国家自然科学基金(81000732H1904)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：潘万龙徐蕾许舸胡接力陶颖更多>>
- 相关机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 瓣状内切核酸酶1基因重组真核表达质粒的构建及鉴定
- 2013年
- 目的构建瓣状内切核酸酶1(Flap endonuclease 1,FEN1)基因重组真核表达质粒,并进行鉴定。方法提取L02细胞总RNA,逆转录合成cDNA,经巢式PCR扩增FEN1基因,定向克隆至载体pcDNA3.1,构建重组真核表达质粒,经酶切及测序进行鉴定。将鉴定正确的真核表达质粒转染293T细胞,Western blot检测FEN1蛋白的表达。结果 FEN1基因重组真核表达质粒经酶切及测序鉴定证明构建正确;在相对分子质量约47 000处可见目的蛋白条带,转染细胞中FEN1蛋白表达量较空载体转染组及空白细胞对照组提高约3倍。结论已成功构建了FEN1基因重组真核表达质粒,并可在293T细胞中过表达FEN1。
- 潘万龙方岩许舸单雪峰徐蕾陶颖黄媛胡接力
- 关键词：真核细胞基因表达
