艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项(2011ZX10004-001)
- 作品数：32 被引量：216H指数：8
- 相关作者：童贻刚马学军李德新梁米芳李川更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心军事医学科学院中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 多耐药鲍曼不动杆菌噬菌体IME-AB6的分离、生物特性及保存方法研究被引量：7
- 2013年
- 目的:分离并鉴定一株多耐药鲍曼不动杆菌噬菌体,对其生物特性进行研究,为治疗多耐药鲍曼不动杆菌感染提供新的方法和实验依据。方法:以一株多耐药不动杆菌AB6为宿主菌,从医院废水中分离出噬菌体;用聚乙二醇6000对噬菌体进行浓缩和纯化,并就噬菌体的形态、一步生长曲线、裂解特性和不同保存条件对噬菌体活性的影响进行初步研究。结果:分离出一株噬菌体IME-AB6,电镜显示为肌尾噬菌体,其潜伏期为10 min,爆发期为40 min,爆发量160 pfu/cell;IME-AB6能迅速使菌液变清晰,温度灵敏性强,并且发现在4℃保存是一种方便高效的方法。结论:噬菌体IME-AB6是一株新的有独特特点的噬菌体,用聚乙二醇能很好地提高滴度,其潜伏期和爆发期短且杀菌效能强,性能稳定易保存,这对于噬菌体制剂的开发和耐药性鲍曼不动杆菌的防治具有潜在应用价值。
- 彭帆童贻刚柏长青
- 关键词：鲍曼不动杆菌噬菌体生物特性
- 60株克罗诺杆菌的药敏分析被引量：7
- 2012年
- 目的研究国内分离于11个省(直辖市)婴幼儿配方奶粉或米粉等食品标本中的60株克罗诺杆菌的药物敏感性和耐药性。方法采用Kirby-Bauer纸片扩散法测定菌株对7类14种抗生素的药敏情况。结果菌株对头孢吡肟、亚胺培南、美罗陪南平、环丙沙星、复方新诺明5种抗生素的敏感率较高,达到93.5%。但有4株菌对14种抗生素全部耐药,4株菌对头孢呋辛耐药,1株菌对阿莫西林/克拉维酸耐药。结论 60株克罗诺杆菌中,56株菌对目前医院内治疗肠杆菌科感染的多数抗生素药物敏感;4株菌具有强耐药性,其耐药机制需要今后进一步研究证实。
- 崔晶花杨小蓉杜小莉王鸣柳崔志刚李伟
- 关键词：抗生素敏感性耐药性
- EV71通过2A蛋白酶切割Nup62而抑制核转运被引量：6
- 2013年
- 为了解EV71病毒对细胞核转运机制的影响,本研究构建了具有核定位信号的绿色荧光蛋白表达载体(pG-FP-NLS)。将此表达载体转染细胞后,使用EV71病毒感染转染细胞,结果发现EV71病毒可以有效阻止绿色荧光蛋白的核转移。将EV71病毒的2A蛋白酶真核表达载体与pGFP-NLS共转染RD细胞,可以发现2A蛋白酶可阻止具有核定位信号的绿色荧光蛋白的核转移而使绿色荧光蛋白表达于细胞浆。为了进一步研究病毒阻止核转移的机制,病毒感染细胞或通过转染2A蛋白酶真核表达载体进行Nup62的Western blotting检测,结果显示病毒以及2A蛋白酶均可引起Nup62表达下降。证明EV71可通过2A蛋白酶切割Nup62从而抑制核转运。
- 张亚洲甘星宋娟孙鹏宋芹芹李公启盛琳君王宝栋卢明枝李灵敏韩俊
- 关键词：肠道病毒71型核转运
- 基于多重置换扩增技术的RNA病毒基因组扩增方法研究被引量：1
- 2013年
