国家自然科学基金(81001216)
- 作品数：7 被引量：11H指数：3
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- 相关机构：中国疾病预防控制中心军事医学科学院解放军第307医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国疾病预防控制中心青年科研基金更多>>
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- PIAS3过表达对肺腺癌细胞A549增殖的影响及意义被引量：1
- 2015年
- 目的:探索活化型信号转导子和转录激活子3蛋白抑制剂(PIAS3)对肺腺癌A549细胞增殖的影响及相关意义,为进一步研究利用辐射应答基因启动子驱动的PIAS3腺相关病毒载体联合放射治疗肺腺癌提供基础。方法:利用MTT比色试验和克隆形成率实验检测转染p CMV-Sport6-PIAS3后对肺腺癌细胞A549存活和增殖的影响;利用免疫荧光染色实验检测共转染p CMVSport6-PIAS3、PRC-CMV、PRC-STAT3及PRC-STAT3-CT后对p-STAT3入核的影响。结果:PIAS3过表达导致A549细胞生长显著抑制,克隆形成能力显著降低;免疫荧光染色实验结果表明,转染p CMV-Sport6-PIAS3后,STAT3入核被显著抑制,通过共转染表达STAT3和STAT3-CT后,STAT3入核仍显著受到抑制。结论:PIAS3过表达可抑制STAT3的入核,继而阻断其功能,从而降低肺腺癌细胞A549的生长和增殖能力。
- 俞庆华李峰生黄乃祥高玲
- 关键词：肺腺癌细胞存活
- 酪氨酸激酶在紫外线辐射生物效应中的作用
- 2014年
- 紫外线是一类波长为10 ～ 400 nm的电磁波,窄谱中波紫外光疗法（NB-UVB）是世界上较先进的皮肤光疗方法,对由黑色素减少所致的白癜风、白化病和皮肤炎症后的色素减退治疗效果良好.其生物学机制主要是刺激黑素细胞的增殖和移行,当黑素细胞吸收UVB能量后,刺激酪氨酸酶的活性并加速酪氨酸的氧化和聚合,使黑色素合成增加.然而有研究发现紫外线也是引发色素减退的一个诱因.鉴于酪氨酸激酶在黑色素合成中所发挥的重要作用,本文从受体酪氨酸激酶介导的Ras/Raf/MAPK和PI-3K/Akt途径,非受体酪氨酸激酶介导的Sre、Bcr-Abl和JAK/STAT途径5个方面对酪氨酸激酶在紫外照射生物效应中的作用进行综述.
- 高玲李晶董晓霞
- 关键词：受体酪氨酸激酶辐射生物效应JAKPI-3KBCR-ABL
- 腺相关病毒载体在各种细胞株中的感染效率及表达特性研究
- 2015年
- 目的:研究腺相关病毒载体(AAV)感染各类正常细胞和肿瘤细胞的效率,为相关研究提供参考。方法:利用脂质体将重组腺相关病毒的包装质粒AAV-DJ、Helper以及表达绿色荧光蛋白(GFP)的穿梭质粒AAV-GFPP转染293FT细胞进行病毒包装,收集病毒液后感染2种正常细胞和14种肿瘤细胞,24 h后倒置荧光显微镜下观察GFP的表达,并随机选取3个视野统计感染GFP的细胞数目。结果:GFP重组腺相关病毒对各种细胞的感染效率存在差别,感染效率最高的为293FT细胞(占96.2%)和Hela细胞(占81.86%),对SCG7901、SEM-M和SP20细胞的感染效率近乎为零。结论:GFP重组腺相关病毒对正常细胞293FT感染效率最高,对肿瘤细胞Hela、SMC7721、BGC823、PANC-1、A549、A875、C6和MCF-7的感染效率较高,这类细胞适合使用AAV作为载体进行外源基因的导入及功能研究。
- 周昆明李峰生俞庆华周丁华高玲
- 关键词：腺相关病毒载体绿色荧光蛋白正常细胞肿瘤细胞
- 辐射对脑海马神经元的影响及其作用机制研究被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨辐射对脑海马神经元的影响以及脑海马的损伤机制,为放射性脑损伤治疗策略提供理论基础。方法:查阅相关参考文献,涉及以下研究方法:氚水照射妊娠小鼠后,利用放射免疫(RIA)检测试剂盒测定仔鼠脑垂体中神经肽类物质生长抑素(SOM)和下丘脑中精氨酸加压素(AVP)含量;氚水和X射线照射妊娠大鼠后,分离培养仔鼠神经元与对照组进行形态学比较,并利用HE染色方法检测大脑皮质第V层凋亡细胞数。结果:氚水照射后雄性仔代小鼠脑垂体中SOM和下丘脑中AVP含量分别显著升高和降低;氚水可致大鼠神经元形态学发生明显变化,同时可使大脑皮质第V层凋亡细胞的百分数增加,且神经元凋亡百分数高于X射线照射组。结论:辐射对脑神经肽含量产生影响,对神经行为和学习记忆能力产生影响,可致脑海马神经元发生形态学改变,并引起中脑细胞凋亡。
