浙江省自然科学基金(LY12H03002)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：温州医学院附属第一医院温州医科大学嘉兴市第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 内毒素耐受小鼠脾脏CD11clowCD45RBKgh树突状细胞培养与生物学特性鉴定被引量：2
- 2014年
- 目的分离培养内毒素耐受状态小鼠脾脏CDIiclowCD45RBhlghDC并探讨其生物学特性。方法12只体质量为20~25g的健康BALB／c小鼠，采用随机数字表法分成两组，每组6只。正常对照组小鼠腹腔注射0．9％氯化钠溶液0．2mL；内毒素耐受组小鼠以0．1弘g脂多糖腹腔注射，每日1次，连续注射5d建立内毒素耐受小鼠模型。免疫磁珠分选法分选正常对照组和内毒素耐受小鼠脾脏CDIIclowCD45RBhigchDC，流式细胞术检测细胞表型，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测T淋巴细胞增殖抑制率，ELISA法检测上清液中IL-10和IL-12表达量。样本均数比较采用单因素方差分析，Levene法检验方差齐性，方差齐时采用LSD-t检验，方差不齐时采用DunnettT3检验。结果正常对照组小鼠CDIIclowCD45RBhighDC浓度为30％，细胞计数为（5．30±0．12）×10。个；内毒素耐受组CDlllowCD45RBhightDC浓度为80％，细胞计数为（1．20±0．13）×i0。个，两组差异有统计学意义（t=3．23，P〈0．01）。两组细胞形态上未见明显差别。内毒素耐受小鼠脾脏CDIIc“”CD45RB“ghDC表面标志主要组织相容性抗原（MHC）-II、CD40、CD80的表达均较正常对照组明显降低。内毒素耐受组在细胞浓度为i：10、1：50、I：100时细胞增殖率均明显低于正常对照组，差异均有统计学意义（t值分别为1．36、2．49和1．88，均P〈0．01）。内毒素耐受组各浓度细胞与正常对照组比较，IL-10分泌量显著增加，差异有统计学意义（t值分别为13．63、13．45和9．31，均P〈0．01）；IL-12分泌量明显下降，差异有统计学意义（t值分别为2．62、2．74和2．99，均P〈0．05）。结论内毒素耐受小鼠脾脏CDllclowCD45RBhighDC具有较弱的抗原提呈能力及刺激异基因淋巴细胞增殖能力。
- 施春玮董进中张赛男董培红许烂漫卢明芹陈永平
- 关键词：内毒素类白细胞介素10白细胞介素12
- 乙型肝炎肝硬化合并肝性脑病患者血清LPS、TNF-α和IL-6的表达变化及意义被引量：7
- 2017年
- 目的检测乙型肝炎肝硬化合并肝性脑病(hepatic encephalopathy,HE)患者血清中内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-6水平,探讨其表达变化及意义。方法选择2014年8月~2016年8月在嘉兴市第一医院住院的患者90例,将68例乙肝肝硬化合并肝性脑病的患者设为A组,其中25例临床分级0级为A1组,25例1~2级为A2组,18例3~4级为A3组,22例乙肝肝硬化患者为B组,20例健康体检者为正常对照组(C组)。检测研究对象血清中LPS、TNF-α和IL-6水平,并分析其与TBil、ALT、AST、ALB、血氨的相关性。结果 A组患者血氨浓度较B组、C组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。血清LPS[(266.6±85.2)ng/L]、TNF-α[(41.9±7.0)μg/L]、IL-6[(48.9±10.3)ng/L]水平均明显高于B组[LPS:(121.4±24.1)ng/L;TNF-α:(28.3±4.6)μg/L;IL-6:(32.6±8.5)ng/L]和C组[LPS:(24.2±5.1)ng/L;TNF-α:(19.0±3.4)μg/L;IL-6:(16.8±4.9)ng/L],差异有统计学意义(F=112.6、127.05、103.24,P<0.05)。A1、A2、A3组LPS、TNF-α和IL-6、血氨水平逐渐升高,各组相比,差异有统计学意义(F=87.94、25.39、26.95、11.67,P<0.05)。血清LPS、TNF-α和IL-6水平均与血氨浓度呈正相关(r=0.267、0.322、0.311,P<0.05),与TBil、ALT、AST、ALB无明显相关性(P>0.05)。结论 LPS、TNF-α和IL-6是HE发生发展中重要的炎症介质,参与HE的免疫调节过程,分析其水平及变化可能有助于HE的病情判断及预后评估。
