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三种组织块法培养人牙周膜细胞的比较研究被引量：6: 2010年; 目的提高人牙周膜细胞(Human periodontal ligament cells,HPDLCs)原代培养的成功率,并缩短培养周期。方法以高血清培养基组织块法、传统组织块法和玻片覆盖组织块法等3种方法原代培养HPDLCs。通过镜下观察细胞形态,免疫组化方法鉴定细胞来源,及绘制细胞生长曲线等方面,对各种方法的成功率进行比较。结果 3种方法所培养的原代细胞均生长良好,呈梭形,波形丝蛋白和碱性磷酸酶染色阳性、角蛋白染色阴性,符合HPDLCs的形态和生物学特征。高血清培养基组织块法的原代培养的成功率为84.21%,明显高于其他2种方法 (P<0.01)。结论高血清培养基组织块法能显著提高HPDLCs原代培养的成功率。; 马佳音胥春郝轶张富强; 关键词：原代培养牙周组织人牙周膜细胞

Bcl-2和Bax在牵张应变诱导HPDLCs凋亡中的表达研究被引量：3: 2010年; 目的:研究牵张应变诱导人牙周膜细胞(HPDLCs)凋亡过程中细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达变化情况。方法:体外培养HPDLCs,利用动态机械应变细胞加载装置对HPDLCs加载20%动态牵张应变24h,通过real-time PCR检测Bcl-2和Bax在mRNA水平上的表达差异。结果:HPDLCs加载后,呈现栅栏状相互平行排列趋势,排列方向垂直于牵张力方向。Bcl-2和Bax基因表达显著增加,Bcl-2/Bax比值显著下降,有明显统计学意义(P<0.05)。结论:牵张应变诱导人牙周膜细胞凋亡过程中,Bcl-2家族起到了重要作用。; 郝轶胥春魏斌马佳音李隽张富强; 关键词：BCL-2 BAX 人牙周膜细胞

动态牵张应变对人牙周膜细胞的细胞骨架的影响被引量：8: 2012年; 目的研究动态牵张应变下人牙周膜细胞(HPDLCs)细胞骨架的变化。方法体外培养HPDLCs,利用动态牵张应变细胞加载装置对HPDLCs分别加载1%、10%和20%的牵张应变,每种应变分别加载7个时间段(0.5、1、2、4、6、12、24 h),应用激光共聚焦显微镜观察HPDLCs细胞骨架的形态结构;收集图像并运用Image-Pro Plus 4.5.0.29软件进行分析,测定HPDLCs的面积、长度与宽度比(长宽比)以及细胞骨架蛋白F-actin的积分荧光强度。结果激光共聚焦显微镜观察发现:随着加载牵张应变的作用时间延长和应变值提高,HPDLCs细胞逐渐呈现栅栏状相互平行排列趋势,且排列方向垂直于牵张力方向,胞体被拉长。图像分析结果显示:加载动态牵张应变后,HPDLCs的细胞面积、长宽比及F-actin的表达量均发生相应的变化。结论动态牵张应变可引起HPDLCs细胞骨架的变化,并且与施加应变的大小和应变作用时间有关。; 马佳音胥春郝轶张富强; 关键词：人牙周膜细胞细胞骨架

牵张应变作用下人牙周膜细胞形态及钙离子浓度变化的实验研究被引量：3: 2009年; 目的:观察机械牵张应变作用下,人牙周膜细胞(HPDLCs)形态及游离Ca2+浓度的变化。方法:通过原代和传代培养获得性状稳定的人牙周膜细胞,使用动态机械应变细胞加载仪对细胞进行1%、10%和20%动态牵张应变加载,并加载不同时间,通过流式细胞仪对细胞进行Ca2+浓度的检测。应用SPSS13.0软件对数据进行方差分析。结果:细胞内游离Ca2+浓度随牵张应变时间的延长逐渐升高,至60min时达到该组的峰值(P<0.01);以后随加载时间的延长逐渐下降,120min时降至对照组水平(P>0.05)。结论:牵张应变可以引起细胞形态的改变和细胞内游离Ca2+浓度的变化。; 李隽胥春郝轶张富强; 关键词：人牙周膜细胞游离钙离子

