国家自然科学基金(30960129)
- 作品数：11 被引量：42H指数：4
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- 相关机构：广西医科大学第一附属医院福建省立医院广西医科大学更多>>
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- Th9细胞与自身免疫性疾病被引量：3
- 2010年
- Th1、Th2、Th17和调节性T细胞（Treg）亚群是CD4＋T细胞亚群中的重要成员,其参与了人类及动物自身免疫性疾病的发病过程.既往认为,IL-9是由CD4＋Th2细胞分泌的细胞因子,是机体免疫应答中重要的调节因子.最近研究表明,机体内可能存在着一群新型的具有分泌IL-9和IL-10能力的CD4＋Th细胞亚群,称之为＂Th9＂细胞.该细胞亚群与自身免疫性疾病的相关性尚不清楚.
- 杨帆伍伟锋
- 关键词：TH9细胞自身免疫性疾病
- 白细胞介素-23在小鼠病毒性心肌炎中的表达被引量：3
- 2011年
- 目的:研究小鼠病毒性心肌炎(VMC)模型中白细胞介素-23(IL-23)基因和蛋白的表达,探究其在VMC发病中的作用及其意义。方法:用柯萨奇病毒B3(CVB3)建立Balb/cVMC小鼠模型,实验组注射100TCID 50病毒液0.1 ml;对照组注射等量磷酸盐缓冲液。在注射的第0、1、2、3、4和6周应用逆转录-聚合酶链反应检测2组小鼠心肌组织中IL-23 mRNA的表达、酶联免疫双夹心抗体法检测血浆中IL-23蛋白的表达。结果:与对照组比较,实验组小鼠心肌组织中IL-23 mRNA、IL-23蛋白水平自1周开始稳定表达,4周时达峰值,并至少维持至6周;实验组各时间点的表达量均高于对照组的相应时间点(P<0.05)。结论:IL-23在VMC小鼠心肌组织中高表达,提示IL-23可能参与了VMC的发病过程。
- 杨帆伍伟锋
- 关键词：心肌疾病白细胞介素-23
- 病毒性心肌炎小鼠白细胞介素17和γ干扰素双阳性细胞的变化被引量：1
- 2011年
- 目的观察病毒性心肌炎（VMC）小鼠不同时间点白细胞介素17和γ干扰素双阳性细胞（IL-17＋／IFN-γ＋细胞）的变化，探讨其在VMC发病中的作用。方法雄性Balb／c小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3（CVB3）建立VMC小鼠模型（VMC组），对照组注射等量磷酸盐缓冲液，在注射的第0、1、2、3、4和6周苏木精-伊红染色观察心肌病理改变并计算心肌病理积分，流式细胞仪检测小鼠IL-17＋／IFN-γ＋细胞占CD4＋T细胞的比例。结果VMC组小鼠心肌组织病理积分于第1周升高（1．8±0．5），第2周达到最高（2．8±0．5），第3周开始逐渐降低，VMC组各时点与对照组相应时点比较差异均有统计学意义（P均〈0．05）。VCM组小鼠各时点脾IL-17＋／IFN-γ＋细胞维持在低水平，与对照组相应时点比较差异均无统计学意义（P均〉0．05），Spearman相关性分析显示IL-17＋／IFN-γ＋细胞与心肌病理积分无显著相关（P〈0．05）。结论VMC小鼠中存在少量IL-17＋／IFN-γ＋细胞，但可能与VMC的炎性过程无关。
- 杨帆伍伟锋颜玉鸾庞羽孔清
- 关键词：心肌炎白细胞介素类淋巴细胞
- 白介素17A活化NF-κB p65参与小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎
- 2016年
