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湖南省教育厅重点项目(03A017)

作品数:3 被引量:24H指数:3
相关作者:刘忠松官春云严明理刘显军袁谋志更多>>
相关机构:湖南农业大学更多>>
发文基金:教育部科学技术研究重点项目国家自然科学基金湖南省教育厅重点项目更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 3篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇油菜
  • 2篇芥菜
  • 2篇芥菜型
  • 2篇芥菜型油菜
  • 2篇基因
  • 1篇油菜种
  • 1篇油菜种子
  • 1篇种皮
  • 1篇种子
  • 1篇酶基因
  • 1篇克隆
  • 1篇类黄酮
  • 1篇还原酶
  • 1篇还原酶基因
  • 1篇RNA
  • 1篇RNA提取
  • 1篇RT-PCR...
  • 1篇菜种

机构

  • 3篇湖南农业大学

作者

  • 3篇刘显军
  • 3篇严明理
  • 3篇官春云
  • 3篇刘忠松
  • 2篇陈社员
  • 2篇袁谋志
  • 1篇熊兴华

传媒

  • 1篇生物技术通报
  • 1篇中国农业科学
  • 1篇作物学报

年份

  • 1篇2008
  • 2篇2007
3 条 记 录,以下是 1-3
排序方式:
一种提取高质量油菜种子和种皮RNA的方法被引量:5
2007年
提取高质量的RNA是从基因表达水平上研究油菜种子和种皮发育的必要条件。现有方法因为油菜种子脂肪、多酚和多糖,难以快速获得完整、高纯度的油菜种子总RNA。本试验针对油菜种子和种皮特点,利用苯酚-氯仿抽提后用无水乙醇沉淀RNA,建立了在油菜种子和种皮中快速提取高质量总RNA的提取方法,电泳分析表明28S rRNA亮度约为18S rRNA的2倍;紫外分光光度计检测A260/A280介于1.8~2.0之间。用该法分离的RNA,已成功用于RT-PCR、Northern blot分析和基因全长的克隆等分子生物学研究。
严明理刘忠松官春云陈社员刘显军
关键词:RNA提取油菜种子
芥菜型油菜类黄酮合成相关基因的克隆和序列分析被引量:8
2007年
【目的】分离和克隆芥菜型油菜类黄酮合成相关基因。【方法】采用同源克隆基因的方法,参照拟南芥等植物控制类黄酮合成的基因保守序列设计引物,对扩增片段进行测序并进行BLAST分析。【结果】有13对引物扩增的17个基因拷贝与参考基因序列相符,这些克隆属于13个已知功能基因,其中查尔酮合成酶基因有3个不同的基因拷贝,花色素形成(Production of anthocyanin pigment)基因和查尔酮异构酶基因分别有2个不同的基因拷贝,其余引物的扩增只获得一个拷贝。在GenBank数据库中进行检索表明,所克隆的基因拷贝中的DNA结合/转录因子基因(TT2、TT8、TTG2)、花色素形成基因(PAP)和黄烷酮-3-羟化酶基因(TT6),在芸薹属植物中未见报道。【结论】克隆芥菜型油菜类黄酮合成相关基因拷贝为阐明油菜种皮颜色形成的遗传调节奠定了基础。
严明理刘忠松官春云陈社员刘显军袁谋志
关键词:芥菜型油菜类黄酮基因
芥菜型油菜4-二氢黄酮醇还原酶基因的克隆和表达分析被引量:16
2008年
利用同源克隆方法,在芥菜型油菜中克隆了DFR基因。在DNA和cDNA中扩增的DFR基因大小分别为1612bp和1214bp。该基因含有5个内含子,开放阅读框为1158bp,预计编码385个氨基酸,预测分子量为42886.0Da,推测的等电点为5.54。DFR基因在芥菜型油菜紫叶芥和黑籽近等基因系的叶片、胚和种皮中都表达,在四川黄籽中只在叶片和胚中表达。DFR基因在四川黄籽种皮中不表达,导致种皮中花色素和原花色素不能合成,从而种皮透明,形成黄籽,因此DFR基因是油菜种皮颜色形成途径中一个关键基因。本研究为利用该基因与种子、种皮特异启动子构建反义表达载体或RNAi载体,阐明油菜种皮颜色形成的分子机理和创造黄籽油菜新种质奠定了基础。
严明理刘显军刘忠松官春云袁谋志熊兴华
关键词:芥菜型油菜克隆RT-PCR分析
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