国家自然科学基金(30040036) 作品数:13 被引量:164 H指数:6 相关作者: 汪以真 许梓荣 林文学 韩菲菲 韩新燕 更多>> 相关机构: 浙江大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
哺乳动物抗菌肽及其在畜牧生产上的应用前景 被引量:44 2002年 抗菌肽是阳离子型活性肽 ,是哺乳动物防御体系的一个重要组成部分 ,具有分子量小 ,热稳定性好 ,无免疫原性 ,抗菌谱广等特点 ,通过改变细菌细胞膜的通透性而发挥抗菌作用 ,这不同于抗生素通过阻断大分子生物合成的作用机理 ,因而致病菌不易对其产生耐药性。本文就几种哺乳动物抗菌肽特性、抗菌机理、基因表达及其研究展望和存在问题进行了综述。 汪以真 韩新燕 许梓荣关键词:畜牧生产 抗菌肽 基因表达 哺乳动物 抗菌作用 哺乳动物抗菌肽的研究进展 被引量:20 2002年 韩新燕 汪以真 许梓荣关键词:抗菌肽 抗菌活性 哺乳动物 Cathelicidins类抗菌肽研究进展 被引量:4 2003年 论述了动物先天免疫中的重要成分———抗菌肽家族之一的cathelicidins家族的基因结构特点及其表达;生物学活性、作用机理等方面的特点,并对其应用前景做了展望。 王中强 汪以真关键词:CATHELICIDINS 抗菌肽 免疫 生物学活性 锌对断奶后不同阶段仔猪抗菌肽PR-39 mRNA表达的影响 被引量:8 2005年 72头36日龄杜长嘉(♂杜洛克×♀长嘉)断奶仔猪按体重相近要求随机分成3个处理组,每个组设3个重复,每个重复8头猪(公母各半)。对照组(处理1)饲喂不添加任何锌源的基础饲粮(DE 13.2 5 MJ/kg,CP 18.5 % ) ,处理2和处理3分别饲喂添加硫酸锌(10 0 mg/kg Zn)和氧化锌(30 0 0 mg/kg Zn)饲粮。试验分两个阶段进行,分别在5 8日龄和80日龄屠宰取样。本实验室根据已报道的猪抗菌肽PR- 39和看家基因β-肌动蛋白(β- actin)基因序列,分别设计PR- 39和β- actin的引物,探讨了PCR体系中适宜的Mg Cl2 浓度、循环次数,以及两对引物间竞争情况。以此构建一优化的半定量RT- PCR法,以β- actin为内标,研究锌对不同阶段断奶仔猪抗菌肽PR- 39基因表达的影响。结果显示,5 8日龄仔猪试验组与对照组相比,高氧化锌组(30 0 0 mg/kgZn)显著提高了抗菌肽PR- 39基因的表达量,提高量为378.2 6 % (P<0 .0 1) ,硫酸锌组(10 0 mg/kg Zn)使抗菌肽PR- 39基因的表达也分别提高了38.4 % ,但统计结果差异不显著。80日龄仔猪试验组与对照组相比,高Zn O组(30 0 0 mg/kg Zn)中PR- 39基因表达量比对照组分别提高4 .5 2 % ,统计结果无显著变化,Zn SO4 组(10 0 m g/kg Zn)中PR- 39基因表达量比对照组提高了5 1.97% 。 赵燕飞 汪以真 林文学关键词:RT-PCR 锌 抗菌肽 基因表达 猪肠道抗菌肽PR-39基因克隆及序列分析 被引量:2 2002年 从杜长大猪的骨髓中提取基因组RNA,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行cDNA扩增,获得一条349bp的片段,克隆于pGEM-TVector后进行序列分析结果表明,该片段为PR-39基因cDNA的部分序列,编码113个氨基酸组成的多肽,是成熟肽的主体部分.本研究得到的基因片段与报道的猪PR-39cDNA部分序列完全一致. 汪以真 俞颂东 林文学关键词:基因克隆 抗菌肽与抗生素的体外抗菌效果比较 被引量:42 2004年 应用由 Hancock实验室改进的微量肉汤稀释法测定了 cecropin P1、cecropin A、magainin 2、defensin 1、bactenecin、lactoferricin和 indolicidin等 7种抗菌肽和盐酸金霉素、去甲万古霉素、土霉素、强力霉素等 4种抗生素的体外抗菌活性 ,并且使用薄层琼脂糖孔穴扩散法比较了抗菌肽中 cecropin P1和 cecropin A与土霉素和呋喃唑酮对大肠杆菌 K88的抑菌效果。结果发现 ,抗菌肽与抗生素一样对几种革兰氏阳性菌和阴性菌都有不同程度的抗菌效果。