- 目的研究白细胞介素(interleukin,IL)-17A在柯萨奇病毒B3(coxsackievirus B3,CVB3)诱导的小鼠病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)发病过程中的作用机制。方法以CVB3分别感染Balb/c小鼠野生型(wild-type,WT)和IL-17A基因敲除型(IL-17A-deficient,IL-17A-/-),建立小鼠VMC模型,分别在感染后14d、28d留取心脏称心脏质量,计算心脏指数(heart weight/body weight,HW/BW),行苏木素伊红(HE)染色观察心肌病理改变并计算病理积分,实时荧光定量(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)及酶联免疫吸附测定(ELISA)检测心肌组织中IL-1β、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNT-α)和IL-6 mRNA及蛋白的表达,同时利用免疫印迹分析方法(Western blot)检测心肌组织中核因子(nuclear factor-κB,NF-κB)p65及p-p65的表达。结果与WT小鼠相比,感染CVB3后14 d IL-17A-/-小鼠心肌HW/BW及病理积分减少,心肌的炎症程度明显减轻,心肌组织中IL-1β、TNF-α和IL-6 mRNA及蛋白的表达,NF-κB p-p65蛋白的相对表达均显著低于其在WT小鼠中的表达,差异有统计学意义(P均<0.05);而NF-κB p65蛋白的相对表达在该时点与WT小鼠比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-17A参与小鼠VMC的致病过程,其机制可能与活化NF-κB p65,诱导炎症介质表达有关。
- 薛贻敏伍伟锋林风辉刘艳丽
- 关键词：病毒性心肌炎白细胞介素17A核因子-ΚBP65
- 外源性白细胞介素-17对病毒性心肌炎小鼠脾淋巴细胞分泌的细胞因子的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:观察外源性白细胞介素(IL)-7对病毒性心肌炎小鼠脾淋巴细胞分泌的干扰素(IFN)-γ、IL-6及转化生长因子(TGF)-β的影响。方法:雄性BALB/c小鼠腹腔注射柯萨奇病毒,1周后分离提取脾脏淋巴细胞,分别用0、25、50ng/ml重组IL-17(rIL-17)培养24、48、72h,流式细胞术测定培养后T辅助细胞(Th)1比例,RT-PCR测定培养细胞IFN-γ、IL-6及TGF-β的mRNA表达,ELISA法测定培养上清液中IFN-γ、IL-6及TGF-β的水平。结果:与0ng/ml组比较,25ng/ml组rIL-17作用后Th1细胞的比例、IFN-γmRNA表达水平及IFN-γ浓度均下降(均P<0.05)。但是不同浓度组和时间组内,IL-6和TGF-β的mRNA及蛋白表达量均差异无统计学意义。结论:外源性IL-17对病毒性心肌炎小鼠脾淋巴细胞中Th1细胞分化及IFN-γ的分泌起抑制作用,但是对TGF-β及IL-6没有显著影响。
- 高梦莎伍伟锋薛贻敏刘艳丽孔清黄炎兰
- 关键词：柯萨奇病毒白细胞介素-17干扰素-Γ转化生长因子-Β
- 白细胞介素17A对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠病毒复制的影响及其机制被引量：9
- 2017年
- 目的:研究白细胞介素17A(IL-17A)对柯萨奇B3(CVB3)病毒性心肌炎(VMC)小鼠病毒复制的影响及其可能的机制。方法:雄性Balb/c小鼠野生型(WT)和IL-17A基因敲除型(IL-17A-/-)分别感染CVB3建立VMC模型(WT-VMC组和IL-17A-/--VMC组),同时雄性Balb/c WT小鼠腹腔内注射PBS建立对照组(WT-PBS组)。14d后分别留取小鼠心脏及脾脏,计算心体比(HW/BW)并行HE染色观察心肌病理,心肌空斑法测定CVB3病毒滴度,RT-PCR法测定心肌中CVB3RNA、γ干扰素(IFN-γ)mRNA的表达,流式细胞分析法检测脾Th1细胞亚群的比例(CD4+Th1),Western blot法测定心肌中转录因子T-bet蛋白的表达。结果:与WT-PBS组相比,WT-VMC组小鼠心肌炎症明显,HW/BW及心肌病理积分显著升高,CVB3病毒滴度、CVB3RNA及IFN-γmRNA的表达、脾CD4+Th1细胞比例、心肌T-bet蛋白表达均明显升高(均P<0.05)。与WT-VMC组相比,IL-17A-/--VMC组小鼠心肌的炎症程度明显减轻,HW/BW及病理积分减小,CVB3病毒滴度与CVB3RNA的表达明显下降(均P<0.05),而IFN-γmRNA的表达、脾CD4+Th1细胞比例、心肌T-bet蛋白的表达均较WTVMC组明显升高(均P<0.05)。结论:IL-17A抑制VMC小鼠的抗病毒免疫功能,促进CVB3病毒复制,其机制可能与抑制T-bet表达有关。
