国家自然科学基金(30371450)
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 相关作者：史占军管明强杨澜波李朋王健更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 三种裸鼠主动脉血管内皮细胞原代培养方法的比较被引量：2
- 2012年
- 目的探索分离、培养裸鼠主动脉血管内皮细胞的有效方法。方法在无菌条件下从背部入路取得裸鼠的主动脉,分别通过贴壁消化法、动脉环法和植块法进行裸鼠主动脉内皮细胞的原代培养。经胰酶消化传代后,采用免疫细胞化学法鉴定血管内皮细胞标志分子Ⅷ因子在细胞中的表达情况。结果内壁贴壁消化法于培养后的5d后可见明显内皮细胞集落,约7～9 d后细胞汇合。其他两种方法细胞爬出出现较晚。内壁贴壁消化法和动脉环法内皮细胞标志物Ⅷ因子表达阳性率分别达98%和82%,而植块法只有58%。结论裸鼠主动脉内壁贴壁消化法和动脉环法操作性较强,可获取一定数量纯度较高的主动脉血管内皮细胞。
- 杨澜波黄涛史占军
- 关键词：血管内皮细胞裸鼠原代培养
- 人骨肉瘤细胞特异性结合肽的筛选及验证被引量：3
- 2012年
- 目的获得人骨肉瘤细胞MG63特异性结合肽,为骨肉瘤靶向治疗奠定基础。方法应用噬菌体展示技术,以人骨肉瘤细胞作为靶细胞,293T细胞为差减细胞,筛选获得MG-63细胞特异性结合肽。酶联免疫法进行靶向性验证。应用荧光染色技术初步探讨短肽细胞受体位置。制作人骨肉瘤模型,尾静脉注射目标噬菌体,免疫组化检测其靶向性。结果经过四轮一步有机相离心分离方法,获得了与骨肉瘤细胞特异性结合的短肽,并测序获得其中出现次数最多的序列SLTNLSK,靶向验证结果显示该短肽有较强的特异性。结论应用噬菌体展示技术,获得了与人骨肉瘤细胞特异性结合的短肽,序列为SLTNLSK,并验证了其靶向性。可以作为骨肉瘤靶向治疗的导向性化合物。
- 卢坤姜勇管明强肖军王健李郅涵史占军
- 关键词：骨肉瘤靶向治疗噬菌体展示技术结合肽
- 骨肉瘤动物模型研究进展被引量：3
- 2009年
- 杨澜波史占军
- 关键词：骨肉瘤疾病模型动物
- 骨肉瘤荷瘤裸鼠模型两种不同制作方法的比较被引量：4
- 2008年
- 目的比较腋下移植与原位移植两种骨肉瘤荷瘤裸鼠模型制作方法在成瘤率、成瘤时间、瘤体生长变化,特别是肺部转移情况的差别。方法将骨肉瘤细胞分别接种到裸鼠左侧腋下及裸鼠股骨髓腔,6周后处死裸鼠,肉眼及光镜下观察两组肿瘤的肺部转移情况,比较两组肿瘤肺部转移率及转移灶的不同特点。结果与原位接种方式相比,腋下接种方式操作简单、成瘤快,肿瘤组织表面容易较早发生摩擦破损(P<0.05),肿瘤内部也较早发生缺血坏死现象(P<0.05),在相同接种时间下,腋下接种组裸鼠肺部肿瘤转移率低(P<0.05),发生肺部转移时,转移灶也较为稀疏(P<0.05),体积较小。原位移植则能够很好地模拟骨肉瘤本来的生长环境,在接种时间时相同,具有肿瘤缺血坏死现象少、肺部转移率高、转移灶密集、转移灶体积较大等优点,但该方法操作步骤相对复杂。结论两种裸鼠模型制作方法均具有较高的成瘤率,但在制作骨肉瘤肺部转移模型方面原位移植裸鼠模型制作方法明显优于腋下移植裸鼠模型制作方法,且原位移植形成的肿瘤表面摩擦破损及内部缺血的坏死发生也相对较晚。
- 管明强史占军李鹏杨澜波
- 关键词：骨肉瘤裸鼠原位移植
- 靶向短肽介导的肿瘤抑素活性T3片段对骨肉瘤的疗效被引量：1
- 2011年