- 高玲刘青杰
- 关键词：脑海马神经元神经干细胞凋亡
- 电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 研究电离辐射对肺腺癌细胞A549线粒体的影响.方法 0、0.5、3和8 Gy60Co γ射线照射A549细胞后,利用JC-1探针检测照射后肺腺癌细胞A549线粒体膜电位的变化；使用ATP试剂盒检测辐射对A549细胞ATP生成的影响；利用实时定量PCR方法检测线粒体拷贝数.结果 在照射后24 h,各剂量组A549细胞膜电位出现明显改变（F=243.44,P＜0.05）,与0 Gy照射组相比,0.5和3 Gy照射的A549细胞线粒体膜电位显著升高（t=-10.12、-5.59,P＜0.05）,而8 Gy照射的线粒体膜电位显著降低（t=15.22,P＜0.05）,照后48 h各照射组线粒体膜电位基本恢复正常（F=10.36,P＜0.05）；照射后24 h ATP水平与膜电位变化趋势一致（F=97.08,P＜0.05）,其中0.5和3 Gy A549细胞中ATP水平升高（t=1.66、7.27,P ＜0.05）,8 Gy照射组降低（t=-8.24,P＜0.05）；照射后48 h,ATP水平也发生变化（F =39.49,P＜0.05）,0.5和3 Gy照射后A549细胞中ATP水平显著高于0 Gy组（=4.60、8.53,P＜0.05）.照射后24 h线粒体拷贝数显著增加,其中0.5 Gy mtDNA拷贝数增加至对照组的12倍（t=0.02,P＜0.05）,3和8 Gy组mtDNA拷贝数分别增加至对照组的7和10倍（=9.68、15.10,P＜0.05）.结论 大剂量电离辐射会导致A549细胞线粒体膜电位降低,从而影响ATP的生成,中等剂量以下的照射会导致A549细胞线粒体膜电位代偿性增高,从而使ATP的生成增多,8 Gy以内的电离辐射可使mtDNA拷贝数代偿性升高.
- 高玲刘巧维冯先武封江彬刘青杰
- 关键词：线粒体膜电位三磷酸腺苷
- 电离辐射对人肺腺癌A549细胞中STAT3靶基因表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的探讨1射线照射对人肺腺癌A549细胞中促血管生成基因VEGF以及抗凋亡基因bcl-2和存活素（survivin）表达的影响及其与转录因子STAT3的关系。方法利用RT．PCR和Westernblot检测2和4Gy1射线照射后24hA549细胞中VEGF、Bel-2和Survivin表达水平以及STAT3抑制后VEGF和Survivin的表达变化。结果2和4Gy1射线照射后，VEGF和Survivin的表达均显著升高，而Bel-2的表达不受1射线照射的影响。利用抑制剂AG490阻断Y射线照射诱导的STAT3激活后，辐射诱导的VEGF和Survivin的表达升高被抑制。结论y射线照射可通过激活STAT3上调A549细胞中Survivin和VEGF的表达，Survivin蛋白的上调在一定程度上抑制了辐射诱导的肿瘤细胞凋亡，而VEGF的表达升高则有助于肿瘤血管生成。
- 高玲宋秀军李晓江其生陈肖华
- 关键词：电离辐射STAT3血管内皮细胞生长因子存活素
- γ射线诱导人肺腺癌H322细胞STAT3激活的实验研究被引量：3
- 2014年
- 目的 探索辐射诱导人肺腺癌细胞STAT3活化的剂量和时间效应及其上游信号通路.方法 60Co γ射线照射p53突变型肺腺癌细胞H322,0～ 10 Gy照射后0～24 h提取蛋白,利用Western blot方法和免疫荧光染色实验,检测H322细胞中磷酸化STAT3表达和入核情况,以及其上游信号分子p-EGFR水平.结果 Western blot方法和免疫荧光染色实验均表明2～10 Gy照射后（1.9 ～6.6倍）0～24 h（1.2 ～9.5倍）均可诱导肺腺癌细胞H322中p-STAT3表达增高;同时发现H322细胞中出现p-EGFR表达的增加,其为对照组的4.3 ～19.2倍.结论 60Co γ射线照射后引起肺腺癌H322细胞中p-STAT3表达增高,STAT3的激活可能由EGFR/STAT3信号通路所介导.
- 高玲刘巧维李峰生陈肖华封江彬陆雪陈德清苏旭
- 关键词：肺腺癌P-STAT3表皮生长因子受体