- 薛贻敏林风辉刘艳丽伍伟锋
- 关键词：病毒性心肌炎柯萨奇B3病毒白细胞介素17AT-BET
- 病毒性心肌炎小鼠辅助性T淋巴细胞17亚群的变化被引量：16
- 2010年
- 目的 观察病毒性心肌炎小鼠不同时间点辅助性T淋巴细胞17（Th17）亚群的变化,探讨其在病毒性心肌炎发病中的作用.方法 用Balb/c小鼠建立柯萨奇病毒B3（CVB3）心肌炎小鼠模型（实验组）,对照组注射等量磷酸盐缓冲液,在注射的第0、7、14、21、28和42天苏木精-伊红染色观察心肌病理改变并计算心肌病理积分,流式细胞仪检测小鼠脾脏Th17细胞亚群的比例（Th17/CD4^＋）.结果 实验组7 d亚组小鼠心肌组织病理积分（1.8±0.5）高于0 d亚组,14 d亚组病理积分在实验组各亚组中最高（2.8±0.4）,从21 d亚组起病理积分开始低于14 d亚组,实验组各亚组与对照组相应时点亚组比较差异均有统计学意义（P均〈0.05）.实验组7 d亚组小鼠脾Th17/CD4^＋[（2.23±0.89）%]高于实验组0 d亚组,28 d亚组脾Th17/CD4^＋最高[（5.00±0.81）%],42 d亚组脾Th17/CD4^＋[（2.35±0.35）%]低于实验组28 d亚组,与对照组相应时点亚组比较差异均有统计学意义（P均〈0.05）.结论 病毒性心肌炎小鼠中存在Th17细胞,其可能参与了病毒性心肌炎的炎性过程.
- 杨帆林松黄炎兰伍伟锋
- 关键词：心肌炎肠道病毒属T淋巴细胞
- 白细胞介素17A对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心肌纤维化的影响被引量：8
- 2013年
- 目的探讨白细胞介素17A(interleukin-17A,IL-17A)对小鼠病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)心肌纤维化的影响。方法将100μL柯萨奇病毒B3(coxsackie-virus B3,CVB3)分别感染BALb/c小鼠野生型(wild-type,WT)和IL-17A基因敲除型(IL-17A-deficient,IL-17A-/-)建立小鼠心肌炎模型,造模后0 d、14 d、28 d、42 d分别取心肌组织作石蜡切片,行苏木素伊红及Masson染色观察病理改变,免疫组化(SP法)检测心肌基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)-2、MMP-9及组织金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1)的表达。结果与WT小鼠比较,IL-17A-/-小鼠在感染CVB3后心肌炎症及纤维化程度明显减轻,生存率提高。并且MMP-2和MMP-9在IL-17A-/-小鼠心肌中的表达在14 d和28 d明显低于其在WT小鼠心肌中的表达,差异有统计学意义[14 d亚组:0.21±0.02 vs.0.32±0.04,0.22±0.02 vs.0.38±0.05,P均<0.05;28 d亚组:0.14±0.02 vs.0.22±0.02,0.15±0.01 vs.0.26±0.03,P均<0.05];而TIMP-1在IL-17A-/-小鼠心肌中的表达则在14 d显著高于其在WT小鼠心肌中的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。