广西壮族自治区自然科学基金(2011GXNSFA018273)
- 作品数：14 被引量：43H指数：5
- 相关作者：肖强谢玉波王晓通韦尉元罗文更多>>
- 相关机构：广西医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Cdx2小分子干扰RNA对胃癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察Cdx2小分子干扰RNA（Cdx2-siRNA）对人胃癌MGC-803细胞增殖及凋亡的影响。方法设计合成针对Cdx2基因的siRNA寡核苷酸以及阴性对照siRNA。将人胃癌MGC-803细胞接种于培养板中，分为3组，正常对照组不作任何处理，Cdx2-siRNA组和阴性对照组分别用Lipofectamine^TM2000将Cdx2-siRNA或阴性对照siRNA转染进细胞内。应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot技术检测转染24h时胃癌MGC-803细胞中Cdx2mRNA和蛋白的表达，应用噻唑蓝（MTT）比色法检测24、36、48、60、72h的细胞活力，应用克隆形成实验检测转染7d时MGC-803细胞增殖的变化，应用流式细胞仪检测转染24h时MGC-803细胞周期和细胞凋亡的变化。结果Cdx2-siRNA或阴性对照siRNA成功转染进胃癌MGC-803细胞内；Cdx2-siRNA组Cdx2mRNA和蛋白的表达量分别为（0．07±0．01）和（0．15±0．02），明显低于阴性对照组和正常对照组（P〈0．05）；Cdx2-siRNA组细胞活力和增殖能力下降，24、36、48、60、72h的吸光度值分别为（0．125±0．003）、（0．193±0．005）、（0．223±0．005）、（0．267±0．003）、（0．315±0．006），克隆形成数为（51．4±3．2），均明显低于阴性对照组和正常对照组（P〈0．05）；而且，Cdx2-siRNA组细胞凋亡率为（12．5±0．6）％，G。／G，期比例为（73．1±7．8）％，明显高于阴性对照组和正常对照组（P〈0．05）；阴性对照组和正常对照组比较，上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Cdx2-siRNA可抑制人胃癌细胞的活力和增殖能力，其机制与诱导细胞凋亡、使细胞周期停滞有关。
- 崔建华谢玉波王晓通肖强
- 关键词：胃癌RNA干扰CDX2增殖脱噬作用
- Cdx2-siRNA对胃癌MGC-803细胞黏附能力的影响被引量：2
- 2011年
- 我们选用人胃癌MGC-803细胞为实验对象，设计合成针对Cdx2的小干扰RNA（siRNA）并转染MGC-803细胞，观察Cdx2基因表达下调后对细胞黏附能力以及PTEN表达的的影响。
- 吴锟王晓通谢玉波肖强
- 关键词：胃癌MGC-803MGC-803细胞PTEN表达CDX2表达下调
- Cdx2-RNA基因沉默转染胃癌MGC-803细胞对中药人参黄芪复方药物敏感性的影响被引量：6
- 2013年
- 目的观察携带人尾型同源盒转录因子2(Cdx2)基因沉默的重组慢病毒颗粒(Cdx2-RNAi-LV)转染人胃癌MGC-803细胞对中药人参黄芪复方药物敏感性的影响。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测Cdx2基因表达;MTT方法检测细胞的增殖抑制率;Giemsa染色检测细胞的克隆形成;流式细胞仪检测细胞的凋亡;细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果含Cdx2基因沉默的重组慢病毒颗粒转染人胃癌MGC-803细胞有效沉默Cdx2基因表达;中药人参黄芪复方能抑制人胃癌MGC-803细胞生长、抑制细胞克隆形成、诱导细胞凋亡、抑制细胞迁移;Cdx2基因沉默转染胃癌MGC-803细胞组应用中药人参黄芪复方,其细胞增殖抑制率、细胞凋亡率明显高于单用中药未转染组(P<0.05),其细胞克隆形成、细胞迁移面积均显著低于单用中药未转染组(P<0.05)。结论 Cdx2基因沉默转染人胃癌MGC-803细胞,可明显提高胃癌细胞对中药人参黄芪复方的敏感性。
