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AtNCL,novel transmembrane protein with Ca2+-binding,involves in Ca2+across-membrane transportation in Arabidopsis: Plasma membrane plays important roles in cell signal sensing and material exchanging with environment.Calcium ...; Zhaowei Li Peng Wang Zenglin Zhao Daye Sun Sujuan Cui Institue of molecular and cell Biology

拟南芥钙调素定点突变基因分离及其在钙不依赖钙调素结合蛋白检测中的应用(英文): 2009年; 动植物系统研究表明,钙调素不仅在结合钙离子时调节多种靶酶或靶蛋白的活性,而且没有钙离子结合时,还可以通过结合钙不依赖的钙调素结合蛋白,发挥多种生物学作用.然而,目前却没有体内分析钙调素与钙不依赖钙调素结合蛋白相互作用的方法.首先,采用定点突变的方式,得到了拟南芥钙调素亚型2的多个突变基因mCaM2,随后,大肠杆菌重组表达突变蛋白的电泳迁移率及45Ca2+覆盖分析表明,得到了编码失去钙结合能力的钙调素的突变基因mCaM21234,mCaM21234突变钙调素中所有4个钙结合EF-hand结构域中的关键氨基酸谷氨酸均突变为谷氨酰胺.在酵母双杂交体系中,作为诱饵蛋白的突变钙调素mCaM21234与我们前期体外方法报道的钙不依赖性钙调素结合蛋白AtIQD26存在相互作用.这将为钙不依赖性钙调素结合蛋白提供有用的体内研究工具,有利于我们全面认识钙-钙调素-钙调素结合蛋白信号途径.; 高丽王振杰崔素娟; 关键词：定点突变拟南芥钙调素钙调素结合蛋白

Identification of Calmodulin-Binding Proteins in Membrane Proteome of Arabidopsis Suspension-Cultured Cells: Calmodulin,as one of most important calcium-sensor proteins in plant cell,binds with various soluble or membra...; Cui Yanwei Niu Yuqiang Sun Daye Cui Sujuan Institute of Molecular Cell Biology

植物细胞质膜受体: 2008年; 概述了植物细胞膜表面受体的主要类型、结构特点及其生物学功能的研究进展。; 崔彦伟崔素娟; 关键词：G蛋白偶联受体

钙调素参与拟南芥根细胞增殖及幼苗对外源脱落酸的敏感性反应过程被引量：4: 2011年; 钙调素作为真核细胞的重要信号蛋白,在真核生物正常及逆境条件下的生长发育中发挥着重要作用.研究报道钙调素可促进离体培养的高等动植物细胞的增殖,但有关钙调素蛋白在植物体内的细胞增殖功能尚未见报道.特别是拟南芥基因组中存在7个编码经典钙调素亚型的基因,多数编码基因的功能有待进一步探究.首先借助常用的钙调素拮抗剂W7进行药理学实验,结果表明,野生型拟南芥幼苗根的生长受到了明显的抑制,根尖分生区的面积变小、细胞数目明显减少,根尖分生区中细胞分裂标记基因CYCB1;1的表达受到了明显抑制,这表明在根尖分生区W7可能通过对活性钙调素的抑制作用影响了根尖分生区域的细胞增殖,而根尖分生区正常的细胞增殖需要一定量活性钙调素蛋白的存在.脱落酸(ABA)是植物逆境下的重要激素,在植物种子萌发及幼苗生长发育中发挥着重要作用,W7存在下的拟南芥幼苗对ABA的敏感性下降.借助反向遗传学手段获得了拟南芥中三个编码典型钙调素蛋白基因的三重缺失突变体cam234,蛋白质印迹结果表明三重缺失突变体中钙调素蛋白的含量明显降低.相同培养条件下与野生型相比,三重突变体幼苗根长变短,并且幼苗对ABA敏感性也表现下降趋势,暗示着这三个基因编码的钙调素蛋白可能参与了根分生区域细胞增殖过程及幼苗对脱落酸的敏感性反应,讨论了钙调素的细胞增殖功能及与幼苗对脱落酸的敏感性反应间的关系.; 程玉豆韩书云赵军峰高英杰孙大业崔素娟; 关键词：拟南芥根尖

拟南芥LFR原核重组蛋白纯化和多克隆抗体制备被引量：5: 2008年; 拟南芥中有一类含ARM结构域的蛋白质,研究表明它们中的一些在植物的生长发育和激素应答等方面发挥着重要的作用.在拟南芥突变体筛选中,获得了一个推测编码蛋白含ARM重复序列的新基因突变体lfr(leaf and flower relatedmutant),它在叶子和花的发育过程中表现出较明显的表型.为进一步研究该基因编码蛋白的生物学功能及其分子作用机制,构建了pGEX-2TGST∶LFR融合蛋白重组表达载体,将重组质粒转化到工程菌中诱导表达菌体蛋白,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,结果表明,融合重组蛋白成功获得了高效表达,分子质量在77ku左右.重组蛋白经谷胱甘肽S-转移酶(GST)标签蛋白亲和层析法纯化,SDS-PAGE制备胶割胶富集,电洗脱法纯化后得到纯度较高的抗原.经对新西兰兔进行5次免疫,获得了多克隆抗血清.采用免疫吸附方法对抗血清进行了纯化,结果得到只识别LFR重组蛋白的抗血清.进一步提取拟南芥野生型及突变体的核蛋白,经蛋白质印迹检测,结果显示,在分子质量50ku左右处出现特异的蛋白质条带,证明所制备的抗血清可以与拟南芥LFR蛋白特异性结合.; 高宁王志娟曾博崔素娟; 关键词：拟南芥原核表达多克隆抗体

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教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-06-0256)

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