您的位置： 专家智库 > >

国家自然科学基金(30672128)

作品数：8 被引量：45H指数：4
相关作者：王义生王少华李月白殷力刘鸣更多>>
相关机构：郑州大学第一附属医院郑州大学郑州市骨科医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 8篇医药卫生

主题

  • 4篇头坏死
  • 4篇坏死
  • 4篇骨头
  • 4篇骨头坏死
  • 4篇股骨
  • 4篇股骨头
  • 4篇股骨头坏死
  • 4篇RNA干扰
  • 3篇腺病
  • 3篇腺病毒
  • 3篇腺病毒载体
  • 3篇酒精性
  • 3篇酒精性股骨头...
  • 3篇基因
  • 3篇靶向
  • 3篇病毒载体
  • 2篇乙醇
  • 2篇酒精
  • 2篇PPARΓ
  • 2篇SIRNA

机构

  • 8篇郑州大学第一...
  • 5篇郑州大学
  • 3篇郑州市骨科医...

作者

  • 8篇王义生
  • 6篇李月白
  • 6篇王少华
  • 3篇殷力
  • 2篇赵国强
  • 2篇张林锋
  • 2篇刘鸣
  • 1篇王兴
  • 1篇李振伟
  • 1篇刘宏建
  • 1篇申子龙
  • 1篇王小刚
  • 1篇吴学建
  • 1篇张弛
  • 1篇徐琰
  • 1篇张驰

传媒

  • 4篇中华实验外科...
  • 2篇中国骨与关节...
  • 1篇河南医学研究
  • 1篇中华显微外科...