- 韦尉元吴琨王晓通谢玉波肖强
- 关键词：CDX2胃癌
- 慢病毒RNA干扰E2F-1对人胃癌裸鼠皮下瘤耐药性的影响被引量：5
- 2013年
- 目的观察E2F-1基因沉默的慢病毒载体E2F-1／RNAi—LV对人胃癌裸鼠皮下瘤耐药性的影响。方法将人胃癌SGC7901-顺铂（DDP）耐药细胞接种于裸鼠皮下，建立人胃癌耐药裸鼠皮下瘤模型。将成瘤的36只裸鼠随机分为E2F-1／RNAi—LV组、LV—scrRNAi组和PBS组，每组12只。隔日向3组裸鼠肿瘤内分别注射E2F—1／RNAi—LV、LV—scrRNAi或PBS，并按体重腹腔注射DDP，共9次。注射期间和处死裸鼠后测量各组裸鼠的肿瘤体积。应用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡指数，应用半定量RT—PCR和Western blot法检测肿瘤组织中E2F-1、c—Myc、survivin、多药耐药基因1（MDRl）和多药耐药相关蛋白（MRP）mRNA和蛋白的表达。结果注射慢病毒后，E2F-1／RNAi—LV组肿瘤的生长速度明显减慢。处死裸鼠后，E2F-1／RNAi—LV组裸鼠的肿瘤体积为（745．13±154．42）mm^3，明显低于LV—scrRNAi组[（1988．80±171．35）mm^3]和PBS组[（1633．48±215．25）mm^3，P〈0．05]。E2F-1／RNAi-LV组肿瘤组织的凋亡指数为（27．5±9．7）％，明显高于LV-scrRNAi组[（7．0±1．1）％]和PBS组[（7．3±1．2）％，P〈0．05]。E2F-1／RNAi—LV组肿瘤组织中E2F-1mRNA和蛋白的表达量分别为0．40±0．32和0．35±0．01，明显低于LV-scrRNAi组和PBS组（P〈0．05）。E2F-1／RNAi—LV组c—Myc、survivin、MDR1和MRPmRNA和蛋白的表达量亦明显低于LV-scrRNAi组和PBS组（均P〈0．05）。结论慢病毒载体E2F-1／RNAi-LV瘤内注射可降低人胃癌SGC7901-DDP耐药细胞对DDP的耐药性,抑制人胃癌耐药裸鼠皮下瘤的生长。
- 孔凡彪王晓通谢玉波肖强
- 关键词：胃肿瘤裸鼠
- RNA干扰鼠尾同源盒转录因子2基因沉默逆转人胃癌裸鼠耐药模型耐药性的研究被引量：1
- 2013年
- 多药耐药（MDR）的产生是胃癌化疗失败的主要原因，而特异性核转录凶子鼠尾同源盒转录因子2（Cdx2）的高表达可阻碍化疗药物甲氨碟呤（MTX）破坏细胞[1]，但Cdx2沉默在胃癌多药耐药中的作用尚不明确。本实验旨在观察RNA干扰介导Cdx2基因沉默对人胃癌耐顺铂细胞SGC-7901／DDP裸鼠皮下移植瘤模型化疗敏感性的影响。
- 韦尉元孔凡彪王晓通谢玉波肖强
- 关键词：RNA干扰介导基因沉默人胃癌耐药模型裸鼠鼠尾
- Cdx2-siRNA对胃癌细胞Survivin和Caspase-9表达的影响被引量：10
- 2012年
- 目的:观察Cdx2小分子干扰RNA(Cdx2-siRNA)对人胃癌MGC-803细胞凋亡及Survivin、Caspase-9表达的影响。方法:设计合成针对Cdx2基因的siRNA寡核苷酸以及阴性对照siRNA。将人胃癌MGC-803细胞接种于培养板中,分为3组,正常对照组不作处理,阴性对照组和Cdx2-siRNA组分别用LipofectamineTM2000将阴性对照siRNA或Cdx2-siRNA成功转染进细胞内。应用流式细胞仪检测转染24h时MGC-803细胞凋亡的变化,并应用RT-PCR和Western blot技术检测胃癌MGC-803细胞中Survivin和Caspase-9基因mRNA和蛋白的表达。结果:Cdx2-siRNA组MGC-803细胞的凋亡率为(12.5±0.6)%,明显高于阴性对照组和正常对照组(P<0.05);Cdx2-siRNA组Survivin mRNA和蛋白的表达量分别为(0.14±0.04)和(0.51±0.12),明显低于阴性对照组和正常对照组(P<0.05);Cdx2-siRNA组Caspase-9 mRNA和蛋白的表达量分别为(0.98±0.24)和(1.78±0.41),明显高于阴性对照组和正常对照组(P<0.05);而阴性对照组和正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Cdx2-siRNA促进人胃癌细胞的凋亡,其机制可能与其抑制Survivin的表达、增强Caspase-9的活性有关。