其中 cecropin A、cecropin P1和 defensin1对大肠杆菌的 2个菌株 ATCC2 5 92 2和 K88的抗菌活性高于抗生素 ,defensin1是各种抗菌肽中对金黄色葡萄球菌抗菌效果最好的。抗生素对试验用金黄色葡萄球菌的抑制活性总体上要好于抗菌肽。与抗生素相比 ,cecropin A、cecropin P1和 indolicidin对猪霍乱沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌具有更好的抗菌效果。另外 ,抗菌肽的抑菌圈边缘十分清晰 ,而抗生素的整个抑菌圈都比较模糊且界线不明。因此 ,从抗菌效果方面考虑 。 汪以真 王中强 许梓荣关键词:抗菌肽 抗生素 药敏试验 抗菌效果 新型高效安全的抗菌制剂——抗菌肽 被引量:2 2007年 抗菌肽是一种具有广谱抗菌性能的多肽,在畜牧业上具有重要的潜在应用前景。作者综述了抗菌肽的生物学特性、功能和抗菌机制,以及新发现的抗菌肽,并对其应用研究及前景进行阐述。 沈顺新 王敏奇关键词:抗菌肽 生物学特性 抗菌机制 不同锌源对断奶仔猪抗菌肽PR-39 mRNA表达的影响 被引量:18 2005年 96头36日龄杜长嘉(杜洛克×♀长嘉)断奶仔猪,按体质量相近原则随机分成4个处理组,每个组设3个重复,每个重复8头猪(公母各半)。对照组(处理1)饲喂不添加任何锌源的基础饲料(DE 13.25 M J/kg,CP 18.5%),处理2、处理3、处理4分别饲喂添加硫酸锌(Zn 100 m g/kg)、氧化锌(Zn 3 000 m g/kg)和纳米氧化锌(Zn 100 m g/kg)饲粮。根据已报道的猪抗菌肽PR-39和看家基因β-肌动蛋白(-βactin)基因序列,分别设计PR-39和-βactin的引物,探讨了PCR体系中适宜的M gC l2浓度、循环次数,以及2对引物间竞争情况。以此构建一优化的半定量RT-PCR法。以β-actin为内标,研究了不同锌源对仔猪抗菌肽PR-39基因表达的影响。结果显示,与对照组相比,高氧化锌组(Zn 3 000m g/kg)显著提高了抗菌肽PR-39基因的表达量,提高量为378.26%(P<0.01),硫酸锌组(Zn 100 m g/kg)和纳米氧化锌组(Zn 100 m g/kg)也分别使抗菌肽PR-39基因的表达提高了38.4%和23.91%,但统计结果差异不显著。 汪以真 王静华 林文学 许梓荣 韩菲菲关键词:RT-PCR 锌 抗菌肽 小白鼠乳铁蛋白基因片段克隆及不同泌乳阶段乳铁蛋白基因表达的差异 被引量:3 2004年 从泌乳期小白鼠乳腺组织中提取总RNA,用反转录酶反转录为cDNA后,根据已报道的小白鼠乳铁蛋白(LF)cDNA设计一对引物,采用聚合酶链式反应(PCR)进行扩增,获得一条897bp的片段,克隆于pGEM-TVector后进行序列分析表明,该片段为LF基因cDNA的部分序列,编码299个氨基酸组成的多肽,是成熟肽的主体部分.本研究得到的基因片段与已报道的小白鼠子宫LFcDNA部分序列的同源性达到99%.以LF基因片断的成功克隆为基础,本实验室构建了一优化的半定量RT-PCR法,以β-actin为内标,研究不同泌乳阶段小白鼠乳腺组织LF基因表达的差异.结果显示,不同泌乳阶段小白鼠LF基因表达有差异,在泌乳第1日,LF基因的表达量较高,从泌乳第1日到泌乳第10日和第18日,LF基因表达量呈下降趋势,到乳腺组织退化的干乳期(泌乳第25日),LF基因表达量又明显升高. 汪以真 韩菲菲 黄海青关键词:小白鼠 乳铁蛋白基因 克隆 泌乳阶段 抗菌肽Protegrin-1基因的PCR扩增和克隆及序列分析 2004年 从杜长嘉猪的骨髓中提取基因组RNA,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增抗菌肽Protegrin-1(PPG-1)基因,获得一条565bp的片断,以pGEM-TEasyvector为载体,将该基因片断克隆到大肠杆菌中.从筛选到的阳性克隆中分离出Protegrin-1基因,测定其序列,并由此推导出氨基酸序列.结果表明:1该片断长565bp,为Protegrin-1基因cDNA的部分序列,序列同源性比较表明,该基因序列与GeneBank登录的Protegrin-1基因序列具有较高的同源性,达到98.8%.2根据所测序列推导其成熟肽由18个氨基酸残基组成,其氨基酸序列与GeneBank登录的Protegrin-1的成熟肽序列完全一致. 汪以真 刘光富 初晓娜 韩菲菲关键词:骨髓 基因克隆