国家重点基础研究发展计划(2011CB111601)
- 作品数:3 被引量:12H指数:2
- 相关作者:吴灶和简纪常丁燏周泽军庞欢瑛更多>>
- 相关机构:广东海洋大学仲恺农业工程学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- Identification of novel cross immunogenic proteins among Vibrio alginolyticus,Vibrio harveyi and Vibrio parahaemolyticus by immunoproteomic analysis
- In this paper,the two-dimensional electrophoresis(2-DE) gels of Vibrio alginolyticus,Vibrio harveyi and Vibrio...
- Huanying PangShuanghu CaiYucong HuangJufen TangJichangJianYishan LuZaohe Wu
- 文献传递
- 溶藻弧菌HY9901外膜蛋白OmpH的基因克隆及其生物信息学分析被引量:2
- 2013年
- 根据已发表的溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)全基因组序列设计1对特异性引物,PCR扩增溶藻弧菌HY9901株外膜蛋白OmpH的全长基因。结果显示,该基因(GenBank登录号:JX855924)全长573 bp,共编码190个氨基酸残基。根据推导的氨基酸序列预测其分子量约为21.1 kD,等电点为9.02。SignalP 4.0、TMHMM Server 2.0和SofiBerry-Psite预测结果显示,OmpH不存在信号肽与跨膜区,含有1个N-糖基化位点,6个磷酸化位点,1个内质网靶信号位点以及3个微体C末端靶信号位点。利用MAGE5.0软件,以邻位相连法构建OmpH系统进化树,结果显示,溶藻弧菌OmpH与副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈氏弧菌(Vibrio harveyi)等有较近亲缘关系。采用多种参数成功预测了OmpH可能的B细胞抗原优势表位,分别是第5-10、106-110、120-125、158-163和175-180区段。利用SWISS-MODEL软件,模拟了OmpH亚基三维结构模型,且与其同源蛋白大肠杆菌(Escherichia coli)Skp蛋白有相似构型。
- 周泽军庞欢瑛丁燏简纪常吴灶和
- 关键词:溶藻弧菌基因克隆外膜蛋白生物信息学分析
- 溶藻弧菌HY9901转运蛋白TolB的原核表达及条件优化和纯化被引量:7
- 2013年
- 为研究溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)HY9901转运蛋白TolB作为疫苗候选抗原的可能性,根据已发表的溶藻弧菌HY9901转运蛋白TolB序列(JQ846501),设计1对带酶切位点的引物,PCR扩增tolB基因,然后经酶切、连接等步骤,构建tolB基因的原核表达载体pET-TolB,并对其IPTG浓度、诱导时间、温度、洗脱浓度进行优化,以期获得较大量的目的蛋白。结果表明:IPTG诱导后经SDS-PAGE与Western-blot分析,成功表达了溶藻弧菌HY9901株TolB蛋白,分子量与预期相符,且表达的蛋白以包涵体的形式存在;TolB蛋白在大肠杆菌中诱导表达的优化条件为:0.2mmol/L IPTG,37℃诱导4h;最佳咪唑洗脱浓度为400mmol/L。这些结果为进一步研究目的蛋白的免疫原性和疫苗制备奠定基础。
- 周泽军庞欢瑛丁燏简纪常吴灶和
- 关键词:溶藻弧菌原核表达纯化
- 哈维氏弧菌的分子遗传多样性研究被引量:3
- 2012年
- 运用RAPD分型和BOX分型分子方法研究患病的海水鱼类体内和海水环境的101株哈维氏弧菌的分子遗传多样性。结果显示,从10个RAPD引物中发现只有PM2引物的分辨率和重复性较好,出现15条不同RAPD条带,在相似度65%下,101株哈维氏弧菌可以分为18种不同型;BOX分型出现20条不同的条带,在相似度为40%的情况下,可以把101株哈维式弧菌分15种不同的型;综合RAPD PM2和BOX分型,发现在相似度50%下,101株哈维氏弧菌可分18种型。综合RAPD和BOX分型数据可以很好地克服各自的缺点,得到更加准确的分型结果。
- 徐芝亮吴灶和简纪常黄郁葱
- 关键词:哈维氏弧菌海水鱼类RAPD分型