- 为了便于新发或罕见病毒性传染病的筛查检测,本研究利用多重置换扩增技术,以负链RNA病毒—发热伴血小板减少综合征病毒和正链RNA病毒—登革病毒为模拟样本探索临床样本中RNA病毒基因组非特异性扩增方法。研究中通过梯度稀释的RNA病毒模拟样本中可能存在的不同丰度的病原体,样本核酸依次加工成单链cDNA、双链cDNA、T4DNA连接酶处理后的双链cDNA以及添加外源辅助RNA后合成并连接的双链cDNA形式,然后进行Phi29DNA聚合酶等温扩增,使用荧光定量PCR方法比较各种方法对RNA病毒核酸扩增的影响。结果显示,对于不同类型的RNA病毒模拟标本,多重置换扩增对于单链及双链cDNA的扩增效果有限,而双链cDNA经DNA连接酶处理后的扩增能达到6×103倍;在cDNA合成过程中加入外源辅助RNA,模拟样本中病毒基因组的扩增可达2×105倍,尤其是对含有低丰度病原体的模拟样本扩增效果的改善更为明显。本研究摸索建立了基于多重置换扩增技术的RNA病毒基因组扩增方法,能够对样本中低丰度RNA病毒基因组实现有效扩增,可满足开展多种病原体筛查检测的需求。
- 庞正李建东李川梁米芳李德新
- 关键词：多重置换扩增RNA病毒
- 致泻性大肠杆菌毒力基因及检测方法研究进展被引量：15
- 2013年
- 致泻性大肠杆菌(E.coli)是引起机体肠道感染和肠道外感染的主要病原菌之一,近年来暴发的多起E.coli疫情也不断引起人们对E.coli检测的重视,而编码致泻性E.coli的毒力因子如外毒素、黏附素、外膜蛋白的基因在其检测中扮演重要角色。本文就近年来这方面的研究作一简要概述。
- 王凯刘琪琦
- 关键词：致泻性大肠杆菌毒力基因
- 2011年云南楚雄地区狂犬病疫情分子流行病学研究
- 2012年
- 目的针对2011年发生于云南楚雄地区的狂犬病疫情开展分子流行病学调查分析。方法通过直接免疫荧光试验（DFA）和RT—PCR方法对采集样本进行检测。采用DNAstar中MegAlign软件和MEGA3．1软件Neighbour—joining（NJ）方法分别进行病毒样本N基因的同源性分析和系统进化分析。结果在23份脑组织或脑脊液标本中，11份实验室检测结果为阳性，阳性率为47．8％。核蛋白（N）基因同源性结果表明，来自犬只的病毒样本与基因Ⅰ型Asia1a亚型病毒同源性最高，核苷酸同源性为99．2％～99．4％之间，与Asia2c基因亚型病毒核苷酸同源性为88．5％-89．6％。进化树分析结果表明，本研究分离到的病毒样本与Yunnan—ZT07处于同一进化分支内。结论引发本次疫情的狂犬病毒属于基因Ⅰ型Asia1a亚群，且此次疫情可能与2007年云南昭通流行毒株Yunnan—ZT07的输入关系密切。
- 王静林尉研亚红祥袁庆虹周济华付娟娟黄文丽朱武洋
- 关键词：狂犬病病毒流行病学种系发生
- 嗜肺军团菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立被引量：4
- 2013年
- 目的:建立针对嗜肺军团菌Mip基因的实时荧光定量TaqMan PCR检测方法,并进行自来水和空调冷却水模拟标本的检测评价。方法:根据嗜肺军团菌Mip基因的特异性序列设计引物和TaqMan探针,建立嗜肺军团菌的实时荧光定量TaqMan PCR快速检测方法,对方法进行灵敏度及特异性评价,并对自来水和空调冷却水模拟标本中的嗜肺军团菌进行检测。结果:建立的方法对嗜肺军团菌的检测具有高度特异性,与3种非嗜肺军团菌和6种其他呼吸道病原均没有交叉反应;基因组DNA的检测灵敏度为1.6 pg/μL,模拟自来水和空调冷却水标本的检测灵敏度为10CFU/mL。结论:建立的TaqMan荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速,适于嗜肺军团菌的日常监测和暴发疫情的应急诊断。
