上海市白玉兰科技人才基金(1009B097)
- 作品数：8 被引量：18H指数：3
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- G蛋白耦连受体激酶在帕金森病发病机制中的研究进展
- 2011年
- G蛋白耦连受体激酶(GRKs)是一类介导受体脱敏的重要可溶性蛋白质,是G蛋白耦连受体(GPCR s)信号转导通路负反馈机制中必不可少的因素。神经系统疾病中神经激素水平的升高,以及神经激素持续刺激引起的不利后果,表明了神经激素受体反应性脱敏是一种非常重要的保护机制。近年来研究显示,GRKs在帕金森病及其运动并发症的发展过程中起着重要作用,其中GRK6主要定位于中型棘状神经元上,GRK6敲除与多巴胺受体的超敏有关,是纹状体最关键的GRKs。文章就近年来GRKs在帕金森病发病机制中的研究进展进行综述。
- 吴娜刘振国
- 关键词：帕金森病
- 帕金森病运动并发症与ERK磷酸化关系的实验研究
- 2011年
- 目的观察帕金森病运动并发症模型大鼠纹状体细胞外信号调节激酶(ERK)Thr202/Tyr204位点(ERK1/2)磷酸化水平及表达位点的改变。方法通过脑立体定向仪于大鼠内侧前脑束注射6-羟多巴胺建立帕金森病动物模型,连续腹腔注射左旋多巴(50mg/kg)和苄丝肼(12.50mg/kg)共21 d(2次/d)以诱发运动并发症。通过Western blotting法检测不同处理组大鼠纹状体磷酸化ERK1/2表达水平,免疫荧光双标法观察磷酸化ERK1/2与强啡肽共表达变化,以了解直接通路投射神经元ERK磷酸化修饰情况。结果 Wester·n blotting检测显示,帕金森病组大鼠损伤侧纹状体磷酸化ERK1/2表达水平为(68.28±7.42)%,低于假手术组的(107.05±3.81)%,组间差异具有统计学意义(t=0.109,P=0.018);左旋多巴连续治疗21 d后,表达水平升至(160.37±10.54)%(t=0.109,P=0.000)。免疫荧光双标法检测,帕金森病组大鼠损伤侧纹状体区仅有(35.32±5.03)%的磷酸化ERK1/2与强啡肽共表达;经左旋多巴治疗后,共表达水平显著升至(83.62±1.46)%,高于帕金森病组(t=11.263,P=0.003)。结论长期应用左旋多巴可使帕金森病模型大鼠纹状体磷酸化ERK1/2表达水平明显上调,且ERK磷酸化多发生于直接通路投射神经元,提示黑质-纹状体投射神经元ERK通路的活化可能参与了运动并发症的发生。
- 宋璐马雅萍刘振国巴茂文卞雷斯
- 关键词：帕金森病药物性蛋白激酶类荧光抗体技术
- 脑深部电刺激治疗异动症模型大鼠的行为学研究
- 2011年
- 目的观察高频电刺激对帕金森病异动症大鼠模型的行为学影响。方法成功制备帕金森病、异动症和丘脑底核高频电刺激大鼠模型,随机分为"刺激组"、"假刺激组"和"假手术组",观察高频电刺激对旋转行为和不自主行为(AIM)评分的影响。结果高频电刺激可抑制模型大鼠的旋转行为;在左旋多巴甲酯和苄丝肼药效期内高频电刺激治疗后的"刺激组"模型大鼠AIM评分明显减低、旋转速度明显减慢。结论高频电刺激可改善左旋多巴诱导的异动症(LID)的症状;其作用并非刺激电极植入本身对丘脑底核(STN)损伤所致;STN-DBS治疗后LID症状可在一定时间内持续改善。
- 浦政陆丽霞刘振国
- 关键词：异动症脑深部电刺激丘脑底核
- 帕金森病运动并发症发生机制中G蛋白偶联受体激酶6与N-甲基-D-天冬氨酸受体关系的研究被引量：3
- 2011年
