湖北省卫生厅青年科技人才基金(QJX2005-8)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
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- 普罗帕酮对Kv1.4通道内口突变前后的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨普罗帕酮对编码瞬时外向钾电流(Ito)慢通道Kv1.4通道(fKv1.4ΔN)内口突变(fKv1.4[V561A]ΔN)前后的影响。方法将fKv1.4ΔN和fKv1.4[V561A]ΔN的cRNA注射到非洲爪蟾卵母细胞,孵育24～72 h后使用不同刺激程序用双微电极法记录通道电流的表达。用Clampfit 9.0对数据进行分析。部分电流用相应的方程拟合。结果普罗帕酮对fKv1.4ΔN和fKv1.4[V561A]ΔN的阻滞效应都呈电压和频率依赖性。通道内口的V561A突变使fKv1.4ΔN通道与普罗帕酮的结合能力减小,50%抑制浓度(IC50)在突变前后分别为100μmol/L和380μmol/L(P<0.01)。普罗帕酮能改变fKv1.4ΔN和fKv1.4[V561A]ΔN的失活特性。尽管普罗帕酮对fKv1.4ΔN的失活后恢复没有影响,但是它能延长fKv1.4[V561A]ΔN的50%失活后恢复时间。结论普罗帕酮是fKv1.4ΔN通道的开放通道阻滞剂,fKv1.4ΔN通道内口突变(V561A)能改变普罗帕酮与通道之间的结合能力,从而影响通道的失活和失活后恢复。
- 李绪勇李晓艳蒋学俊徐林
- 关键词：电生理学普罗帕酮突变
- 姜黄素对Kv1.4钾通道C型失活的影响被引量：1
- 2008年
- 目的研究姜黄素对去N端Kv1.4(Kv1.4ΔN)通道C型失活特性的影响。方法将Kv1.4ΔN的mR-NA注射入非洲爪蟾卵母细胞并于18～20℃下孵育,成功表达后使用双微电极钳制法记录电流,观察姜黄素对Kv1.4ΔN电流失活、复活的影响。结果①姜黄素对Kv1.4ΔN峰电流的抑制作用呈电压依赖性。②姜黄素对Kv1.4ΔN通道失活速度无明显影响。姜黄素灌流前后失活时间常数变化不大(2765±118msvs2513±193ms,n=5,P>0.05)。③通道失活后的恢复时间延长。结论姜黄素抑制钾电流并延长其恢复时间,但对稳态失活并无明显影响。其机制可能与它对通道的开放状态比失活态有更高的亲和力有关。
- 舒周伍李晓艳蒋学俊叶琤王能徐林王涛
- 关键词：电生理学姜黄素爪蟾卵母细胞
- 普罗帕酮对HERG钾通道孔胞膜外侧氨基酸突变前后的作用被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨普罗帕酮对人类ether-a-go-go相关基因(HERG)钾通道孔道胞膜外侧突变后结合能力的影响。方法:将HERG野生型通道(WT)和HERG突变型通道(MT)的互补核糖核酸(cRNA)注射到非洲爪蟾卵母细胞,孵育24～72h后以不同刺激程序用双微电极法记录通道电流的表达。用Clampfit9.2版本软件对数据进行分析。部分电流用相应的方程拟合。结果:HERGWT外侧的第628位点的甘氨酸突变为半胱氨酸(G628C)和第631位点的丝氨酸突变为半胱氨酸(S631C)成HERGMT后普罗帕酮与HERGMT通道的结合能力减小,50%抑制浓度(IC50)对HERGWT,HERGMT分别为5.31μmol/L和7.81μmol/L。普罗帕酮对HERGWT和HERGMT的阻滞效应都呈电压和浓度依赖性。普罗帕酮减小HERGWT,但未减少HERGMT通道的半数激活电压。结论:普罗帕酮是HERG通道的开放通道阻滞剂,HERG通道孔道膜外侧突变(G628C和S631C)能改变普罗帕酮与通道之间的结合能力,从而影响通道的激活。
- 李绪勇李晓艳蒋学俊唐艳红王晞
- 关键词：普罗帕酮突变钾通道阻滞剂心电图描记术
- ATP敏感性钾通道P266T突变对离子通道特性的影响
- 2007年
- 目的:通过通道蛋白特定位点(P266T)突变,观察对ATP敏感性钾通道电生理特性的影响。方法:将Kir6.2及其突变子P266T的cDNA导入人胚肾细胞,表达ATP敏感性钾通道,用膜片钳方法研究KATP电生理特性。结果:KATP(P266T)开放能力是野生型的2倍;KATP(P266T)密度仅是野生型20%;KATP(P266T)对ATP敏感性降低;对pH敏感性增高。结论:KATP特定位点(P266T)突变可改变KATP电生理特性。
- 万军吴钢黄从新蒋学俊李丽
- 关键词：钾通道ATP敏感突变电生理学
- R371H和P266T位点突变对ATP敏感性钾通道特性的影响
- 2006年
- 目的研究R371H和P266T两个位点突变对ATP敏感性钾通道特性的影响,揭示上述位点突变导致心律失常的机制。方法用人胚肾细胞表达Kiv6．2野生型、R371H和P266T位点突变后的通道,用膜片钳技术研究突变后胞内pH对ATP敏感性变构调节的变化。结果野生型、P266T、R371H均成功记录到内向整流性K+电流。暴露于不同的pH中时,野生型通道的半数电流抑制ATP浓度(IC50)在pH 6．8时较pH 7．4时显著增大(70 vs 22μmol／L,P<0．05),ATP浓度-电流曲线显著右移; R371H和P266T的IC50在pH 6．8与pH 7．4时差异无统计学意义。结论胞内pH对ATP敏感性变构调节的丧失,可能是R371H和P266T位点突变时导致心律失常的重要机制。
- 万军吴钢蒋学俊李丽黄从新
- 关键词：ATP敏感性钾通道位点突变
