国家自然科学基金(30471762) 作品数:6 被引量:12 H指数:3 相关作者: 邱贵兴 王以朋 吴志宏 肖军 翁习生 更多>> 相关机构: 北京协和医院 中国科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
脊柱终板软骨组织蛋白质提取技术 被引量:1 2009年 尹若峰 王以朋 吴志宏 赵宇 邱贵兴关键词:蛋白质提取 软骨组织 终板 软骨细胞 蛋白质分析 蛋白质电泳 双足鼠直立姿势相关因素及促直立的措施 被引量:8 2006年 目的分析双足鼠直立姿势的相关因素,探索可提高双足鼠模拟人类直立姿势效能的有效措施。方法将双足鼠术后直立姿势相关事件与相应直立持续时间进行统计并进行Pear- son相关性分析,探寻双足鼠直立相关因素。据此拟定可促进双足鼠站立的措施,设定措施组双足鼠,对比术后4、6周该组与普通双足鼠日均累计站立时间的差异,评估该措施对提高双足鼠模拟人类直立姿势效能的价值。结果双足鼠直立姿势与食物最紧密相关,这种相关性随增龄逐渐减弱。采取间断提高食物悬空高度的措施后,措施组日均累计站立时间长于普通双足鼠。结论双足鼠适应直立姿势是一个被动过程,悬空食物是其早期站立的主要诱因。通过间断提高食物悬空高度,可提高双足鼠模拟人类直立姿势的效能。 邱贵兴 肖军 吴志宏 王以朋 翁习生关键词:动物模型 一种双足鼠改良建模手术方法的研究 被引量:3 2006年 目的探索一种可弥补经典双足鼠模型伦理学缺陷的改良手术方法。方法 20只 SD大鼠随机均分为改良组和传统组,改良组行臂丛神经离断,传统组行近肩关节截肢。改良手术前后分别观察肩关节主动运动并记录肩关节周围肌肉肌电图以确定肌肉麻痹范围。对比改良法与传统建模法的手术持续时间、腋动脉损伤概率评价手术风险。记录术后2 d、1、2、4、6周双足鼠日均累计站立时间及6周站立姿势的差异,评价改良术式所构建双足鼠动物模型模拟人类站立姿势的效果。结果改良法较传统截肢手术操作简化,手术时间缩短,腋血管损伤概率显著降低。改良法术后肌电图显示所有上肢肌及大部分肩关节周围肌肉去神经化,改良双足鼠肩关节仅遗留轻微外展运动功能,上肢完全瘫痪。手术2周后,改良双足鼠日均累计站立时间甚至长于经典双足鼠,而直立姿势与经典双足鼠无差异。结论双足鼠改良建模手术方法不但简化了手术操作,而且实现了较经典截肢术更佳的建模效果,同时彻底驱除了双足鼠模型的伦理学阴霾。 肖军关键词:脊柱 鼠科 动物 双足鼠合理建模时机的探索 被引量:2 2007年 目的探讨推迟双足鼠建模时间至1月龄的合理性。方法实验采用雌性封闭群SD大鼠,根据建模时机随机分为3天龄组、3周龄组和1月龄组,每组10只(动物死亡后立即补充,保持各组样本数恒定)。大鼠1月龄后采用高笼喂养,饲养箱内饲料及饮用水悬空,悬空高度与大鼠直立身高相当,并根据大鼠站高增长进行动态调整。以近肩关节截肢法建模,3天龄组直接用丝线捆扎,以剪刀横断上肢。3周龄、1月龄大鼠采取上肢环形切口,钝性分离结扎肌肉血管、肱骨离断截除。对比各组双足鼠存活率以及生长至5、6、7、9、11、13周龄时双足鼠日均累计站立时间的差异,评价不同建模时机对双足鼠模拟人类直立姿势效果的影响。结果3天龄组累计4只乳鼠术后自然死亡,死亡率高达14.3%,9只乳鼠遭母鼠吞噬,概率高达32.1%,建模成功率为35.7%。3周龄、1月龄组模型动物存活率分别为58.8%、100%。