- 杜昕颖苏晓王玉飞龚春丽庄妤冰苑锡铜陈泽良袁静宋宏彬黄留玉
- 关键词：嗜肺军团菌荧光定量PCRTAQMAN探针MIP基因
- 非O157产志贺毒素大肠杆菌分离培养方法研究进展被引量：7
- 2013年
- 产志贺毒素大肠杆菌（Shigatoxin—producingescherichia coli，STEC）是一类危害人类健康的重要致病菌，可引起出血性肠炎（hemorrhagiccolitis，HC）、溶血性尿毒综合征（hemolyticuremicsyndrome，HUS）等严重疾病。1983年Riley等报道了第一起由O157：H7STEC引起的食物中毒，之后不同国家相继报道了O157：H7STEC所致的暴发和散发感染。2001年，国际上即已提出了食品和动物饲料中0157STEC菌株分离的标准方法（ISO16654：2001），
- 白向宁孟琼赵爱兰熊衍文
- 关键词：产志贺毒素大肠杆菌O157分离培养方法溶血性尿毒综合征出血性肠炎食物中毒
- 2011年甘肃地区急性呼吸道感染儿童患者中鼻病毒感染规律的研究被引量：11
- 2013年
- 探讨人鼻病毒(Human rhinovirus,HRV)在甘肃地区急性呼吸道感染儿童患者中的流行特征。2011年1月至12月,从甘肃地区急性呼吸道感染儿童患者中采集咽拭子标本286份,用多重PCR方法对常见呼吸道病毒性病原体进行筛查。多重PCR结果中HRV阳性的标本再用nested-PCR分别扩增HRV的VP1和VP4/VP2结合区基因片段,阳性结果进行序列测定和基因分析。286份咽拭子标本中,27份标本多重PCR检测结果显示为HRV阳性,检出率为9.44%。本研究中,HRV感染病例的平均年龄为3岁,其中,1岁以内儿童感染比例最高,占总阳性数的44.4%(12/27);在27例HRV阳性病例中,男性占16例(16/185,8.64%),女性占11例(11/101,10.89%),两者无显著性差异;HRV感染的高峰出现在5月份(6/27,22.2%);从HRV感染的疾病构成看,普通感冒的比例最高,占12.24%(12/98);其次为肺炎,占8.50%(13/153);剩余2病例均为支气管炎。基因序列特征分析发现:A组HRV是甘肃地区2011年的优势流行基因型,占阳性病例的84.62%(22/26),其次为C组HRV,占11.54%(3/26),B组HRV仅发现1例。HRV感染在2011年甘肃地区全年均可发生,主要感染以1岁以内儿童。A组HRV是该地区2011年急性呼吸道感染儿童患者中的主要流行基因型,并存在多个基因型和多个HRV血清型共同流行的特点。
- 张爽毛乃颖于德山黄国虹李晓霞李红育李保娣张燕崔爱利陈祥鹏于爱莲许文波
- 关键词：急性呼吸道感染多重PCR基因型
- 噬菌体浓缩方法的比较被引量：8
- 2013年
- 目的:对不同噬菌体浓缩方法进行比较。方法:采用PEG沉淀、PEG反透析、阴阳离子结合树脂、超滤等5种方法对T4、T7、N4等3类噬菌体进行浓缩对比试验;在此基础上,用浓缩效果较好的方法对土壤和河道污水样本中的噬菌体进行浓缩,观察浓缩效果。结果:上述5种方法对3类噬菌体均有浓缩效果;超滤的浓缩效果最好,其次是PEG反透析,PEG沉淀没有很好的浓缩效果;河水样本中噬菌体的回收率比土壤样本高。结论:可通过PEG反透析、超滤或两者相结合的方法,得到高浓度的有活性的噬菌体。
- 韩传银张飞雄童贻刚
- 关键词：噬菌体
