国家自然科学基金(30471532)
- 作品数：7 被引量：7H指数：1
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- 相关机构：西安交通大学医学院第一附属医院第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科学技术研究发展计划项目更多>>
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- HCV核心蛋白与HCBP1在哺乳双杂交系统中的相互作用
- 2008年
- 目的:探讨HCV-core与HCBP1的相互作用.方法:PCR分别扩增含HCV core及HCBP1的cDNA片段,克隆入pGEM T载体,经测序正确后再分别克隆入哺乳双杂交的表达质粒pM和pVP16中,并转染入COS-7细胞,48 h后检测细胞中报告基因CAT的表达水平.结果:CAT-ELISA检测显示pM-core与pVP16-HCBP1实验孔A405 nm值为0.1288,高于其它阴性对照,但低于阳性对照组A值.结论:哺乳双杂交系统证实HCV核心蛋白与新基因HCBP1有一定的相互作用,可进一步研究HCBP1的细胞功能.
- 陈云茹刘敏陈天艳张树林陈瑞琳张曦石磊
- 关键词：HCV核心蛋白报告基因
- 丙型肝炎病毒核心蛋白致肝炎慢性化机制
- 2006年
- 了解丙型肝炎病毒核心蛋白在肝炎慢性化中的机制,对丙型肝炎慢性化的病理机制及治疗具有极大的作用。近年来国内外的学者进行了大量的理论研究和相关实验,提出了核心蛋白在肝炎慢性化中可能的机制：核心蛋白对信号通路蛋白的影响；对细胞凋亡机制的影响；对机体免疫功能的影响等。
- 刘锦锋刘敏赵英仁
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白慢性化
- 丙型肝炎病毒核心蛋白引发肝脂肪变性及其分子学机制被引量：3
- 2006年
- 了解HCV核心蛋白在诱发肝脂肪变性中的分子学机制,对丙型肝炎相关性脂肪肝的病因学,预防和治疗等方面具有极大的促进作用。国内外学者通过大量的研究发现,核心蛋白可诱发肝脂肪变性,其机制可能涉及脂质积聚、与脂质代谢相关酶分子或载脂蛋白的结合、对脂转移蛋白酶活性的调节等方面。
- 陈云茹刘敏陈天艳张树林
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白脂肪变性
- 丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的用含丙型肝炎病毒核心(HCV core)蛋白的cDNA片段构建酵母双杂交诱饵载体,并进行人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定。方法PCR扩增含HCV core蛋白不同大小的cDNA片段,分别克隆入pUC19质粒,经测序正确后,再亚克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中。扩增人胎肝cDNA文库并纯化、鉴定。结果获得含HCVcore蛋白的cDNA片段,并成功克隆入pGBKT7中。待转化的人肝cDNA文库滴度在5×108左右,纯化后的质粒DNA质量浓度约1 g/L。用EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切显示插入片段大小不一。结论成功构建了核心蛋白的酵母双杂交诱饵载体;扩增、纯化的人胎肝cDNA文库的多样性很好,适合于筛选。为用酵母双杂交技术研究与HCV core蛋白相互作用的蛋白打下坚实基础。
- 刘敏张伟陈天艳蔺淑梅赵良刘锦锋赵英仁张树林
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交CDNA文库
- HCV核心蛋白在酵母双杂交系统中的表达及自激活作用检测被引量：1
- 2006年
- 目的检测用含丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的cDNA片段构建的酵母双杂交诱饵载体的表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用.方法PCR扩增含HCV核心蛋白不同大小的cDNA片段,分别克隆入pUC19质粒,经测序正确后,再分别亚克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中.将重组质粒导入酵母菌AH109,检测其表达产物在酵母细胞中对报告基因有无激活作用.结果成功获得含HCV核心蛋白的cDNA片段,HCV核心蛋白对酵母菌AH109无毒性,且对报告基因无激活作用.结论利用酵母双杂交Gal4系统3研究与HCV核心蛋白相互作用的蛋白,证实了HCV核心蛋白无自激活功能.
- 刘敏张伟陈天艳蔺淑梅刘锦锋叶峰赵英仁张树林
- 关键词：HCV核心蛋白酵母双杂交报告基因
- HCBP1的细胞定位及与HCV核心蛋白在体内的相互作用被引量：1
- 2007年
- 目的探讨HCV核心蛋白与(HCBP1)HCV核心蛋白的相互作用蛋白在真核细胞内的相互作用。构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与HCBP1融合蛋白真核表达载体,分析其在COS-7细胞中的表达和亚细胞定位。方法PCR分别扩增含HCV核心及HCBP1的cDNA片段,克隆入pGEMT载体,经测序正确后,分别克隆入哺乳双杂交的表达质粒pM和pVP16中,并转染入COS-7细胞,48h后检测细胞中报告基因CAT的表达水平。将HCBP1的cDNA片段克隆入绿色荧光表达载体pEGFP-C1中,构建HCBP1-EGFP融合蛋白的表达载体,转染COS-7细胞,以Western blot和荧光显微镜分析融合蛋白的表达及其细胞定位。结果CAT-ELISA检测显示pM-核心蛋白与pVP16-HCBP1实验孔吸光度值高于其他阴性对照,但低于阳性对照组。成功构建HCBP1-EGFP融合蛋白的表达载体,Western blot证实融合蛋白在转染细胞中的表达,荧光显微镜示HCBP1-EGFP融合蛋白分布于细胞浆,而转染空载体的细胞内EGFP的分布无明显改变。结论成功构建HCBP1-EGFP融合蛋白表达载体,并在COS-7细胞中得到表达。哺乳双杂交系统证实HCV核心蛋白与新基因HCBP1确有一定的相互作用。
- 陈天艳刘敏陈云茹蔺淑梅叶峰张曦刘锦锋赵英仁张树林
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白绿色荧光蛋白融合蛋白
- 核心蛋白在肝癌中的作用被引量：1
- 2005年
- 了解核心蛋白在丙型肝炎病毒(HCV)致癌中的机制,对于肝癌的病因学以及治疗具有极大的促进作用。在这一方面,国内外的学者进行了大量的理论研究和相关的实验,提出了核心蛋白可能的致癌机制:核心蛋白的核转位表达及突变;影响细胞的周期、增殖以及凋亡;激活原癌基因,影响抑癌基因的表达;影响端粒酶、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)以及细胞的信号转导等。
- 刘锦锋赵英仁刘敏
- 关键词：核心蛋白肝癌致癌机制原癌基因抑癌基因