- 目的 研究G蛋白偶联受体激酶6（GRK6）在帕金森病（PD）运动并发症发生机制中与N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体的关系.方法 建立PD运动并发症大鼠模型,25只大鼠分为3组.异动症（LID）组10只,腹腔注射左旋多巴甲酯23 d;MK-801处理组10只,第23天左旋多巴甲酯注射前腹腔注射MK-801;PD组5只,腹腔注射0.2%维生素C液.另设假手术组5只为对照组.观察MK-801处理左旋多巴诱导的运动并发症模型大鼠的行为变化,并用免疫组织化学方法和Western印迹方法检测大鼠纹状体区GRK6蛋白的表达情况.结果 PD组大鼠长期使用左旋多巴后出现明显的异常不自主运动,与人类LID具有相似特征.免疫组化结果显示.PD组损伤侧纹状体区GRK6阳性细胞指数减少至（4.81±1.31）×103（P＜0.05）,LID组损伤侧GRK6阳性细胞指数进一步减少至（3.23±0.41）×103（P＜0.01）.MK-801组LID大鼠异常不自主运动评分减少,药效期延长,同时损伤侧纹状体区GRK6阳性细胞指数增多至（4.64±1.39）×103（P＜0.05）.Western印迹法检测结果同免疫组化基本相符,PD组损毁侧/未损毁侧纹状体区GRK6含量比值为（83.7±2.1）%,LID组GRK6值降低为（76.8±2.2）%,而MK-801组GRK6值升高至（91.1±2.7）%（P＜0.01）.结论 NMDA受体拮抗剂能逆转大鼠运动并发症的发生,其机制可能与GRK6增多,抑制了谷氨酸受体的过度活化有关.
- 吴娜杨新新宋璐刘振国
- 关键词：帕金森病蛋白激酶类
- CB1受体激动剂WIN55212-2改善帕金森病运动并发症的实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨CB1受体激动剂WIN55212-2对左旋多巴诱发的运动并发症的行为学及细胞学作用。方法通过6-OHDA立体定向注射至大鼠右侧前脑内侧束建立PD动物模型,成功的PD大鼠模型分别接受左旋多巴/苄丝肼(50mg/kg加12.5mg/kg苄丝肼,每天2次)+溶剂、左旋多巴/苄丝肼+WIN55212-2(1mg/kg)腹腔注射,共持续21d。评估用药后大鼠的旋转反应时间、剂峰旋转圈数变化和关期发生率;采用Western blot方法检测纹状体信号转导蛋白DARPP-32(Thr75)和ERK1/2(Thr202/Tyr204)的磷酸化表达。结果长期联合应用WIN55212-2和左旋多巴,缓解了左旋多巴单独用药所致的PD大鼠旋转反应时间缩短、剂峰旋转圈数增加的趋势,并明显降低关期发生频率。WIN55212-2与左旋多巴合用显著降低了纹状体内DARPP-32(Thr75)的磷酸化;但未使ERK1/2磷酸化表达降低至对照组水平。结论激动CB1受体可能有益于预防帕金森病运动并发症。
- 马雅萍宋璐刘振国巴茂文卞雷斯
- 关键词：帕金森病运动并发症ERK
- 不同剂量左旋多巴对帕金森病运动并发症大鼠模型行为学的影响被引量：4
- 2011年