年份

  • 1篇2015
  • 2篇2011
  • 2篇2010
  • 1篇2009
  • 1篇2008
  • 1篇2006
共 8 条 记 录，以下是 1-8
全选 清除 导出
排序方式：
微小RNA-548d-5p靶向调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ对乙醇诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化的影响
2015年
目的观察微小RNA（miRNA，miR）-548d-5p靶向调控过氧化物酶体增殖物激活受体吖（PPARl）基因表达对乙醇诱导大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化的影响。方法2个月龄雄性大鼠制备BMSCs。将细胞实验分4组：（1）正常对照组：细胞不做特殊处理；（2）模型组：给予细胞0．09mol／L乙醇；（3）无关序列组：将无关序列电转入细胞，给予细胞0．09mol／L乙醇；（4）基因组：将miR-548d-5p电转入细胞，给予0．09mol／L乙醇。在细胞被乙醇诱导第3天和第7天，采用TaqMan反转录-聚合酶链反应（1iT—PCR）方法检测各组细胞PPARγmRNA。结果乙醇诱导第3天，正常对照组、模型组、无关序列组、基因组中PPARγmRNA表达量分别为1．000、1．720±0．176、1．757±0．188、1．017±0．096。第7天，4组中PPAR-γmRNA表达量分别为1．000、1．806±0．209、1．829±0．223、1．118±0．108，基因组中PPARγ mRNA表达低于模型组和无关序列组（P〈0．05），接近于正常组且与其差异无统计学意义（P〉0．05）。模型组和无关序列组中PPARγ mRNA表达高于正常对照组（P〈0．05）。结论miR-548d-5p能够抑制乙醇诱导BMSCs内PPARγ mRNA的表达。
吴留源徐琰李月白袁相伟关红亚郝蓝羽范惠智王义生
关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体Γ乙醇
酒精性股骨头坏死的发病机理与防治研究新进展被引量：12
2011年
酒精性股骨头坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)致残率高,严重威胁人类健康,其发病机理目前仍不十分清楚,迄今为止尚未发现预防其发生的有效方法。有关其发病机理提出的学说主要有:脂类代谢紊乱学说、脂肪栓塞学说、骨内高压学说、骨质疏松学说、骨细胞脂肪变性坏死学说、高凝低纤溶学说、骨髓基质细胞成脂分化学说等。近年来,中药葛根素及基因阻断技术已被用于酒精性ONFH防治研究,从发病机理的关键环节上预防酒精性ONFH的发生,改变了以往ONFH防治的被动不足。本文就酒精性ONFH的发病机理与防治研究进展做一综述。
王少华王义生
关键词：酒精股骨头坏死发病机理
siRNA腺病毒载体对兔骨髓基质细胞成脂分化的干扰效应被引量：8
2009年
目的观察靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-1（PPARy）基因siRNA腺病毒载体阻断乙醇诱导兔骨髓基质细胞（MSCs）的成脂分化。方法培养兔MSCs随机分为7组：N：对照组，M：模型组，CO：感染空载体组，C1：感染无关siRNA组，S1、S2、S3：干扰1、2、3组。将重组腺病毒载体转染细胞，检测MSCs内PPAR叫mRNA、osteocalcinmRNA、PPARγ蛋白表达、甘油三酯、ALP活性和培养液骨钙素含量，并计数脂肪细胞。结果N、M、CO、C1组PPARγmRNA和osteocalcinmR—NA表达值分别为（0．39±0．02）、（0．75±0．03）、（0．74±0．03）、（0．73±0．02）和（1．09±0．19）、（0．50±0．10）、（0．46±0．12）、（0．49±0．13），M、CO、C1组脂肪细胞多，甘油三酯高，ALP活性与骨钙素量均低。S1、S2、S3组PPARγmRNA和osteocalcinmRNA表达值分别为（0．28±0．03）、（0．30±0．03）、（0．31±0．01）和（0．92±0．09）、（0．87±0．32）、（0．93±0．25），脂肪细胞数、甘油三酯量、ALP活性值与骨钙素含量均接近正常，与M、CO、C1组间差异有统计学意义（P〈0．05），与N组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论该腺病毒载体能阻断乙醇诱导的MSCs成脂分化。
王义生王少华李月白赵国强刘鸣王小刚
关键词：RNA干扰腺病毒载体骨髓基质细胞乙醇
siRNA腺病毒载体预防兔酒精性股骨头坏死的动物实验研究被引量：5
2010年
目的观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体预防兔酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法新西兰种家兔60只,随机分为5组,每组12只。正常对照组(N):采用灌胃法,给予10%葡萄糖溶液10ml/(kg·d);单纯马血清致敏组(H):马血清致敏后,给予同量10%葡萄糖灌胃,作为对照;马血清致敏+酒精组(M):马血清致敏后,采用灌胃法,给予烈性白酒(含酒精46%,V/V)10ml/(kg·d),作为模型组;酒精+空载体组(CO):马血清致敏后灌酒,将空载体组病毒滴液注入动物一侧股骨头内;马血清致敏+酒精+重组腺病毒组(S):实验组,马血清致敏后灌酒,将siRNA腺病毒滴液注入动物一侧股骨头内。在灌酒后第4、8周末分批处死动物,观察其股骨头病理学变化。RT-PCR检测股骨头组织中PPARγmRNA和Osteocalcin mRNA的表达。结果M、CO组中,PPARγmRNA高表达,Osteocalcin mRNA低表达,空骨陷窝百分比及最大脂肪细胞平均直径明显增大、骨小梁面积分数降低,与N、H组相比差异均有统计学意义;S组中,PPARγmRNA低表达,Osteocalcin mRNA高表达,空骨陷窝百分比、最大脂肪细胞平均直径、骨小梁面积分数均与H、N组接近,差异均无统计学意义。结论靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体能够有效阻断酒精诱导的家兔股骨头内骨髓基质细胞内PPARγmRNA表达及成脂分化,预防酒精性ONFH的发生。
王少华王义生李月白
关键词：酒精股骨头坏死
靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ基因siRNA腺病毒载体的构建与鉴定被引量：4