- 王柯尹吴一鸣陆许贞邹卓林卢明芹
- 关键词：肝性脑病白细胞介素-6内毒素
- 其刺激分子OX40在内毒素耐受大鼠肝组织中的表达及意义被引量：1
- 2013年
- 目的观察内毒素耐受（ETT）及正常大鼠接受D-氨基半乳糖（D—GalN）／脂多糖（LPS）注射后肝组织其刺激分子OX40表达的变化，探讨ETT发生的可能机制。方法雄性SD大鼠54只，按随机数字表法分为正常对照组6只、急性肝功能衰竭（ALF）组和ETT组各24只。ETT组及ALF组先分别以0．1mg／kgLPS和0．9％NaCl溶液腹腔注射，每日1次，连续5次，于第6天同时腹腔注射D-GalN 800mg／kg和LPS8μg／只，分别在注射后6、12、24和48h4个时间点留取大鼠血液及肝脏标本。RT—PCR检测大鼠肝组织OX40mRNA表达，Western印迹法测定肝组织OX40蛋白表达，ELISA检测血清TNF-α、IL-6水平。数据分析采用单因素方差分析、LSD法、Dunnett T3检验。结果ETT组大鼠血清TNF-α、IL-6水平虽高于正常对照组，但明显低于ALF组。ALF组大鼠肝组织OX40 mRNA表达上升，于造模后12h升高最明显，之后逐渐下降。ETT组大鼠肝组织0X40 mRNA表达水平虽高于正常对照组，但明显低于ALE组，与ALF组相比，差异有统计学意义（6、24、48h时间点比较，F值分别为5．027、5．539、5．011，均P〈0．05；12hF值为36．688，P〈0．01）。ALF组OX40蛋白的表达12h达峰值，24h开始下降。ETT组OX40蛋白的表达较ALF组明显下降（6hF值为8．658，P〈0．05；12、24、48hF值分别为34．611、28．176、16．747，均P〈0．01）。结论ALF组大鼠肝组织OX40表达水平升高，ETT组大鼠出现OX40的抑制，TNF-α、IL-6释放减少，提示OX40在ETT过程中可能发挥重要作用。
- 王柯尹洪巧董进中施春玮林镯卢明芹陈永平
- 关键词：膜糖蛋白类内毒素类
- 内毒素耐受小鼠脾脏CD11C^lowCD45RB^high树突状细胞对急性肝功能衰竭锌指蛋白A20表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的观察内毒素耐受CD11C^lowCD45RB^highDC对急性肝功能衰竭小鼠锌指蛋白A20表达的影响，探讨其在急性肝功能衰竭治疗中的作用及可能机制。方法建立内毒素耐受小鼠模型，经免疫磁珠法分选正常小鼠脾脏来源CD11C^lowCD45RB^highDC和内毒素耐受小鼠脾脏来源CD11C^lowCD45RB^highDC。选取健康雄性BALB／c小鼠126只，随机分为正常对照组（A组6只）、急性肝功能衰竭组（B组40只）、正常小鼠脾脏CD11C^lowCD45RB^highDC治疗组（C组40只）和内毒素耐受小鼠脾脏CD11C^lowCD45RB^highDC治疗组（D组40只）；B、C、D三组小鼠同时腹腔注射D-GaIN600mg／kg和脂多糖10μg／只，A组注射等体积0．9％氯化钠溶液；30min后C组腹腔注射正常小鼠脾脏来源CD11C^lowCD45RB^highDC（1×10^6／只，0．2mL／只），D组腹腔注射内毒素耐受小鼠脾脏来源CD11C^lowCD45RB^highDC（1×10^6／只，0．2mL／只）进行干预，A、B组则给予相同剂量的0．9％氯化钠溶液。检测各组小鼠各时间点血ALT、AST水平；采用HE染色观察各组小鼠各时间点肝组织病理变化；反转录（RT）-PCR和Western免疫印迹法检测各组小鼠各时间点TNF-α、核因子-κB、锌指蛋白A20表达情况。样本均数比较采用单因素方差分析。进行正态性检验和方差齐性分析，方差齐者采用LSD检验。结果B组在造模2h后ALT、AST开始逐渐升高，于24h达高峰，明显高于A组（t值分别为31．00和11．52，均P〈0．05）。C、D两组于造模2h后ALT、AST也逐渐升高，于24h达高峰，与B组比较，差异均有统计学意义（t值分别为14．60和26．43，均P〈0．05）。B组小鼠TNF-αmRNA（t=427．58）、核因子-κBmRNA（t=122．42）及蛋白表达量（￡值分别为179．35和165．98）随着时间的推移逐渐升高，至12h达高峰，与A组相比差异有统计学意义（均P〈0．05）。B组小鼠锌指蛋白A20mRNA及蛋白则随着时间的延长逐渐降低，在12h�
- 董进中王丽萍张赛男施春玮杨乃彬倪顺兰卢明芹
- 关键词：肝功能衰竭脂多糖类锌指蛋白A20