- 目的:比较不同剂量左旋多巴长期注射对帕金森病(PD)运动并发症大鼠模型异常不自主运动(AIM)和疗效减退的影响,以确定合适的左旋多巴用药剂量和行为学评价标准。方法:立体定向SD大鼠右侧前脑内侧束,注射6羟基多巴建立PD大鼠模型。成模PD大鼠随机分为3组,分别腹腔注射左旋多巴酯:小剂量组(20mg·kg^(-1)·d^(-1))、中剂量组(50mg·kg^(-1)·d^(-1))和大剂量组(100mg·kg^(-1)·d^(-1)),每天2次,持续21d。比较3组PD大鼠模型AIM各组份的评分情况及对侧旋转反应时间。结果:左旋多巴3种剂量均可诱发PD大鼠出现相似程度的口面、前肢、轴向AIM,但大剂量组大鼠旋转AIM的评分高于小剂量组(P<0.05),且旋转反应时间缩短幅度大于中剂量组和小剂量组(P<0.05)。结论:小剂量左旋多巴就可诱发PD大鼠出现明显的AIM,又能避免过于剧烈的旋转运动对AIM评分的干扰;但观察疗效减退现象需要选用大剂量左旋多巴以诱导出稳定下降的旋转反应时间。
- 宋璐马雅萍巴茂文刘振国
- 关键词：帕金森病左旋多巴诱发异动症
- β-arrestinl参与MK-801治疗帕金森病异动症的研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨MK-801缓解帕金森病（PD）异动症的治疗机制。方法建立PD运动并发症大鼠模型，25只大鼠随机分为3组：异动症（LID）组10只、MK-801处理组10只、PD组5只，另设假手术组5只为对照组。观察MK-801治疗左旋多巴诱导的异动症大鼠模型的行为学变化，并采用免疫组织化学方法和Western blot印迹法检测大鼠纹状体区β-arrestinl的表达情况。结果MK-801处理后，LID大鼠模型异常不自主运动评分降低和剂峰旋转行为减弱。免疫组织化学结果显示LID组损伤侧β-arrestinl阳性细胞指数[（2．95±0．44）×10^4]明显较未损伤侧[（3．78±0．37）×10^4]降低，差异有统计学意义（t=5．415，P〈0．05）。Western blot结果显示，PD模型组损毁侧与未损毁侧纹状体区β-arrestinl含量比值为81．02％±2．23％；LID组（64．88％±3．10％）蛋白表达量进一步减少，与PD组比较，差异有统计学意义（t=9．47，P〈0．01）；而MK-801组蛋白表达量增高至89．26％±1．90％。与LID组相比，差异有统计学意义（t=14．82，P〈0．01）。结论MK-801能缓解LID大鼠的行为学变化，其机制可能与β-arrestinl表达增多抑制了谷氨酸受体的过度活化有关。
- 吴娜宋璐杨新新刘振国
- 关键词：帕金森病抑制蛋白类地卓西平马来酸盐
- 左旋多巴诱导帕金森病异动症与纹状体DARPP-32磷酸化的关系被引量：9
- 2011年
- 目的观察帕金森病(PD)异动症(LID)大鼠模型纹状体区多巴胺和环磷腺苷调节的磷酸化蛋白-32(DARPP-32)蛋白Thr75位点磷酸化表达数量及表达位点的改变。方法给予PD大鼠模型左旋多巴治疗21d,评估大鼠行为学变化;采用免疫荧光和Western blot检测大鼠纹状体区DARPP-32蛋白Thr75位点磷酸化表达数量和表达部位的改变情况。结果 PD大鼠长期使用左旋多巴出现类似于人类LID行为学表现。免疫荧光结果显示PD组和LID组大鼠损伤侧DARPP-32(Thr75)的表达多位于强啡肽阳性神经元。Western blot结果显示PD组大鼠损伤侧DARPP-32(Thr75)表达为(159.90±7.22)%,与假手术组比较升高(P<0.05);LID组大鼠损伤侧纹状体DARPP-32(Thr75)的表达为(52.60±4.45)%,与假手术组和PD组比较降低(P<0.05)。结论纹状体黑质投射神经元内DARPP-32蛋白Thr75位点磷酸化表达的改变可能参与了LID的发病。
- 宋璐马雅萍刘振国巴茂文卞雷斯
- 关键词：帕金森病左旋多巴DARPP-32强啡肽磷酸化
