山东省科技攻关计划(2010GWZ20232)
- 作品数：3 被引量：21H指数：2
- 相关作者：闫歌尹昆李冕朱嵩张佃波更多>>
- 相关机构：山东省医学科学院莱州市人民医院济南大学更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划济宁市科技发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 腺病毒siRNA抑制RhoA基因并联合TNF-α诱导肝癌细胞凋亡的研究被引量：3
- 2012年
- 目的建立RhoA基因的腺病毒siRNA系统,并联合TNF-α诱导肝癌细胞凋亡,分析RhoA在肿瘤细胞中的功能和作用。方法用已构建的RhoA干扰质粒构建RhoA的腺病毒siRNA系统,筛选重组病毒并感染HepG2细胞,应用Western blot和RT-PCR检测RhoA蛋白表达和基因表达水平。感染Ad-siRNA-RhoA腺病毒的肝癌细胞用TNF-α诱导后进行MTT以及细胞内DNA片段化检测。结果成功构建RhoA基因的siRNA腺病毒系统。用重组病毒感染肝癌细胞,RhoA蛋白表达抑制率为76.48%;RhoA基因的mRNA转录水平降低74.46%。MTT检测显示,感染腺病毒Ad-U6-control对照组以及感染腺病毒Ad-siRNA-RhoA实验组的细胞A值差异无统计学意义(F=5.41,P>0.01),即利用siRNA抑制肝癌细胞中RhoA表达,肿瘤细胞凋亡不明显。TUNEL检测显示,RhoA腺病毒siRNA联合TNF-α致肿瘤细胞凋亡作用显著。结论构建的腺病毒siRNA载体系统能抑制目的基因RhoA的表达,联合TNF-α能抑制肿瘤细胞生长和增殖并诱导肿瘤细胞凋亡,为肿瘤基因功能的基础研究和肿瘤基因治疗打下了实验基础。
- 李冕朱嵩尹昆刘俏俏巴再华张佃波闫歌
- 关键词：RHOA基因TNF-Α肝癌细胞SIRNA腺病毒
- 弓形虫病的诊断技术及其研究进展被引量：17
- 2011年
- 弓形虫人体感染越来越多,刚地弓形虫感染诊断的快速和特异是发现和治疗此病的关键。本文对病原学、免疫学和核酸等弓形虫检测技术及其最新的研究进展进行了综述。
- 李冕尹昆闫歌
- 关键词：弓形虫病免疫学
- 乙肝表面抗原和弓形虫棒状体分泌抗原多功能真核表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的探讨通过体外扩增乙肝表面抗原(HBsAg)基因,构建真核表达载体pcDNA3-HBsAg-ROP2的可行性。方法根据乙肝S基因序列及pcDNA3-p30-ROP2酶切位点等情况设计、合成引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术,扩增HBsAg基因片段;应用回收、纯化、酶切、连接等技术,将HBsAg基因替换pcD-NA3-p30-ROP2中的p30基因,并进行酶切、PCR扩增及测序鉴定。结果 PCR扩增出约0.7 kb的目的基因HBsAg,成功构建pcDNA3-HBsAg-ROP2重组载体。PCR、酶切结果与理论相符,重组体包含了HBsAg和ROP2基因的完整序列。结论利用体外扩增乙肝表面抗原,可成功构建乙肝和弓形虫多功能重组载体pcDNA3-HBsAg-ROP2。
- 魏庆宽肖婷李瑾马丽萍王林王英婷闫运琴高建丽朱嵩仲维霞尹昆付斌张佃波闫歌黄炳成
- 关键词：弓形虫基因重组
