山东省科技攻关计划重大科技专项(2007ZHZX11101)
- 作品数：10 被引量：31H指数：4
- 相关作者：董雅娟柏学进李兴芳龚宜超王文明更多>>
- 相关机构：青岛农业大学山东布莱凯特黑牛科技股份有限公司更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划重大科技专项国家高技术研究发展计划山东省农业良种工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新生牛与成年牛骨髓间充质干细胞的生物学特性比较被引量：3
- 2008年
- 【目的】建立体外分离、培养和扩增牛骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的方法,研究牛龄对BMSCs增殖特性的影响。【方法】用贴壁筛选法纯化新生牛与成年牛的BMSCs,传代扩增,测定生长曲线和贴壁率,并进行形态学观察。【结果】通过体外培养,可使体内环境下低丰度的BMSCs实现扩增。新生牛BMSCs易于分离纯化,贴壁率及增殖能力显著高于成年牛。【结论】新生牛比成年牛更适于BMSCs的提取。BMSCs的增殖生长特性与年龄密切相关,增殖能力和活性随着年龄的增加而降低,成功地建立了一种分离培养牛BMSCs的方法,分析了BMSCs部分生物学特性,为进一步深入研究BMSCs的诱导分化和应用打下基础。
- 封纪武柏学进赵晶赵兴董雅娟
- 关键词：年龄骨髓间充质干细胞生物学特性增殖
- 5-Aza诱导BMSC分化为心肌细胞的分子生物学检测被引量：4
- 2009年
- 【目的】利用分子生物学方法探讨5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-Aza)体外诱导牛骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSC)向心肌细胞的分化,为转基因良种肉牛培育提供种子细胞,提高转基因效率。【方法】利用获取的纯化稳定的P4、P8、P12代BMSC各经5、10、15μmol·L-1的5-Aza进行体外诱导分化,统计并计算心肌细胞的转化率,对诱导出现的心肌样细胞进行形态学观察和RT-PCR鉴定。【结果】诱导后细胞大多呈现梭形,排列方向渐趋一致,有肌管样结构形成。相同代数的BMSC在10μmol·L-1的5-Aza作用下诱导效果最佳;在相同浓度的5-Aza作用下,BMSC向心肌细胞的转化率随着传代次数的增加逐渐降低。RT-PCR显示诱导分化后的细胞明显表达心肌细胞的4种特异性基因,分别是α-心脏肌动蛋白(378bp)、结蛋白(601bp)、心脏肌钙蛋白T(331bp)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)(273bp)。【结论】5-Aza体外可诱导牛骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞;利用P4代BMSC在10μmol·L-1的5-Aza的作用,诱导效果明显。
- 龚宜超董雅娟柏学进封纪武李兴芳刘昌菊
- 关键词：骨髓间充质干细胞5-氮杂胞苷心肌细胞
- 不同饲养层对牛胚胎干细胞培养的影响被引量：2
- 2010年
- 本研究建立牛胚胎干细胞(Bovine Embryonic Stem Cells ESCs)的分离培养体系,摸索牛ESCs的培养条件。对牛运用FSH减量注射法进行超数排卵获取胚胎。从获得的胚胎中分离ESCs,在不同的饲养层(牛骨髓间充质干细胞、牛成纤维细胞、牛乳腺干细胞)上培养,对牛ESCs进行形态学观察及鉴定。牛MSCs做饲养层与牛SFCs、牛MaSCs相比差异显著,牛MSCs的效果最佳(P<0.05)。牛ESCs在牛MSCs做饲养层的条件下更易生长。分析了不同饲养层对牛ESCs分离培养的影响,建立了一种分离培养牛ESCs的饲养层体系,为进一步深入研究ESCs的诱导分化和应用打下基础。
- 张守宝柏学进朱金香王文明刘玮董雅娟
- 关键词：超数排卵饲养层
- 不同培养液对牛卵母细胞成熟及核移植效率的影响被引量：1
- 2010年
- 在牛卵母细胞成熟液中分别添加促卵泡素(FSH)10μg/L、胰岛素-转铁蛋白-硒(ITS)10μL/mL、表皮生长因子(EGF)10μg/L,配成3种不同体外成熟液对牛卵母细胞进行成熟培养,结果FSH组卵母细胞成熟率84.2%显著高于ITS组75.9%和EGF组70.2%。卵母细胞成熟后构建牛体细胞核移植胚胎,结果FSH、ITS组卵裂率分别为87.2%、81.9%,显著高于EGF组(73.6%),但三组间囊胚率差异不显著(P>0.05)。
- 王文明董雅娟柏学进村上正夫刘玮张守宝
- 关键词：卵母细胞成熟促卵泡素ITS表皮生长因子
- 布莱凯特肉牛3个微卫星座位的克隆与序列分析
- 布莱凯特肉牛是我国培育的优良的肉牛新品种,以肌间脂肪含量高,大理石花纹明显著称。利用已报道的与牛肉用性状相关的3个微卫星座位BM1824、ETH10和TGLA5 3对布莱凯特肉牛、鲁西黄牛和日本和牛3个肉牛群体的1 82...