- 杨杰王晓通谢玉波肖强
- 关键词：小分子干扰RNACDX2SURVIVINCASPASE-9
- Cdx2过表达对裸鼠人胃癌移植瘤生长和转移的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察Cdx2基因过表达对裸鼠人胃癌移植瘤生长和转移的影响。方法利用脂质体将pCMV-Cdx2-HA质粒或pCMV-HA质粒分别转染人胃癌MGC-803细胞,命名为MGC-803/Cdx2细胞或MGC-803/EV细胞。将两种细胞分别注射入裸鼠近腋右背侧皮下,待皮下成瘤后将瘤组织接种于胃,建立裸鼠人胃癌移植瘤模型:接种MGC-803/Cdx2皮下瘤的裸鼠为实验组,接种MGC-803/EV皮下瘤的裸鼠为对照组;30 d后处死裸鼠,观察移植瘤生长、转移情况,并应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测移植瘤中Cdx2 mRNA和蛋白的表达。结果实验组肿瘤体积为(13.42±2.34)mm3,明显低于对照组的肿瘤体积(17.59±2.80)mm3(P<0.05);实验组成瘤率(73.3%)低于对照组成瘤率(86.7%);两组肿瘤转移情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);实验组肿瘤组织Cdx2 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论 Cdx2过表达抑制裸鼠人胃癌移植瘤的生长,但对肿瘤转移无明显影响。
- 廉超王晓通谢玉波肖强
- 关键词：CDX2胃癌移植瘤
- 尾型同源盒基因2沉默对人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP多药耐药性的逆转被引量：5
- 2014年
- 目的探讨尾型同源盒基因2（Cdx2）沉默对逆转人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP多药耐药性的影响。方法将对数生长期的人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP接种于培养板中，分为3组：感染RNA干扰Cdx2基因沉默重组慢病毒载体（pLL—Cdx2-shRNA）作为实验组；感染慢病毒空载体作为阴性对照组；空白对照组不做任何处理。Westernblot及RT—PCR检测Cdx2及凋亡相关基因C—myc、cyclinD1、survivin等蛋白及mRNA表达水平；MTT法检测3组细胞对化疗药物阿霉素、5．氟尿嘧啶、顺铂的敏感性；流式细胞技术检测3组细胞阿霉素的泵出率、细胞周期分布及细胞凋亡情况。计量资料用面±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用SNK—q检验，计数资料采用，检验。结果实验组、阴性对照组、空白对照组人胃癌耐顺铂细胞SGC7901／DDP中各蛋白相对表达量：Cdx2分别为0．187±0．060、0．535±0．033、0．567±0．014，C—myc分别为0．086±0．004、0．379±0．006、0．354±0．004，cyclin D1分别为0．016±±0．005、0．141±0．003、0．162±0．008，survivin分别为0．276±0．012、0．672±0．009、0．517±0．313，与阴性对照组和空白对照组比较，实验组上述蛋白表达量明显下降，差异有统计学意义（F=247．385，3．353，597．882，98．628，P〈0．05）。实验组、阴性对照组、空白对照组mRNA相对表达量：cdx2分别为0．184±0．010、0．