国家科技部科研院所技术开发研究专项(2008EG150298)
- 作品数：3 被引量：44H指数：3
- 相关作者：孙晓波孙桂波李明马博孙静更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院黑龙江中医药大学温州医学院更多>>
- 发文基金：国家科技部科研院所技术开发研究专项国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肠上皮细胞模型不同培养条件的优化及适应性研究被引量：7
- 2011年
- 目的:建立肠上皮(Caco-2)细胞单层模型,探讨不同培养条件对细胞单层模型的影响,优化适宜的条件,提供稳定、重复性好的Caco-2细胞模型。方法:将细胞接种Transwell培养板上进行体外培养,并比较3种Transwell培养板及包被鼠尾胶原蛋白对细胞单层的影响,通过透射电镜和倒置显微镜观察细胞单层的形态学特征,通过测定细胞单层的电阻值、细胞两侧碱性磷酸酶含量、荧光素钠的透过量验证细胞单层的完整性、极性、通透性。结果:经过21 d培养,24孔Transwell培养的细胞单层的完整性、极性高于12孔Transwell培养的细胞单层,而透过性低于12孔Transwell培养的细胞单层;包被鼠尾胶原蛋白的Transwell于细胞单层生长前期跨上皮细胞电阻值(transepithelium electrical resistance,TEER)迅速升高,对细胞单层生长的中后期无显著性影响。结论:3种Transwell均可成功培养Caco-2细胞单层,24孔站立式Transwell适用于样品需求量少、检测灵敏度高的物质,可应用于大量样品的高通量筛选;12孔悬挂式Transwell提供检测的样品量和透过率较大,适于实验室的常规操作和常用仪器的样品需求。
- 马博孙桂波杨志宏李明孙晓波
- 关键词：CACO-2细胞碱性磷酸酶
- 木犀草苷对阿霉素诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用被引量：31
- 2012年
- 目的观察木犀草苷(luteoloside)对阿霉素(adriamy-cin,ADR)诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法采用新生SD大鼠乳鼠,差数分离提取心肌细胞,建立ADR心肌细胞损伤模型,培养48 h后随机分为正常对照组、ADR模型组、木犀草苷与ADR同时给药(12.5、6.25和3.125 mg.L-1)各剂量组及木犀草苷预孵育4 h后,与ADR同时给药(12.5、6.25、3.125 mg.L-1)各剂量组。观察木犀草苷对ADR诱导心肌细胞损伤的量效、时效关系,采用MTT法检测细胞活力、试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果与正常对照组相比,模型组细胞存活率降低、细胞内LDH含量降低,漏出量增加、SOD活性降低及细胞上清液中MDA含量增多。与模型组相比,木犀草苷各处理组心肌细胞存活率均明显增加(P<0.05);木犀草苷与ADR同时给药12.5、6.25 mg.L-1组(P<0.05)能明显降低LDH漏出量、增强SOD活力、降低细胞上清中MDA含量;预孵育4 h后,与ADR同时给药各剂量组均能明显降低LDH漏出量(P<0.05)、增强SOD活力、降低MDA含量(P<0.01)。结论木犀草苷对ADR所致的心肌损伤有明显保护作用;且预孵育4 h后对心肌细胞的保护作用优于未孵育组,其初步作用机制可能与抗自由基、减轻脂质过氧化作用有关。
- 何玲孙桂波孙潇孙静孙晓波
- 关键词：木犀草苷心肌细胞阿霉素LDHMDASOD
- 钩藤碱微透析探针回收率测定及影响因素研究被引量：6
- 2012年
- 目的:考察体内外微透析探针回收率的稳定性和重现性,为进一步的体内微透析试验提供依据。方法:采用增量法和减量法考察浓度、流速对探针回收率的影响。结果:微透析探针回收率受流速影响较大,基本不受浓度影响,且体内回收率稳定性良好。结论:微透析技术可用于钩藤碱的体内药代动力学研究,反透析法可作为体内研究钩藤碱探针回收率的测定方法。
- 马博孙桂波李明孙晓波
- 关键词：微透析钩藤碱