2008年
目的构建、鉴定靶向过氧化物酶体增殖子活化受体-γ（PPAR-γ）基因的siRNA腺病毒载体。方法遵循siRNA片段的设计原则，依据GenBank中PPAR吖基因（AF013266）的序列，设计3个特异性靶序列（36～54位、73～91位和404～422位）；体外合成对应发卡样DNA片段，经退火后，将其克隆入pSIREN．Shuttle载体，通过PCR和I-CeuI和PI-SceI酶切鉴定后，再亚克隆入pAdeno-X腺病毒载体。对插入序列进行DNA序列分析。结果发卡样siRNA单链DNA寡核苷酸退火后，电泳可见明亮靶条带；PCR扩增和酶切鉴定得到阳性克隆pSIREN-Shuttle—siPPAR-γ1、pSIREN-Shuttle—siPPARγ-2和pSIREN-Shuttle—siPPARγ-3。亚克隆重组腺病毒载体pAdeno—X．siPPAR^t-1、pAdeno—X-siPPARγ-2和pAdenc-X—siPPARγ-3，经测序鉴定证实插入DNA序列与设计完全一致。结论成功构建3个靶向PPARγ基因的siRNA重组腺病毒载体，为进一步的基因治疗研究奠定了实验基础。
王义生王少华李月白赵国强张弛李振伟殷力刘宏建
关键词：RNA干扰腺病毒载体
靶向PPARγ基因siRNA载体的构建及沉默效应被引量：3
2006年
目的构建靶向过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPARγ)基因的小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)载体,转染骨髓基质细胞(marrow stromal cells,MSCs)后观察其对PPARγmRNA的抑制作用。方法根据siRNA设计原则,在PPARγmRNA序列中选择2个特异性靶序列(677-695和497-515)及同时设计1条无关对照序列；体外合成对应发卡样DNA片段,经退火后,将其定向克隆入siRNA载体pR- NAT-U6．2,将重组siRNA载体pRNAT-U6．2-PPARγ用脂质体包裹转染入MSCs后,采用RT-PCR检测PPARγ基因mR- NA表达水平的变化。结果得到阳性重组克隆pRNAT-U6．2-SPPARγ,经过PCR鉴定与测序,结果正确；RT-PCR检测转染MSCs显示,PPARγ基因的表达水平明显降低。结论成功构建靶向PPARγ基因的siRNA载体pRNAT- U6．2-SPPARγ,转染MSCs可以有效抑制PPARγmRNA的表达,这为预防酒精性股骨头坏死发生的研究奠定了可靠基础。
吴学建李月白赵国强王义生
关键词：RNA干扰基因
靶向特异基因小干扰RNA预防乙醇性股骨头坏死的研究被引量：16
2011年
目的观察靶向PPARγ基因小干扰RNA（siRNA）预防灌胃法家兔乙醇性股骨头坏死的效果。方法将96只家兔随机分为4组，每组24只。N组：灌胃法给予生理盐水10ml／（kg·d）。M组：灌胃法给予烈性酒（含乙醇度46％，V／V）10ml／（kg·d）；S组：实验1、3、5个月第1天，随机选择侧别手术，穿刺注入股骨头内25p,1siRNA重组腺病毒，同M组灌酒；c0组：同s组手术，同M组灌酒，不注入siRNA重组腺病毒。于2、4、6个月末分批处死家兔，观察血清学和股骨头组织病理学变化。结果实验6个月时，N、M、CO、S组血清甘油三酯含量分别为（1．21±0．12）、（4．59±1．58）、（4．63±1．17）、（4．32±1．20）mmol／L；总胆固醇含量分别为（2．35±0．33）、（19．59±1．58）、（20．13±1．17）、（18．32±1．20）mmol／L；脂肪细胞平均直径分别为（40．89±2．41）、（48．65±2．93）、（49．45±2．63）、（42．52±2．57）μm；骨小梁面积分数分别为（41．80±2．47）％、（30．70±2．86）％、（29．80±2．69）％、（41．60±2．87）％；空骨陷窝计数分别为（12．30±1．73）％、（22．40±1．52）％、（23．10±1．62）％、（11．70±1．46）％；PPARγ表达量分别为（0．29±0．05）、（0．66±0．12）、（0．61±0．15）、（0．33±0．05）；骨钙素mRNA表达量分别为（0．92±0．07）、（0．19±0．11）、（0．23±0．08）、（0．88±0．11）；PPAR~蛋白表达量分别为（0．75±0．08）、（1．60±0．11）、（1．55±0．12）、（0．65±0．05）。M、CO组病理变化明显，髓内造血组织减少，脂肪细胞增殖肥大，骨小梁变细、稀疏、部分断裂；S组股骨头内最大脂肪细胞平均直径、空骨陷窝计数、骨坏死发生率、PPARγ基因与蛋白表达量均明显低于M、CO组（P〈0．01，P〈0．05），S组与N组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论靶向PPARγ基�
王义生刘鸣张林锋申子龙王少华殷力
关键词：SIRNAPPARΓ股骨头坏死家兔
siRNA阻断PPARγ基因表达预防酒精性股骨头坏死的实验研究被引量：4
2010年
目的:观察靶向PPARγ基因siRNA腺病毒载体阻断酒精诱导兔骨髓基质细胞(MSCs)的成脂分化预防酒精性股骨头坏死(ONFH)的作用效果。方法:采用RNA干扰技术,构建重组PPARγ的siRNA腺病毒表达载体;将腺病毒载体感染家兔体外MSCs以及活体股骨头内MSCs,检测MSCs内PPARγmRNA及蛋白表达、甘油三酯、ALP活性和培养液骨钙素含量,并计数脂肪细胞;观察股骨头病理学变化。结果:干扰组体外MSCs内PPARγmRNA表达值、脂肪细胞数、甘油三酯、ALP活性值与骨钙素含量均接近正常,与模型组、感染空载体组、感染无关siRNA组间差异有统计学意义(P<0.05),与对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。活体实验干扰组股骨头内PPARγmRNA和蛋白均呈低表达、空骨陷窝计数、脂肪细胞及最大脂肪细胞平均直径未见明显增加,与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:靶向PPARγ基因siR-NA腺病毒载体能够有效阻断酒精诱导的家兔体外MSCs及活体股骨头MSCs内PPARγ基因表达,阻止其成脂分化,预防酒精性ONFH的发生。
王义生王少华王兴张林锋李月白殷力张驰
关键词：RNA干扰股骨头坏死腺病毒载体
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0