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RNA干扰联合基因沉默ACE和AT1R对自发性高血压大鼠血压及心肌重构的影响被引量：5: 2010年; 目的用RNA干扰技术下调血管紧张素转换酶（ACE）和血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）表达，观察其对自发性高血压大鼠（SHR）血压及心肌重构的影响。方法SHR随机分为5组：即空白对照组（注射生理盐水）；病毒对照组（注射对照腺病毒）；Ad5-ACE-shRNA治疗组；Ad5—AT1R-shRNA治疗组；Ad5—ACE—AT1R—shRNA治疗组[分别注射表达ACE基因，AT1R基因，ACE和AT1R基因特异短发夹RNA（shRNA）的重组腺病毒载体]；同时设WKY正常血压对照组（注射生理盐水）。以上各组大鼠均于实验的第1，17天各注射1次，干预前后检测血压、心率的变化。于首次注射后第3天，用实时荧光定量PCR检测心肌、主动脉组织ACE，AT1R mRNA的表达。实验结束时，检测左心重／体重及心肌胶原蛋白的含量，并做电镜切片观察心肌超微结构的变化。结果Ad5-ACE-shRNA治疗组，Ad5—AT1R-shRNA治疗组，Ad5—ACE-AT1R-shRNA治疗组于每次注射后，尾动脉压分别下降24mmHg（1mmHg=0．133kPa）、22mmHg、26mmHg左右，单次注射后降压作用至少可持续15d，累计降压幅度分别达39mmHg、37mmHg、43mmHg；而SHR空白对照和病毒对照组血压则持续升高约26mmHg，且两组比较差异无统计学意义；WKY组尾动脉压无明显变化，治疗组（Ad5-ACE—shRNA，Ad5-ACE-AT1R—shRNA）心肌、主动脉组织中ACE mRNA和治疗组（Ad5-AT1R—shRNA，Ad5—ACE-AT1R—shRNA组）心肌、主动脉组织中AT1R mRNA表达明显低于空白对照和病毒对照组（P〈0．05），而与WKY组比较差异无统计学意义。Ad5-ACE—shRNA治疗组，Ad5-T1R-shRNA治疗组，Ad5-ACE-AT1R—shRNA治疗组左心重／体重与心肌胶原蛋白含量[（2．22±0．18）μg／mg、（2．23±0．19）μg／mg、（2．17±0．16）μg／mg与（1．291±0．019）μg／mg、（1．298±0．019）μg／mg、（1．276±0．019）μg／mg]明显低于空白对照组[（3．23±0．13）μg／mg与（1．683±0．013�; 周华边云飞李茂莲高奋肖传实; 关键词：高血压 RNA干扰

编码大鼠血管紧张素转换酶短发夹环RNA质粒的构建与鉴定: 2008年; 目的构建编码大鼠ACE mRNA的shRNA真核表达载体质粒,为利用基因沉默技术从转录后水平进行高血压治疗的研究做准备。方法根据大鼠ACE mRNA序列设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并克隆进入载体pGenesil-1,并进行酶切鉴定和测序。结果酶切证明构建的shRNA已插入载体,经测序证明与设计的相同,获得大鼠ACE的shRNA表达载体质粒。结论构建的编码大鼠ACE mRNA的shRNA真核表达载体可进入哺乳动物细胞内表达短发夹RNA,经Dicer酶裂解成si R-NA并降解靶基因mRNA,而达到基因干扰的作用。为利用其进行自发性高血压大鼠的降压治疗研究奠定了基础。; 周华高奋李茂莲边云飞何军华肖传实; 关键词：基因干扰高血压血管紧张素转换酶短发夹RNA

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年山西省研究生优秀创新项目(20081050)

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