特异性抗体的产生。结果以pcDNA3.1/S-CP、pcDNA3.1/CP DNA免疫小鼠后,都能诱导产生抗hMC-CP抗体,而pcDNA3.1空载体和NS则不能。通过肌注途径,以pcDNA3.1/S-CP免疫小鼠所得血清抗体效价均值为1∶6 400,以pcDNA3.1/CP免疫小鼠所得血清抗体效价均值为1∶3 200,两者比较,P>0.05;通过皮下注射途径,以pcDNA3.1/S-CP、pcDNA3.1/CP DNA免疫小鼠所得的免疫血清抗体效价均值均为1∶3 200,两者比较,P>0.05;而同一载体肌肉与皮下免疫,所得血清抗体效价比较,P>0.05。结论 hMC-CP真核表达重组质粒DNA具有较好的免疫原性,表达质粒是否为分泌性表达不影响其免疫原性,其免疫原性也不受质粒DNA注射途径的影响。
- 侯玉涛邝珠芳柯庆喜陈章权
- 关键词：真核表达质粒
- 人肥大细胞类糜蛋白酶的促血管生成作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨人肥大细胞类糜蛋白酶(mast cell chymase,MC-Chy)的促进血管生成作用。方法将30只BALB/c小鼠随机分为6组,每组5只。4组实验组小鼠分别予腹股沟部皮下注射基质胶与MC-Chy质粒DNA50μg(Chy50组)、100μg(Chy100组)、150μg(Chy150组)、200μg(Chy200组)的混合物;抑制剂组小鼠给予MC-Chy质粒DNA150μg与基质胶的混合物腹股沟部皮下注射,然后每天注射类糜蛋白酶抑制剂chymostatin10μg至皮下的基质胶栓;对照组小鼠行腹股沟部皮下注射生理盐水及基质胶混合物。注射后第7天,以同样剂量的质粒DNA注射至各实验组小鼠皮下的基质胶栓,于第12天处死小鼠,取出胶栓,测定MC-Chy活性及血红蛋白浓度,并进行免疫组化学染色、HE染色,测量血管密度计数。结果 Chy50组(7.5±1.4)、Chy100组(21.7±2.7)、Chy150组(28.4±2.1)、Chy200组(25.8±2.0)血红蛋白浓度与对照组(2.9±0.7)比较差异均显著(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01)。Chy50组(9.3±2.7)、Chy100组(12.2±4.0)、Chy150组(15.4±3.1)、Chy200组(13.5±3.6)血管密度与对照组(5.9±2.7)比较,均存在显著性差异(均P<0.01)。HE染色可见到血管,免疫组化染色可见到棕黄色阳性颗粒及血管腔。结论人MC-Chy具有促进血管生成的作用。
- 张志伟侯玉涛何素辉邝珠芳陈章权
- 关键词：肥大细胞类糜蛋白酶血管生成
- 肥大细胞活化产物的类糜蛋白酶是促进小鼠基质胶栓中血管生成的主要介质
- 2021年
- 目的探讨肥大细胞活化产物的促进血管生成作用。方法分离SD大鼠腹腔肥大细胞(RPMC),用钙离子载体刺激使其活化,提取活化产物并检测其类糜蛋白酶活性。选取BALB/c小鼠30只,随机分为对照组、活化产物组和抑制剂组(每组10只),用基质胶栓模型来研究活化产物的血管生成作用。采用氰化高铁血红蛋白(HiCN)法测定胶体内血红蛋白(Hb)浓度,HE染色观察胶体内血管分布情况,并用CD34免疫组织化学染色法检测基质胶中血管密度(MVD)。结果分离获得的RPMC激活后可以检测到类糜蛋白酶活性。小鼠基质胶栓实验显示,活化产物注射组基质胶内的Hb水平约为对照组的7倍,而抑制剂组的Hb水平比实验组下降了80.8%。HE染色显示,实验组基质胶中可见新生血管,有些可以观察到血管腔。MVD检测结果显示活化产物组的MVD约为对照组的5倍,而抑制剂组比实验组下降66.2%。结论肥大细胞活化产物中类糜蛋白酶是促进小鼠基质胶栓中血管生成的主要介质。
- 侯玉涛梁晓东梁晓东车辑陈章权
- 关键词：肥大细胞类糜蛋白酶血管生成