894±0．056、0．837±0．049，c—myc分别为0．212±0．022、0．538±0．021、0．545±0．032，cyclinD1分别为0．045±0．009、0．163±0．009、0．157±0．010，survivin分另4为0．401±0．027、0．824±0．016、0．782±0．056，与阴性对照组和空白对照组比较，实验组上述基因mRNA表达量明显下降，差异有统计学意义（F=243．776，161．793，138．523，118．426，P〈0．05）。MTT法检测实验组、阴性对照组和空白对照组人胃癌
- 罗文杨杰廉超王晓通谢玉波肖强
- 关键词：多药耐药性
- Cdx2逆转录病毒感染对裸鼠人胃癌皮下瘤生长的影响被引量：1
- 2012年
- 目的观察Cdx2基因过表达的重组逆转录病毒载体(pLXSN-Cdx2)对裸鼠人胃癌皮下瘤生长的影响。方法构建重组逆转录病毒载体pLXSN-Cdx2,建立裸鼠人胃癌皮下瘤模型,将30只裸鼠随机分为pLXSN-Cdx2组、空载体逆转录病毒颗粒pLXSN组和对照组,每组10只。向3组动物肿瘤内分别注射pLXSN-Cdx2、pLXSN或生理盐水0.2 mL,共7次,测量各组肿瘤体积的大小;15 d后处死裸鼠,显微镜下观察移植瘤组织形态变化,应用RT-PCR检测肿瘤中Cdx2基因mRNA的表达,TUNEL检测细胞凋亡指数。结果 pLXSN-Cdx2构建成功;与对照组和pLXSN组比较,pLXSN-Cdx2组的肿瘤生长速度明显减慢(P<0.05);pLXSN-Cdx2组肿瘤体积为(14.15±2.17)mm3,明显低于pLXSN组和对照组的肿瘤体积(P<0.05);pLXSN-Cdx2组Cdx2 mR NA的表达量为(2.71±0.65),高于pLXSN组和对照组(P<0.05)。pLXSN-Cdx2组的凋亡指数(14.4±5.3)%显著高于pLXSN组(7.6±2.2)%和生理盐水组(7.7±2.3)%(P<0.05)。结论重组逆转录病毒载体pLXSN-Cdx2瘤内注射可抑制裸鼠人胃癌皮下瘤的生长。
- 孔凡彪王晓通谢玉波肖强
- 关键词：CDX2胃癌
- 转录因子CDX2过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖和细胞周期的影响被引量：6
- 2014年
- 目的:探索CDX2过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖、生长和细胞周期的影响及其分子机制。方法:采用携带CDX2基因的重组慢病毒颗粒(LV-CDX2-GFP)感染SGC-7901细胞,作为实验组(LV-CDX2-GFP组);以对照慢病毒颗粒(LV-GFP)感染SGC-7901细胞,作为阴性对照组(LV-GFP组);空白对照组常规培养,不做任何处理。分别采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,流式细胞术检测各组细胞周期的分布,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting技术检测细胞中CDX2、Bax、Bcl-2、cyclin D1和survivin mRNA和蛋白的表达。结果:与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-CDX2-GFP组细胞增殖活力明显降低(P<0.05),G0/G1期所占比例上升(P<0.05),Bcl-2、cyclin D1和survivin mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05),而LV-GFP组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢病毒介导的CDX2过表达抑制胃癌细胞增殖和生长,使细胞周期停滞在G0/G1期,其机制可能与CDX2过表达使胃癌细胞Bcl-2、cyclin D1、survivin表达下调和Bax表达上调有关。
- 曹稳珑韦尉元张笑石罗文严林海谢玉波肖强
- 关键词：SGC-7901细胞
