湖北省卫生厅青年科技人才基金(QJX2008-3)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：廖家智付妤晏维田德安陈孝平更多>>
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- 发文基金：国家自然科学基金湖北省卫生厅青年科技人才基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Netrin-1在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞侵袭能力的影响被引量：4
- 2009年
- 目的观察神经轴突导向因子Netrin-1在人肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其对肝癌细胞侵袭能力的影响。方法应用免疫组织化学SP方法检测45例肝癌手术标本癌旁及癌组织中Netrin-1的表达水平，用卡方检验分析其与临床病理参数的关系。在肝癌细胞SMMC-7721中转染Netrin-1基因，观测过表达Netrin-1肝癌细胞侵袭能力的改变。结果Netrin-1在肝癌中的阳性表达率约为66．7％，主要在肝癌细胞胞质中表达，Netrin-1的阳性表达与性别、年龄、肿瘤大小以及细胞分化程度无关（P〉0．05），而与门静脉癌栓以及淋巴转移有关（P〈0．05）。细胞侵袭实验结果显示，与实验对照组比较过表达Netrin-1显著促进肝癌细胞SMMC-7721侵袭能力（P〈0．05）。结论HCC组织中高表达的Netrin-1与肿瘤侵袭转移有关，Netrin-1促进肝癌细胞侵袭能力可能是肝癌转移机制之一。
- 黄焕军晏维付妤廖家智田德安陈孝平
- 关键词：肝细胞NETRIN-1
- 缺氧环境中黏着斑激酶对SMMC-7721细胞侵袭能力的影响被引量：4
- 2009年
- 目的研究缺氧对人肝癌细胞SMMC-7721黏着斑激酶（FAK）表达的影响以及FAK表达对SMMC-7721细胞侵袭能力的影响。方法通过1％体积分数O2的低氧培养建立人肝癌细胞SMMC-7721物理缺氧模型，Western blot检测FAK的表达。构建针对FAK mRNA的干扰质粒pshRNA-FAK及阴性对照质粒pGensil-2，并将其转染至SMMC-7721细胞，G418筛选稳定转染细胞株。Western blot检测FAK蛋白表达的变化，细胞迁移和侵袭实验检测缺氧条件下细胞迁移和侵袭能力的改变。在正常条件下将FAK真核表达质粒pcDNA3-FAK转染至SMMC-7721细胞，观测其侵袭能力的改变。根据数所资料的不同分别采用f检验、单因素方差分析、LSD法及Dunnett法进行统计学处理。结果低氧培养的SMMC-7721细胞FAK蛋白表达水平逐渐升高，24h后较0h时明显升高（JP〈0．01）。SMMC-7721细胞稳定转染pshRNA-FAK后，FAK蛋白表达显著下降，抑制率达74．6％±5.1％，在正常及缺氧条件下都对FAK表达有显著抑制作用。细胞迁移实验结果显示，缺氧显著促进SMMC-7721细胞迁移能力（t=18．66，P〈0．01），侵袭实验结果与迁移实验结果一致。转染pshRNA-FAK对促进SMMC-7721细胞在缺氧环境中的迁移能力有显著抑制作用，透膜细胞数（353±36）个较对照组（392±31）个明显降低（F=173．983，P〈0．05）；细胞侵袭实验显示，转染pshRNA-FAK对促进SMMC-7721细胞侵袭能力有显著抑制作用，透膜细胞数（160±12）个较对照组（194±13）个明显降低（F=59．674，P〈0．05）。同时转染真核表达质粒pcDNA3-FAK显著促进SMMC-7721细胞侵袭能力。结论缺氧促进SMMC-7721细胞侵袭可能与FAK表达水平升高相关，FAK表达的上调可能是缺氧促进肝癌细胞侵袭转移的机制之一。
- 晏维田德安付妤廖家智夏丽敏罗敏朱倩
- 关键词：肝细胞黏着斑激酶RNA干扰缺氧
- 胆道探查致十二指肠对穿伤、腹膜后结石遗留一例被引量：2
- 2010年
- 目的 研究缺氧对人肝癌细胞HepG2细胞骨架重组的影响及Netrin-1在细胞骨架重组中的作用.方法 通过1%O_2 低氧培养建立人肝癌细胞HepG2物理缺氧模型,观测缺氧对细胞形态的改变.构建针对Netrin-1 mRNA的干扰质粒pshRNA-Netrin-1及阴性对照质粒pGensil-1,并将其转染HepG2细胞,筛选稳定转染细胞株.观测转染pshRNA-Netrin-1质粒前后,鬼笔环肽检测缺氧对肝癌细胞对HepG2细胞骨架重组的影响,细胞迁移实验检测缺氧条件下干扰Netrin-1对细胞迁移能力的影响.同时构建Netrin-1真核表达质粒pGNET1转染HepG2细胞,观测Netrin-1对肝癌细胞骨架重组的作用.结果 低氧培养HepG2细胞胞体变得狭长,细胞连接松散.Netrin-1蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）.HepG2细胞稳定转染pshRNA-Netrin-1后,Netrin-1 mRNA表达显著下降.抑制率达73.32%±4.12%（P＜0.01）.鬼笔环肽检测F-actin结果 显示,缺氧促进HepG2细胞骨架重组,转染pshRNA-Netrin-1后,缺氧促进HepG2细胞骨架重组受到显著抑制.细胞迁移实验结果 显示,缺氧条件下干扰Netrin-1的表达显著抑制HepG细胞迁移能力（P＜0.05）.转染 pGNET1后,HepG2细胞骨架发生重组.结论 缺氧促进HepG2细胞骨架重组与Netrin-1表达水平升高相关,Netrin-1表达的上调可能是缺氧促进肝癌细胞骨架重组进而促进侵袭转移的机制之一.
- 晏维付妤廖家智田德安周珍珍王伟张全乐陈孝平
- 关键词：NETRIN-1