- 董懿为董雅娟柏学进封纪武
- 关键词：肉牛微卫星座位克隆
- 文献传递
- 奶牛乳腺上皮细胞的分离培养及分子生物学鉴定被引量：4
- 2010年
- 利用贴壁筛选法分离培养奶牛乳腺上皮细胞,并对其进行核型分析和RT-PCR鉴定。结果表明,体外培养的奶牛乳腺上皮细胞生长旺盛,具有典型的上皮细胞形态特征,体外传代15次后核型未发生改变。RT-PCR鉴定结果表明,分离培养的细胞明显表达奶牛乳腺上皮细胞的2种特异性基因,即as1酪蛋白基因(1 736 bp)和k酪蛋白基因(780 bp)。
- 刘玮董雅娟柏学进王文明张守宝董懿为
- 关键词：乳腺上皮细胞
- 渤海黑牛H-FABP基因外显子2的序列测定与分析被引量：6
- 2009年
- [目的]为改良渤海黑牛地方品种及种质资源的保护提供技术依据。[方法]根据GenBank发表的牦牛心脏脂肪酸结合蛋白基因(H-FABP)的序列设计1对引物,利用PCR技术扩增出渤海黑牛H-FABP基因外显子2的DNA片段,测定其核苷酸序列并进行氨基酸序列的推导,同时将序列与牦牛、山羊、猪、人、小鼠和鸡的外显子2序列进行比较,并且进行系统发生树的构建。[结果]渤海黑牛的H-FABP外显子2核苷酸序列和氨基酸序列与牦牛、山羊、猪、人、小鼠和鸡各物种间同源性分别为100%、97.1%、94.2%、89.0%、83.8%、79.8%,100%、98.2%、94.7%、86.0%、86.0%、77.2%。系统发生结果显示,系统发生树总体分为两支,鸡单独为一支;渤海黑牛、牦牛、山羊、猪、人、小鼠聚在一起成为另一支。[结论]渤海黑牛H-FABP外显子2具有很强的保守性,H-FABP基因外显子2进化树符合物种进化规律。
- 李兴芳柏学进龚宜超刘昌菊董雅娟
- 关键词：渤海黑牛H-FABP基因
- 布莱凯特牛心脏脂肪酸结合蛋白基因的序列测定及分析被引量：7
- 2010年
- 根据GenBank发表的牦牛心脏脂肪酸结合蛋白(heart fatty acid-binding protein,H-FABP)基因的序列设计13对引物,分13段扩增出布莱凯特牛H-FABP基因,采用PCR产物直接测序的方式对各个片段进行测序,使用生物信息学软件对各个片段的测序结果进行拼接,得到布莱凯特牛H-FABP基因的全序列,并对其进行序列分析。结果表明,布莱凯特牛的H-FABP基因(GenBank登录号:FJ756345)是由4个外显子(73、173、102和54 bp)和3个内含子(3463、1892和1494 bp)组成;布莱凯特牛与牦牛、普通牛、山羊、猪、马、人、大鼠、小鼠和鸡等9个物种之间的核苷酸同源性大小依次为99.3%、99.0%、96.3%、92.5%、89.8%、88.3%、83.3%、82.8%、75.6%,其氨基酸的同源性为99.2%、99.2%、96.2%、93.2%、91.7%、88.7%、86.5%、86.5%、77.4%;系统发生树将这些物种总体上分成2支,鸡为独立的一支,布莱凯特牛、牦牛、普通牛、山羊、猪、马、人、大鼠、小鼠为另一独立的大分支。因此,渤海黑牛H-FABP基因具有很强的保守性,其进化树符合物种进化规律。
- 李兴芳柏学进董懿为封纪武董雅娟
- 关键词：H-FABP基因
- 骨髓间充质干细胞诱导分化为上皮细胞的影响因素
- 骨髓间充质干细胞是存在于骨髓基质中的非造血系细胞,它们能够分化成中胚层和非中胚层细胞。在特定的诱导条件下骨髓间充质干细胞可以定向分化为上皮细胞,本文主要讨论相关因素对诱导骨髓间充质干细胞分化为上皮细胞的影响。分析这些人工...
- 朱孟芝董雅娟王文明刘玮张守宝董懿为柏学进
- 关键词：骨髓间充质干细胞上皮细胞
- 文献传递
- IGF-1基因在牛育种上的应用及展望
- 随着人们生活水平的提高,国民对于牛产品的消费需求也不断提高。于是怎样提高牛的育种水平是当今急需解决的问题,而分子标记育种技术不仅为牛育种过程中高效而精确地选择目标基因型开辟了新道路,也使传统的育种工作跨上了新台阶。在众多...
- 牛召珊董雅娟宋少康朱孟芝柏学进
- 关键词：分子标记SNPIGF-1
- 文献传递
