重庆市自然科学基金(2007BA5008)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- siRNA干扰UGT1A1基因表达对结直肠癌细胞CPT-11化疗敏感性的影响
- 2009年
- 目的:研究siRNA干扰UGT1A1基因表达对HT-29细胞CPT-11化疗敏感性的影响。方法:realtime PCR,western blot方法检测UGT1A1 mRNA和蛋白表达。采用四甲基偶氮唑蓝显色法(MTT)观察HT-29细胞对CPT-11化疗敏感性的影响。结果:UGT1A1-siRNA可显著抑制HT-29细胞中UGT1A1 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。Con组与MOCK组IC50值分别为25.13和24.87,干扰组IC50值为12.23(P<0.05,VSCon或MOCK组)。结论:转染UGT1A1-siRNA可显着增加结直肠癌HT-29细胞对CPT-11化疗的敏感性。
- 解方为李建军梁后杰
- 关键词：结直肠癌耐药
- 结直肠癌细胞CES2表达对CPT-11化疗敏感性的影响
- 2009年
- 目的:研究异常甲基化在调控结直肠癌细胞中CES2基因表达中的作用,并观察结直肠癌细胞内CES2表达与化疗敏感性的关系。方法:采用MSP检测八种结直肠癌细胞系中CES2基因启动子甲基化;荧光定量PCR和westernblot方法检测DAC去甲基化后CES2 mRNA及蛋白表达变化;采用MTT法,检测各型结肠癌细胞株对伊利替康的细胞毒性,计算IC50并分析其与CES2 mRNA表达的相关性。结果:CES2基因启动子在八种结直肠细胞株中均呈未甲基化状态,使用DAC处理后,CES2在其低表达的细胞株无明显增加,不同结直肠癌细胞株对CPT-11敏感性存在差异(P<0.05),其中LoVo细胞对CPT-11敏感性最低,RKO细胞对CPT-11的敏感性最高。结直肠细胞株内CES2表达与IC50呈负相关性(r=-0.58651,P<0.01)。结论:甲基化不参与调控CES2基因的表达,CES2表达与CPT-11细胞毒性呈正相关。
- 解方为李建军梁后杰
- 关键词：结直肠癌DNA甲基化羧酸酯酶
- BNIP3表达对结肠癌细胞化疗敏感性的影响被引量：2
- 2009年
- 目的研究启动子甲基化对人结肠癌SW480细胞BNIP3基因的转录调控作用,以及通过去甲基化作用恢复BNIP3表达对细胞化疗敏感性的影响。方法用DNA甲基转移酶抑制剂5-氮-2′-脱氧胞苷(5-aza-dC)处理SW480细胞72h,应用甲基化特异性PCR(MSP)检测BNIP3基因启动子区CpG岛甲基化状态。用RT-PCR和Western blotting检测BNIP3的mRNA和蛋白表达,流式细胞术分析细胞凋亡,MTT法观察化疗药物氟尿嘧啶(5-FU)和奥沙利铂(L-OHP)对细胞的增殖抑制作用。结果BNIP3基因在SW480细胞中表达沉默,基因启动子区存在异常甲基化。1.0μmol/L的5-aza-dC可以使BNIP3基因启动子明显去甲基化、BNIP3表达和细胞凋亡增加,并可以与5-FU和L-OHP发挥协同作用,使药物对细胞的增殖抑制作用显著增强。5-aza-dC的上述作用在低氧培养条件下更加显著。结论启动子甲基化是导致结肠癌SW480细胞BNIP3基因表达沉默的重要原因。5-aza-dC可通过去甲基化作用恢复BNIP3基因的表达,增加细胞对5-FU和L-OHP的敏感性,且其作用在低氧条件下更加显著。
- 裴莉解方为陈克力江恒陈建芳梁后杰
- 关键词：结肠肿瘤DNA甲基化抗肿瘤联合化疗方案细胞低氧