- 目的探讨靶向短肽介导的肿瘤抑素（tumstatin）活性T3片段对骨肉瘤裸鼠皮下移植瘤的抑瘤效果。方法人工合成肿瘤抑素活性T3片段并加载对骨肉瘤血管有靶向结合能力的7肽。在体外，通过细胞凋亡抑制（MTS）法、细胞迁移抑制实验检测该活性肽对人脐静脉血管内皮细胞的抑制作用。体内实验，选取裸鼠50只，制备荷骨肉瘤裸鼠模型，剔除瘤体较大或较小的裸鼠，将剩余荷瘤裸鼠分为4组，每组6只，分别给予T3肽、靶向-T3肽、化疗药物（CTX）及磷酸盐缓冲液（PBS）干预治疗。治疗完成后完全剥离肿瘤称重，并进行肿瘤组织免疫组化染色、裸鼠肺组织HE染色，以分析靶向-T3肽对骨肉瘤血管生成及侵袭力的抑制效果。结果体外环境下，T3肽及靶向-T3肽均有效抑制人脐静脉血管内皮细胞的增殖。体内实验，靶向-T3肽组平均瘤重（1．104±0．247）g，其肿瘤抑制率为46．9％；T3肽组平均瘤重（1．484±0．369）g，其肿瘤抑制率为28．6％；各治疗组间肿瘤重量比较，差异有统计学意义（F=16．353，P=0．000）。病理切片免疫组化结果显示，靶向-T3肽能明显减少与肿瘤血管生长相关的血管内皮生长因子的表达，降低肿瘤的侵袭能力，其效果优于T3肽。结论靶向短肽介导的肿瘤抑素活性T3片段具有较强的骨肉瘤抑制能力，能够有效地富集在骨肉瘤血管内皮，具有低毒高效的治疗作用。
- 赵赞栋史占军杨澜波管明强李朋肖军王健
- 关键词：骨肉瘤肿瘤抑制蛋白质类血管内皮生长因子类
- 骨肉瘤血管内皮细胞特异性结合短肽的体内功能验证被引量：3
- 2010年
- 目的验证骨肉瘤血管内皮细胞（osteosarcoma—associated vascular endothelial cells，OAVECs）特异性结合肽（TKPDKGY）对荷瘤裸鼠模型体内OAVECs的亲和性。方法合成短肽（TKPD—KGY）并在其N端加载一个异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate，FITC），纯化后将短肽荧光复合物注入荷瘤裸鼠血管内，通过小动物整体荧光成像来观察短肽在活体动物内的分布，同时定时处死裸鼠，切取重要器官和肿瘤制冰冻切片，使用激光共聚焦显微镜扫描来评价短肽在体内与OAVECs的亲和性。结果小动物整体荧光成像显示荷瘤裸鼠注射FITC-TKPDKGY 10min后，肿瘤处即可见微弱荧光富集，30min时显示明显并逐渐增强，1h后达最强，4h后逐渐消退，至24h基本无荧光残留。激光共聚焦扫描可见肿瘤血管和血管丛荧光强度较强，肿瘤组织仅见少量短肽结合，可提示有一定的结合性。心、脑、肺和肝组织显示并不明显。肾脏镜下可见肾血管并无荧光显像，但肾小球和肾小管部可见荧光富集，提示短肽在此代谢。结论TKPDKGY对目标细胞有良好的靶向性，为短肽进一步结合效应分子应用于骨肉瘤的诊断和治疗奠定一定的实验基础。
- 杨澜波史占军管明强李朋赵赞栋王健肖军
- 关键词：骨肉瘤内皮细胞C肽
- 体内筛选骨肉瘤血管内皮特异性结合肽被引量：4
- 2009年
- 体内噬菌体技术则将噬菌体展示技术与动物模型相结合，可以更好地进行肿瘤组织特异性结合肽的筛选。Pasqualini等和Wadih等利用该方法筛选出了特异结合脑和肾的噬菌体克隆，1997年他们成功筛选到一条恶性黑色素瘤及乳腺癌上整合蛋白的特异性亲和短肽，把该肽与化疗药物耦联后进行动物实验，收到了很好的抗肿瘤效果。本研究首先制作骨肉瘤原位荷瘤裸鼠模型，然后利用体内噬菌体技术，筛选骨肉瘤血管内皮的特异性结合肽。
- 管明强史占军姜勇李朋杨澜波
- 关键词：特异性结合肽血管内皮骨肉瘤噬菌体展示技术荷瘤裸鼠模型抗肿瘤效果
- 靶向短肽介导的肿瘤抑素活性T3片段对骨肉瘤的疗效
- [目的]探讨靶向短肽介导的肿瘤抑素(tumstatin)活性T3片段对骨肉瘤裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。[方法]人工合成肿瘤抑素T3片段并加载对骨肉瘤血管有靶向结合能力的七肽。在体外,通过MTS法、细胞迁徙抑制实验检测该活...
- 赵赞栋史占军管明强李朋杨湖波肖军王健
- 关键词：骨肉瘤肿瘤抑素
- 文献传递
- 噬菌体展示技术应用于肿瘤的研究进展
- 2009年
- 管明强史占军
- 关键词：噬菌体展示技术噬菌体肽库肿瘤表面蛋白DNA片段基因重组