WT组小鼠心肌MMP-2/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1的值先升高后降低,峰值出现在14 d左右。而IL-17A-/-组小鼠感染CVB3后14 d、28 d和42 d三个亚组心肌MMP-2/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1的值较0 d亚组有所降低,差异有统计学意义(P<0.05),但以上各亚组之间比较则差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-17A基因敲除有助于维持MMP-2/TIMP-1和MMP-9/TIMP-1的动态平衡。IL-17A可能通过介导胶原合成/降解系统的失衡参与小鼠VMC心肌纤维化过程,提示阻断IL-17A的作用有助于减轻VMC心肌损伤后心肌纤维化的程度。
- 薛贻敏伍伟锋高梦莎刘艳丽孔清
- 关键词：病毒性心肌炎心肌纤维化基质金属蛋白酶组织金属蛋白酶抑制剂
- 外源性转化生长因子-β对病毒性心肌炎小鼠脾Th17细胞增殖的影响
- 2011年
- 目的观察外源性转化生长因子(transforming growth factor,TGF-β)对病毒性心肌炎小鼠脾辅助性T淋巴细胞亚群(Th17)细胞增殖的影响。方法 BALB/c小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3建立病毒性心肌炎小鼠模型,1周后磁珠分离脾CD4+T淋巴细胞进行体外培养,分别用植物血凝素加TGF-β或单独用植物血凝素进行培养,5 d后流式细胞术测定培养后Thl7细胞比例、逆转录-聚合酶链反应(PT-PCR)测定培养细胞白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)mRNA的表达、酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定培养上清液中白介素-17的水平。结果与单独用植物血凝素培养组比较,植物血凝素加TGF-β组的Th17细胞比例稍有增加,但差异无统计学意义(2.32%±1.48%vs.1.82%±0.17%,P>0.05)。两组培养细胞白介素-17mRNA及上清液中白介素-17浓度比较,差异也无统计学意义(P均>0.05)。结论外源性TGF-β对病毒性心肌炎小鼠脾中已分化的Th17细胞无增殖作用。
- 曾晓春伍伟锋杨帆
- 关键词：心肌炎转化生长因子-ΒTH17细胞
- 外源性细胞因子对柯萨奇病毒性心肌炎小鼠脾Th17细胞的影响被引量：4
- 2012年
- 目的:观察转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-6和IL-23对柯萨奇病毒性心肌炎(VMC)小鼠脾中Th17细胞分化增殖的影响。方法:以6周龄雄性Balb/c小鼠腹腔注射柯萨奇病毒液建立VMC模型,1周后磁珠分离脾脏CD4+T淋巴细胞,分成对照组、TGF-β+IL-6组和TGF-β+IL-6+IL-23组进行体外培养。5d后应用流式细胞术测定刺激后Th17细胞的百分比;逆转录-聚合酶链式反应测定细胞中IL-17mRNA的表达;ELISA测定细胞培养上清液IL-17的水平。结果:与对照组比较,TGF-β+IL-6组Th17细胞数稍增加[(1.64±0.43)%∶(1.96±0.35)%],IL-17mRNA表达水平及细胞培养上清液IL-17浓度稍增加,但差异无统计学意义(P>0.05)。而TGF-β+IL-6+IL-23组Th17细胞数显著增加(4.08±0.77)%、IL-17mRNA表达水平及细胞培养上清液IL-17浓度均明显高于前2组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:外源性TGF-β联合IL-6对VMC小鼠脾中已分化的Th17细胞无增殖作用,而添加外源性IL-23则能显著增加Th17细胞数及其效应分子IL-17的表达。
- 庞羽伍伟锋颜玉鸾
- 关键词：TGF-ΒIL-23TH17细胞柯萨奇病毒
