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玫瑰香葡萄果实中脱落酸受体ABAR/CHLH基因的克隆及其表达分析: 2011年; 为了探讨脱落酸受体ABAR/CHLH是否参与葡萄果实成熟的调控,以玫瑰香葡萄花后8～11周的果实为试材,结合RT-PCR和3’-RACE技术首先克隆了脱落酸受体ABAR/CHLH同源基因。该基因在基因组中以单拷贝形式存在,并编码了1个含有1 381个氨基酸的多肽。生物信息学分析表明,ABAR/CHLH含有3个跨膜区,在进化上高度保守。围绕果实花后8～11周ABAR/CHLH基因转录水平以及ABA含量分析表明,随着果实的退绿,在着色前基因转录水平和ABA含量都迅速增加,此后基因表达量迅速降低,而ABA含量继续缓慢上升至现红后才缓慢降低。因此,玫瑰香葡萄果实的成熟启动不仅依赖于ABA含量快速积累,而且还依赖于其受体基因表达水平迅速增加。; 卢冬李春丽柴叶茂沈元月; 关键词：玫瑰香葡萄果实发育脱落酸

葡萄果实始熟期前后糖和pH值及ABA变化被引量：8: 2010年; 以玫瑰香(Vitis vinifera L. cv. Muscat Hamburg)葡萄为试材,研究果实纵横径,始熟期前后pH值、可溶性糖、总酸和脱落酸含量的变化。结果表明,玫瑰香葡萄果实纵横径变化趋势基本一致,分第一个快速生长期、缓慢生长期、第二个快速生长期三个时期,果实内可溶性糖主要为葡萄糖和果糖,蔗糖含量很少。可溶性糖含量在始熟期开始快速上升,三种糖变化趋势基本一致。葡萄糖、果糖和蔗糖始熟期前平均日增量分别为0.29,0.23,0.01 mg/g,始熟期后三者平均日增量分别为1.35,1.67,0.12 mg/g。始熟期前果实内葡萄糖∶果糖为12∶1,始熟期后葡萄糖和果糖含量开始快速升高,果糖升高速率高于葡萄糖,到花后77 d,二者差距逐渐缩至葡萄糖∶果糖为1∶1。pH值在始熟期开始快速升高,总酸含量和pH值呈吻合相反变化趋势。脱落酸含量伴随始熟的发生而迅速增加,果实成熟阶段有一个高峰,完熟前下降。总之,随着花后56 d葡萄果实成熟的启动,可溶性糖含量(主要葡萄糖和果糖)、pH值和ABA水平开始快速上升。葡萄果实成熟的启动依赖于ABA峰出现,而果实完熟过程不依赖于ABA的积累。葡萄果实始熟期前后可溶性糖含量、pH值和ABA水平之间平行关系调控的生理机制,即ABA持续积累的生理机制是今后研究的重要内容。; 李春丽董清华冯永庆沈元月; 关键词：玫瑰香葡萄 PH值总酸脱落酸

桃果实中脱落酸受体ABAR/CHLH结合区蛋白的原核表达、纯化及复性: 2011年; 为了剖析桃果实中脱落酸受体ABAR/CHLH蛋白的结合活性,从桃果实中提取总RNA,采用RT-PCR方法,以桃果实RNA逆转录的cDNA为模板,扩增出ABAR/CHLH基因的结合区功能片段C369,回收目的片段并测序,基因片段长度为1 121 bp,编码369个氨基酸残基,分子量约为40 kD。利用BamHⅠ和NotI酶切位点将该片段编码区插入原核表达载体pET-28a(+)中,构建ABAR/CHLH基因片段原核表达载体pET28a-C369,经菌落PCR和测序确证后,转化E.coliRosetta(DE3),通过IPTG诱导其表达His-CHLH融合蛋白。通过SDS-PAGE检测及Ni-NTA琼脂糖树脂亲和层析柱纯化目的蛋白,并用纯化复性的His-CHLH C369融合蛋白制备抗体。; 刘青董银行卢冬李春丽沈元月; 关键词：桃果实