牵张应变对人牙周膜细胞内磷脂酶C-γ1水平的影响被引量：1: 2012年; 目的:观察在机械牵张应变作用下,人牙周膜细胞(HPDLCs)内磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)水平的变化。方法:通过原代和传代培养,获得性状稳定的HPDLCs,使用动态机械应变细胞加载仪对细胞进行1%、10%和20%动态牵张应变加载。加载于不同的时间段,通过流式细胞仪和激光扫描共聚焦显微镜对细胞进行PLC-γ1水平的检测。应用SPSS 13.0软件对数据进行方差分析。结果:使用流式细胞仪对细胞内PLC-γ1水平检测发现:加载初期,细胞内的PLC-γ1水平维持在较低水平,随着牵张应变加载时间的延长,牙周膜细胞内PLC-γ1水平逐渐升高。50 min时PLC-γ1水平达到了各个应变组的最高值(P<0.01)。随着加载时间的继续延长,60 min时各应变组的PLC-γ1水平都有所下降(P<0.01)。激光扫描共聚焦显微镜检测发现:对照组和动态加载组都有PLC-γ1的表达,但加载50 min组表达相对较强。结论:机械牵张应变可以引起HPDLCs内PLC-γ1水平的变化。; 李隽胥春郝轶刘晓峰; 关键词：人牙周膜细胞磷脂酶C-Γ1

人牙周膜成纤维细胞的培养及牵张应变诱导凋亡研究被引量：3: 2012年; 目的:探讨人牙周膜成纤维细胞的分离、培养及在牵张应变作用下发生早期凋亡的情况。方法:刮取健康人前磨牙牙周膜,进行牙周膜成纤维细胞的分离、培养及生长曲线描绘。经3～4代传代培养后,对细胞加载1%～20%的牵张应变,加载时间分别为30min,1h、6h、12h然后通过流式细胞仪检测Annexin V-FITC(异硫氰酸荧光素)及激光扫描共聚焦显微镜进行细胞的早期凋亡鉴定。结果:人牙周膜成纤维细胞传代到12代以后,细胞逐渐呈衰老生状,胞体变大,细胞生长缓慢。人牙周膜成纤维细胞的凋亡率在30min组低于对照组,但两者间无统计学差异。在6h内,人牙周膜成纤维细胞的凋亡情况随加载时间和加载应力的增加而增加(P<0.05)。在12h时所有组的细胞凋亡均减少。结论:人牙周膜成纤维细胞的使用最好在12代以内,尤其是3～4代细胞的活力、增殖能力较好。牵张应变可以诱导细胞发生早期凋亡。; 仲维广邓芳成胥春纪舒昱张富强

牵张应变作用下人牙周膜细胞内磷脂酶C-γ1水平的变化被引量：3: 2011年; 目的:观察机械牵张应变作用下,人牙周膜细胞(HPDLCs)内磷脂酶C-γ1(PLC-γ1)水平的变化。方法:通过原代和传代培养,获得性状稳定的人牙周膜细胞,使用动态机械应变细胞加载仪对细胞进行1%、10%和20%动态牵张应变加载。加载不同时间,通过流式细胞仪对细胞进行PLC-γ1水平检测。采用SPSS13.0软件包对数据进行方差分析。结果:在加载牵张应变初期,细胞内的PLC-γ1水平维持较低水平;随着牵张应变加载时间的延长,牙周膜细胞内的PLC-γ1水平逐渐升高。50min时,PLC-γ1水平达到各应变组的最高值(P<0.01)。随着加载时间的继续延长,60min时,各应变组的PLC-γ1水平都显著下降(P<0.01)。结论:牵张应变可引起细胞内PLC-γ1水平的变化。; 李隽胥春郝轶刘晓峰; 关键词：人牙周膜细胞磷脂酶C-Γ1

机械牵张应变对人牙周膜细胞内游离钙离子浓度的影响被引量：5: 2007年; 目的:观察机械牵张应变作用下,人牙周膜细胞(HPDLCs)内游离Ca2+浓度的变化。方法:体外培养HPDLCs,利用动态机械应变细胞加载装置,对1%、10%和20%应变组的细胞分别进行30、60和120min的动态牵张加载,通过流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测细胞内游离Ca2+浓度的变化,并应用SPSS13.0软件包对数据进行方差分析。结果:当HPDLCs加载30min时,各组检测到的胞内游离Ca2+浓度与对照组无显著差异(P>0.05);60min时,各个应变组的胞内Ca2+浓度明显升高,与对照组相比均有非常显著的差异(P<0.01);加载时间延长到120min时,各组Ca2+浓度又降至对照组水平(P>0.05)。结论:机械牵张应变可通过钙离子信号系统影响HPDLCs的生物学活性。; 李隽胥春郝轶张富强; 关键词：人牙周膜细胞游离钙离子

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上海市自然科学基金(07ZR14070)

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