国家高技术研究发展计划(2012AA022105)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：张伟刘晴张宇微刘波张宇宏更多>>
- 相关机构：中国农业科学院生物技术研究所浙江工商大学广州医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 热稳定6-磷酸-β-葡萄糖苷酶TteBglB异源表达、分离纯化及酶学性质分析被引量：3
- 2014年
- 6-磷酸-β-葡萄糖苷酶（EC 3.2.1.86）催化6-磷酸-葡萄糖苷类化合物（如6-磷酸-纤维二糖、6-磷酸-纤维素寡糖）产生6-磷酸-葡萄糖而使纤维素完全分解,在微生物碳源利用过程中起重要作用。腾冲嗜热厌氧杆菌是一株嗜热厌氧微生物,提供了丰富的热稳定性蛋白基因资源。从该菌株中克隆编码6-磷酸-β-葡萄糖苷酶的基因Ttebgl B,并在E.coli BL21（DE3）进行了异源表达。结果表明,TteBglB催化反应的最适p H为6.0、最适温度为70℃,在pH 4-10或70℃时有着良好的稳定性;同时证实,TteBglB属于糖基水解酶家族1（GH1）成员,可不依赖Mn^2＋、Ni^2＋、Co^2＋或Fe^2＋等二价金属离子而发挥催化作用。以pNPβG6P为底物时,催化反应的Km为0.054 mmol/L,Kcat为81.47/min,Vmax为0.003992 mmol/min,酶比活为18.093 U/mg。
- 刘晴张宇微张宇宏徐欣欣张伟刘波顾青
- 关键词：糖苷水解酶
- 产紫杉醇真菌Pestalotiopsis microspora NK17适合遗传筛选的培养基优化
- 2016年
- 小孢拟盘多毛孢菌株NK17被证明能够产生多种具有药物开发价值的紫杉烷类似物以及冠心病治疗药物的前导物pestalotiollide B等次级代谢产物。由于是天然分离的菌株,该菌的营养要求未知,特别是缺少合适的全合成基础培养基,制约了实验室对其性状和基因水平的操作。尤其是在使用营养缺陷型菌株进行遗传转化时,全合成基础培养基是筛选工作的前提。对各种基础培养基进行筛选比较,最终确定酵母氮源加乳糖和硫酸铵的全合成基础培养基最适合NK17菌丝生长和营养缺陷型筛选。同时对该培养基的发酵产物进行了研究,成功应用该培养基进行了缺陷型回补筛选,效果较好。
- 陈龙飞朱项阳李莹莹张倩潘皎朱旭东
- 关键词：基础培养基营养缺陷型次级代谢
- 异常球菌辐射损伤修复机制及其相关功能蛋白的研究进展被引量：1
- 2013年
- 耐辐射异常球菌(Deinococcus radiodurans)是迄今发现的最具抗辐射的微生物之一,对干燥、电离辐射、紫外线、强氧化剂等极端条件表现出超强的抗性。耐辐射异常球菌具有很多与修复相关的基因,能够通过代谢途径控制的网络系统有效的调整并修复DNA。目前,对胁迫逆境下耐辐射异常球菌损伤DNA的高效精确修复机制的了解还非常有限。本文综述了耐辐射异常球菌DNA损伤修复方式及其重要功能蛋白的研究进展。
- 张陈周正富陈明林敏张维
- 关键词：耐辐射异常球菌同源重组RECA
- 特异腐质酶Humicola insolens Y1耐热型木聚糖酶基因的克隆及酶学性质分析
- 2013年
- 利用简并PCR和TAIL-PCR从嗜热特异腐质霉Humicola insolens Y1中克隆得到一个新的耐热型木聚糖酶基因xynD。该基因全长1 104 bp,共编码367个氨基酸,不含有内含子,N端的22个氨基酸为信号肽。成熟蛋白在毕赤酵母中进行了重组表达,重组蛋白经超滤和离子交换柱纯化后达到电泳纯。对其酶学性质分析表明,XynD的最适pH为6.0,在pH 4.0～7.0可以保持80%以上的酶活性,在pH 5.0～10.0具有良好的pH稳定性。最适作用温度为70℃,在60℃条件下保持稳定。多数金属离子对XynD酶活力没有明显的影响。麦芽汁降解实验表明,XynD与商用β-葡聚糖共同作用可以提高麦芽的过滤速率(45.7%)并降低粘度(8.1%)。因此XynD在酿酒业,特别是啤酒制造业具有潜在的应用价值。
- 李雅楠余利红李昀楷马文康张伟
- 关键词：Y1木聚糖酶基因克隆与表达酶学性质
