长江学者和创新团队发展计划(IRT0631)
- 作品数：9 被引量：61H指数：4
- 相关作者：刘嘉茵崔毓桂刁飞扬薛凯赵考考更多>>
- 相关机构：江苏省人民医院济宁市第一人民医院江苏省计划生育科学技术研究所更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划江苏省自然科学基金江苏省科技厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 体外受精-胚胎移植前检测宫颈分泌物支原体及衣原体意义的探讨被引量：13
- 2012年
- 目的:分析体外授精/单精子卵胞浆内显微注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)前解脲支原体(UU)和沙眼衣原体(CT)感染与妊娠结局的关系。探讨IVF/ICSI-ET前常规检测宫颈分泌物UU和CT的临床意义。方法:回顾性分析2008年1-12月首次在该中心行IVF/ICSI-ET,术前进行宫颈分泌物UU和CT检测的患者共1 802例,根据UU和CT检测结果,将患者分为UU和CT均阴性、UU阳性、CT阳性3组,比较各组间受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、种植率、异位妊娠发生率和流产率有无差异以及CT或UU感染与不孕类型、是否存在盆腔因素病因、阴道清洁度、对移植操作的影响等关系。结果:不孕患者IVF/ICSI-ET治疗时UU感染患者的妊娠结局未受到影响.CT感染对妊娠结局有负面影响。结论:对于无症状的UU感染患者IVF术前不必要投入大量抗生素治疗,对于CT感染者建议治愈后进行胚胎移植。
- 孟艳王媁刘嘉茵
- 关键词：体外受精胚胎移植解脲支原体沙眼衣原体
- 热休克蛋白10的研究进展被引量：8
- 2011年
- 热休克蛋白(HSPs)是一类广泛存在于生物体内、生物进化高度保守、在生理和应激条件下均能表达的蛋白质家族。HSP10是该家族中的重要成员之一,广泛存在于哺乳动物的很多组织中,如骨髓、卵巢、前列腺、肝脏等。在正常细胞中,主要存在于线粒体和细胞质中。在这些组织细胞中HSP10针对不同的刺激信号,与不同辅助因子相互作用后激活或抑制下游基因的表达。近年来的研究表明,HSP10不仅参与蛋白折叠,还与细胞增殖凋亡、炎性免疫、生殖等相关。
- 赵考考崔毓桂刘嘉茵
- 关键词：热休克蛋白10细胞增殖细胞凋亡免疫生殖
- 双酚A对人子宫内膜基质细胞增殖及雌/雄激素受体表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察双酚A对人子宫内膜基质细胞(hESCs)增殖和雌/雄激素受体(ERα/AR)表达的影响。方法体外培养hESCs,在6孔板贴壁达70%～80%后鉴定细胞纯度。采用无血清培养同步化,然后给予不同浓度的双酚A(0、10-8、10-6、10-4mol/L)处理48 h。Trizol裂解细胞提取总RNA,实时荧光定量PCR法测定基质细胞ERα和AR mRNA表达水平;采用流式细胞技术测定细胞周期。结果本文纯化培养方法得到的hESCs,波形蛋白染色阳性率达95%。10-6、10-4mol/L的双酚A对基质细胞增殖周期有抑制作用。10-4mol/L的双酚A使基质细胞ERαmRNA表达显著升高(P<0.05);10-6、10-4mol/L的双酚A也显著升高AR mRNA的表达水平(P<0.05);但是,10-8mol/L的双酚A则有抑制ERα/AR mRNA表达的趋势(P>0.05)。结论低剂量双酚A抑制人子宫内膜ERα/AR表达,而高浓度双酚A则升高ERα/AR表达,进而影响子宫内膜的功能。
- 秦定霞李瑛刘晓慧钱晓乔蔡瑞芬崔毓桂刘嘉茵
- 关键词：双酚A雌激素受体Α雄激素受体
- 雄激素诱导小鼠颗粒细胞凋亡及其机制探讨被引量：7
- 2011年
- 目的通过睾酮诱导小鼠颗粒细胞凋亡,观察热休克蛋白(HSP)10在高雄激素下的表达,探讨HSP10在高雄激素诱导颗粒细胞凋亡中的作用。方法原代培养小鼠颗粒细胞,用0、10-8M、10-6M、10-5M睾酮处理24h,检测HSP10基因表达;处理48h,检测细胞活力及活性Caspase-3的表达。用AdCMV-H1-siRNA/HSP10腺病毒在小鼠颗粒细胞中干涉HSP10的表达,MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,并检测Ki67、Bcl-2、Bax基因水平变化。结果与0M睾酮处理组比较,10-6M、10-5M睾酮处理组颗粒细胞的细胞活力降低,且Caspase-3表达增加,HSP10表达降低(P<0.05);感染AdCMV-H1-siRNA/HSP10腺病毒后,颗粒细胞的细胞活力降低,且细胞增殖阻滞在G2期,Bcl-2、Ki67表达降低而Bax表达增加(P<0.05)。结论高雄激素可诱导小鼠颗粒细胞凋亡。其可能的机制是睾酮能降低HSP10表达,经由降低Bcl-2和增加Bax表达的通路。
- 赵考考高莉薛凯董丽刁飞扬崔毓桂刘嘉茵
- 关键词：睾酮热休克蛋白10颗粒细胞凋亡
- 双酚A对生殖系统的影响及其作用机制被引量：29
- 2010年
- 双酚A(Bisphenol A,BPA)是酚类环境雌激素中的一种,人群暴露剂量的BPA会对机体产生一定的影响,主要包括生殖系统、胚胎发育、中枢神经系统、肿瘤的发生等。而对生殖系统的研究尤为广泛,BPA可引起雄性哺乳动物性腺发育不良、精子数量减少等,引起雌性哺乳动物阴道、子宫、卵巢等形态及功能上的改变。BPA对生殖系统影响的机制多样化,可能通过以下几个途径发挥作用:雌激素核受体及膜受体、雌激素相关受体、下丘脑-垂体-性腺轴等。综述双酚A对生殖系统的影响及其可能的作用机制。
