上海市科委重大科技攻关项目(06DZ05907)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：邓涛王铸钢费俭孙瑞林更多>>
- 相关机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：上海市科委重大科技攻关项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 四倍体补偿技术的建立及其应用被引量：2
- 2008年
- 常规基因剔除小鼠的获得主要是利用ES细胞的全能性先获得嵌合体小鼠,再利用ES细胞的生殖系传递能力,通过嵌合体与野生型小鼠的交配获得杂合子小鼠.而四倍体补偿技术则可绕过嵌合体小鼠阶段,直接获得基因修饰杂合子小鼠.利用电融合技术和Piezoelectric microinjection显微注射技术建立了四倍体补偿技术,小鼠四倍体胚胎的获得率(电融合率)为(93.01±1.37)%,经体外培养囊胚形成率为(82.49±2.08)%.通过显微注射方法将2种129品系小鼠来源的ES细胞(CJ7和SCR012)注射到四倍体囊胚腔中,获得了完全ES细胞来源的小鼠,ES鼠的获得率分别为2.7%和8.3%.经微卫星DNA检测,成体小鼠的10个被检测组织均为129小鼠来源的.同时,也利用基因修饰的ES细胞进行了研究,获得了2种基因修饰的完全ES细胞来源的杂合子小鼠,部分小鼠具有繁殖能力,经繁育已获得了纯合子,其中凝血因子Ⅷ基因敲除小鼠获得了预期的血友病小鼠表型.上述结果说明四倍体补偿技术可应用于基因修饰小鼠的制备.
- 匡颖孙霞邓涛卢希彬孙瑞林王铸钢费俭
- 关键词：基因修饰