1月龄组无术后死亡、母鼠噬子、饥饿死亡现象发生。1月龄组在6、7周龄及11、13周龄时,日均累计站立时间与其他两组比较差异无统计学意义;5周龄、9周龄时日均累计站立时间高于其他两组。结论建模时间推迟至1月龄不影响双足鼠模拟人类直立姿势的效果,还可显著提高建模成功率,是更合理的建模时机。 邱贵兴 肖军 吴志宏 徐进 王亭 王以朋关键词:SPRAGUE-DAWLEY 动物实验 年龄因素 青少年特发性脊柱侧凸软骨终板蛋白质组学研究 2009年 目的通过对青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)患者侧凸顶椎椎间盘软骨终板进行蛋白质组学鉴定,尝试寻找诱发或加重椎间盘不均衡发育的分子因素。方法经一期前路脊柱侧凸矫形术获取6例AIS患者主弯顶椎椎间盘的软骨终板组织,提取蛋白组织,用Brad—fjrd法对所获取蛋白质样品进行浓度测定;通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶蛋白电泳(sodium dodecyl sulfatepolyacrylamide gel electrophoresis,SDS—PAGE)对蛋白质总量和分子量范围进行初步鉴定;最后用鸟枪法蛋白质组鉴定技术比较凸、凹侧所含蛋白成分的异同,分析蛋白的种类和功能。结果Bradford法测量软骨组织中获得的平均蛋白质浓度为3.02mg/ml;SDS—PAGE显示顶椎凸侧终板软骨内所含蛋白质的种类明显多于凹侧;从凸侧软骨终板中鉴定出103种蛋白质,凹侧软骨终板内鉴定出55种蛋白质,其中凸侧特有蛋白58种,凹侧特有蛋白10种。结论对AIS患者侧凸顶椎软骨终板蛋白质进行分类研究后表明侧凸顶椎软骨终板凸、凹两侧的特有蛋白与脊柱侧凸顶椎椎间盘的不对称发育存在一定的联系。 尹若峰 邱贵兴 王以朋 杨福全 吴志宏 仉建国 赵宏 李书纲关键词:脊柱侧凸 蛋白质组 椎间盘 软骨 直立姿势对脊柱侧凸易感性及侧凸曲线进展规律的影响 被引量:4 2007年 目的探讨直立姿势对不对称应力下脊柱侧凸易感性及侧凸曲线进展规律的影响。方法实验分为双足鼠组、四足鼠组、双足鼠假手术对照组。倚重双足鼠模拟人类直立姿势的特点,采用肩胛间区后正中切口,沿竖脊肌与躯干肌间隙,以4号丝线行左侧肋骨根部高(T2-3或 T3-4)、低位(T10-11或 T11-12)栓系,造成不对称应力,模拟原发性胸弯。术后1、2、3、4、6、8周跟踪拍摄 X 线脊柱正位片,动态观察各组侧凸转归及曲线进展趋势在双足鼠与四足鼠中的差别。结果手术造成双足鼠、四足鼠组凸向右的初始胸弯或胸腰段单弯。术后1~4周,所有不对称栓系均因栓系点肋骨骨折或骨溶解吸收而松脱。四足鼠组于栓系松脱后1~4周脊柱侧凸全部消失,脊柱曲线恢复正常。栓系1周断裂的双足鼠同样侧凸消失,但随着不对称栓系时间的延长,侧凸进展率显著增长,栓系持续3~4周即出现不可复性脊柱侧凸。双足鼠侧凸的进展规律呈现多样化特点,包括稳定性单胸弯、进展性胸腰段单弯、进展性双弯,侧凸形态与人类特发性脊柱侧凸相似。空白手术对照双足鼠无侧凸形成。结论直立姿势增加脊柱对不对称应力的致弯易感性;直立姿势改变脊柱侧凸的进展规律,导致原发性胸弯进展过程中侧凸形态变化的多样性,并诱发脊柱侧凸的曲线代偿现象。 肖军 吴志宏 邱贵兴 杨新宇 李佳忆 翁习生关键词:脊柱侧凸 鼠科