- 秦定霞崔毓桂刘嘉茵
- 关键词：双酚A生殖系统雌激素受体非基因组效应
- 小鼠热休克蛋白10(HSP10)基因腺病毒载体的构建及在卵泡中的表达
- 2009年
- 目的:构建小鼠热休克蛋白(heat shock protein 10,HSP10)基因重组腺病毒载体,为更好地研究HSP10蛋白在PCOS发病中的作用。方法:用RT-PCR的方法从小鼠卵巢组织中扩增HSP10基因全长,经T/A克隆后,亚克隆至AdEasy腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV上,构建穿梭质粒pAdTrack-HSP10。PmeI酶切pAdtrack-HSP10,然后分别将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1和穿梭质粒pAdtrack-HSP10转化至BJ-5183感受态细菌中进行同源重组。PacI酶切线性化重组质粒AdCMV-HSP10后转染AD-293细胞进行病毒包装和扩增。通过GFP报告基因观察重组病毒的产生。用获得的重组腺病毒感染小鼠卵泡,Western blotting方法检测HSP10基因的表达。结果:从小鼠卵巢组织中扩增出309bp的cDNA,PCR和测序分析证实为小鼠HSP10基因。构建的小鼠HSP10基因的重组腺病毒载体,PacI酶切重组质粒见30000bp和4500bp的特征性条带。制备出高滴度重组腺病毒,病毒上清PCR反应同样扩出309bp的目的条带。分离并培养小鼠卵泡,感染重组的腺病毒,Western blotting检测到显著的HSP10条带。结论:本文成功构建了小鼠HSP10基因重组腺病毒载体,并且在小鼠卵泡中有效表达。
- 凌静李梅马翔薛凯刁飞扬崔毓桂刘嘉茵
- 关键词：腺病毒载体
- ABCG2蛋白及其在干细胞与肿瘤化疗耐药中的作用
- 2009年
- 三磷酸腺苷结合盒超家族G成员2（ABCG2）基因定位于4q22，以同源二聚体形式执行完整转运功能，在保护细胞及机体免受各种内外源物质伤害等方面起着重要作用，其功能发挥受自身结构、机体微环境及性激素等多种因素的影响。它参与了侧群（SP）干细胞表型形成，还与肿瘤的化疗耐药及肿瘤的发生密切相关。
- 徐静崔毓桂刘嘉茵
- 关键词：ATP结合匣式转运子干细胞肿瘤抗药性
- 小鼠NR4A1基因小分子干扰RNA重组腺病毒载体的构建与鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的:构建表达小鼠NR4A1基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺病毒载体。方法:根据siRNA靶序列设计并合成2条互补的64bp寡核苷酸。pShuttle-H1穿梭质粒经BglⅡ、HindⅢ双酶切后,与退火的寡核苷酸进行连接,构建穿梭质粒pShuttle-H1-siRNA。PmeⅠ酶切pShuttle-H1-siRNA,然后分别将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1和穿梭质粒pShuttle-H1-siRNA转化至BJ-5183感受态细菌中进行同源重组。PacⅠ酶切线性化重组质粒pAdEasy-H1-siRNA后转染AD-293细胞进行病毒包装和扩增。Westernblot检测NR4A1基因的表达。结果:穿梭质粒pShuttle-H1-siRNA经双酶切和测序证实构建成功,进一步构建了表达小鼠NR4A1基因的siRNA重组腺病毒载体,重组腺病毒AdH1-siRNA/NR4A1感染小鼠睾丸间质细胞瘤细胞(MLTC-1)后显著抑制目的蛋白表达(抑制率为70%～90%)。结论:成功构建了表达小鼠NR4A1基因的siRNA重组腺病毒载体AdH1-siRNA/NR4A1,并在MLTC-1中验证其抑制NR4A1蛋白表达,为进一步研究NR4A1基因在多囊卵巢综合征(PCOS)中的作用奠定了基础。
- 薛凯李梅刁飞扬凌静崔毓桂刘嘉茵
- 关键词：RNA干扰重组腺病毒载体多囊卵巢综合征
- 人SET基因重组腺病毒载体在小鼠颗粒细胞的表达
- 2010年
- 目的以原代培养的小鼠卵巢颗粒细胞为模型,观察人SET基因重组腺病毒载体在卵巢颗粒细胞的感染效率和基因表达效果。方法分离并培养小鼠颗粒细胞。扩增人SET基因重组腺病毒载体AdCMV-SET和对照重组腺病毒载体AdCMV,感染原代培养的小鼠颗粒细胞,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)检测感染效率;qRT-PCR方法检测SETmRNA表达;Western blot方法检测SET蛋白的表达水平。结果获得的重组腺病毒载体体外感染小鼠颗粒细胞,24h观察到GFP表达。与AdCMV感染组相比,AdCMV-SET感染组SETmRNA表达水平显著增高(P<0.05)。与空白对照组(Mock)及感染AdCMV组相比,AdCMV-SET感染组SET蛋白水平显著增高(P<0.05)。结论构建的人SET基因重组腺病毒载体能高效感染小鼠颗粒细胞、并有效表达,对细胞活率无影响。
- 许波群薛凯赵考考李梅马翔刁飞扬崔毓桂刘嘉茵
- 关键词：腺病毒载体
