国家自然科学基金(81101736)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：刘辉张永生涂艳阳李刚付华林更多>>
- 相关机构：第四军医大学唐都医院西安医学院上海交通大学更多>>
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- MicroRNA．218通过靶向多梳家族Bmil基因抑制胶质瘤的侵袭、迁移、增殖和肿瘤干细胞样细胞的自我更新被引量：1
- 2014年
- 目的：探讨microRNA-218抑制胶质瘤侵袭、迁移、增殖和抑制肿瘤干细胞样细胞自我更新的分子机制．方法：在胶质瘤细胞中过表达miR-218，利用定量逆转录PCR（qRT-PCR）和免疫印迹法（Westernblotting）检测Bmil的表达水平，并利用创伤修复和体外迁移实验检测胶质瘤细胞的迁移和增殖能力；通过裸鼠移植瘤实验，检测体内过表达miR-218对胶质瘤生长的影响；利用生物信息学手段预测miR-218的直接靶标，并通过qRT—PCR、蛋白质印记技术、荧光素酶报告系统和免疫荧光实验对预测的靶标基因进行验证；以胶质瘤细胞球形成实验和极限稀释法验证miR-218对胶质瘤干细胞样细胞自我更新能力的影响；构建Broil干扰载体下调胶质瘤细胞中Bmil的表达，检测对胶质瘤迁移和增殖的影响；利用基因表达芯片分析胶质瘤细胞中miR-218对基因表达的影响．结果：Bmil是miR-218的一个直接靶标，miR-218通过下调Broil的表达来削弱胶质瘤细胞的迁移和增殖能力，并抑制胶质瘤干细胞样细胞的自我更新．另外，miR-218还参与调控一系列与胶质瘤细胞发育相关的基因．结论：作为一种肿瘤抑制因子，miR-218能阻止胶质瘤细胞的迁移、侵袭、增殖，并削弱其干细胞样特征．
- 涂艳阳高兴春李刚付华林崔大祥刘辉金卫林张永生
- 关键词：胶质瘤迁移增殖自我更新
- 大鼠骨髓间充质干细胞的分离鉴定及其在胶质瘤治疗中的作用
- 2015年
- 目的:建立大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离、培养、纯化方法,并对其进行形态学和细胞表面分子标记鉴定,确定其对胶质瘤细胞的趋向性和慢病毒对其的可感染性,为其作为载体携带目的基因或药物对胶质瘤进行治疗提供实验依据.方法:通过全骨髓培养法、差速贴壁的原理和形态学观察分离、纯化出生长旺盛、形态单一的细胞,并通过流式细胞仪对分离细胞进行细胞表面标记分子的鉴定;确定分离细胞为BMSCs后将其与胶质瘤U87MG细胞共培养观察其对胶质瘤细胞的趋向性,并用慢病毒载体对其进行可感染性的确定.结果:分离出的BMSCs以成纤维细胞样为主,生长旺盛,呈放射状排列的细胞集落,可稳定传代.流式细胞仪结果显示,所分离的细胞均呈CD29和CD90的阳性表达,而CD11b/c和CD45的表达均呈阴性;按1:100的比例将BMSCs和U87MG共培养后发现,BMSCs有靶向U87MG的特性并且在一定程度上可以抑制U87MG的生长;慢病毒可感染我们分离出的BMSCs且感染率较高.结论:我们采用的方法操作简单,可在体外分离、鉴定出大量纯度高的BMSCs,并证明了其在体外可以靶向胶质瘤细胞生长,且易于被慢病毒载体感染.这些结果均为后续研究BMSCs提供充足的种子细胞,将其作为载体携带目的基因或药物治疗胶质瘤提供了前期的实验依据.
- 刘辉张鹏幸范菲艳刘楠任东妮张永生涂艳阳
- 关键词：骨髓间充质干细胞胶质瘤
