国家自然科学基金(3067336)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 过量表达AtNHXS1新基因提高烟草耐盐性的研究
- 2011年
- 拟南芥液泡膜上的Na+/H+逆向转运蛋白是由AtNHX1基因编码的一种重要的植物耐盐性因子。AtNHXS1是利用DNA改组(DNA shuffling)技术对AtNHX1基因进行定向分子进化获得的新基因。利用农杆菌介导的叶盘法将该基因转入烟草中,经过潮霉素和PCR鉴定,得到了10个独立的转基因株系。对其中两个PCR阳性株系进行Southern blot鉴定,确定AtNHXS1以单拷贝的形式成功地插入到烟草的基因组中。荧光定量PCR分析表明,AtNHXS1基因可以利用烟草的转录体系正确转录。在盐处理下,随着盐浓度的提高,植株不同组织部位AtNHXS1基因的表达均有不同程度的提高,其中叶片上调趋势最明显。耐盐性试验结果表明,盐处理下,转基因烟草的长势明显优于野生型。400 mmol/L NaCl处理下,野生型烟草完全死亡,转基因烟草生长受到抑制,但是仍然能够正常生长。研究结果表明,AtNHXS1新基因能够显著提高烟草的耐盐性。
- 黑倩徐源郭力榕黄继斌张辉夏涛
- 关键词：烟草DNA改组技术耐盐性
- 过量表达AtNHXS1新基因显著提高水稻的耐盐性被引量：4
- 2012年
- 以转基因和野生型水稻为材料,通过农杆菌介导法将AtNHXS1转到水稻植株中花11号中,分析在盐胁迫下Na+、K+含量的变化,对两者耐盐性进行比较,并对转基因株系进行分子鉴定和转录表达分析。结果表明:PCR初步鉴定得到了20个转基因株系,随机挑选2个PCR阳性株系进行Southern blot鉴定,确定AtNHXS1以单拷贝的形式成功插入到水稻基因组中。耐盐性分析表明,在盐胁迫条件下,转基因水稻植株的生长状况、干质量、鲜质量、Na+含量显著优于或高于野生型水稻植株;此外,300mmol/L NaCl处理下,转基因水稻植株能够正常存活,而野生型水稻5d内几乎全部死亡。将300mmol/L NaCl处理过的植株在无盐胁迫的条件下进行恢复生长试验,转基因植株10d内恢复正常,而野生型则不能。过量表达改组后的AtNHXS1新基因显著提高了水稻的耐盐性。
- 黑倩张辉黄继斌郭力榕徐源李建粤夏涛
- 关键词：DNA改组技术转基因水稻耐盐性盐胁迫