草莓FaSig转录因子基因的克隆及序列分析: 2012年; Sigma因子作为一个转录正调控因子参与微生物糖代谢的调控。为了研究果实中Sigma因子的功能,利用RT-PCR与RACE扩增方法,从草莓果实cDNA中分离出一个草莓Sigma转录因子cDNA全长,进行测序和序列分析。结果表明,克隆的cDNA片段全长为2 008bp,基因内部含有完整的开放阅读框架,可编码长度为520个氨基酸残基的蛋白质,所推导的蛋白质氨基酸序列与葡萄(XM002268673)、大豆(XM003544709)、苜蓿(XM003602150)Sigma转录因子基因分别具有78%,77%和77%的氨基酸序列同源性,并含有典型的HTH结构域,表明草莓果实中Sigma属于σ70家族。; 余倩沈元月; 关键词：草莓基因克隆

糖、酸和谷氨酸处理对设施草莓果实成熟的影响: 通过对设施草莓果实进行糖、酸和谷氨酸处理,探讨其对草莓果实成熟的影响,以期找到调控草莓果实成熟的有效途径。试验于2009年3—4月份进行。以北京农学院科研基地温室草莓‘新兴2号’为试材。试剂有葡萄糖、蔗糖、谷氨酸、柠檬酸...; 高扬周蓓王志忠沈元月; 关键词：草莓谷氨酸甘露醇; 文献传递

丝/苏氨酸蛋白磷酸酶PP2A与草莓果实的早期发育: PP2A(Protein serine/threonine phosphatases)是一种丝/苏氨酸磷酸酶,能使蛋白质脱磷酸,在新陈代谢、DNA复制、转录、翻译、细胞周期、信号传导等过程中均起到显著作用。但关于PP2A...; 王伊琨张志勇秦岭沈元月; 关键词：草莓果实发育; 文献传递

草莓果实发育过程中糖、pH值及ABA水平变化趋势被引量：17: 2011年; 为了揭示草莓果实发育和成熟的生理机制,本研究以杜克拉草莓7个时期的果实为试材,分析果实发育过程中pH值、可溶性糖和ABA变化趋势。结果表明,果实发育前期可溶性糖积累以葡萄糖和果糖为主,蔗糖很低;果实进入始熟和成熟,蔗糖分别有一次快速积累的过程,全红时蔗糖含量是果糖和葡萄糖的1.25倍。以纯白期pH值最低点为界,pH值先降后升的"V"型变化趋势依次伴随着果实的褪绿和着色。瘦果中和花托中ABA水平变化趋势分别呈"W"和"N"型,前者的含量大约是后者的3倍。除了始红期外,花托中ABA含量在整个草莓果实发育过程中呈上升趋势。同葡萄糖和果糖相比,蔗糖的积累呈现了独特的变化趋势;瘦果中和花托中的ABA积累既有同步又有区别,2者之间相关性不显著;花托中的可溶性糖和ABA水平之间存在着密切关系。; 李春丽柴叶茂王志忠董清华秦岭沈元月; 关键词：草莓果实发育可溶性糖 PH值脱落酸

草莓果实发育过程中糖代谢相关基因的表达分析被引量：27: 2011年; 为了分析草莓(Fragaria×ananassa Duch.)果实发育过程中可溶性糖积累与相关基因表达量的关系,以'杜克拉'草莓7个发育时期的果实为试材,利用实时荧光定量RT-PCR的方法,分析果实发育中蔗糖转运蛋白及糖代谢关键酶(酸性转化酶、蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶)4个基因的表达量以及可溶性糖含量的变化趋势。结果表明,蔗糖、葡萄糖和果糖含量随着果实发育都呈逐渐增加的趋势,尤其蔗糖积累与果实成熟的关系较密切。随着果实发育,蔗糖磷酸合成酶基因表达量呈逐渐增加的趋势,尤其在果实发育的后期增加较快;蔗糖合成酶和酸性转化酶基因表达量除了白熟期和转色期外,呈逐渐降低的趋势;蔗糖转运蛋白基因表达量呈先升后降,降后又升的变化趋势,尤其在白熟期前急剧增加。结合可溶性糖和基因变化趋势分析表明,蔗糖转运蛋白和蔗糖磷酸合成酶在草莓果实发育过程中发挥着重要的作用。; 柴叶茂贾海锋李春丽秦岭沈元月; 关键词：草莓果实可溶性糖蔗糖转运蛋白荧光定量PCR

草莓果实ABA积累关键酶基因FaNCED1和FaBG1转录水平分析: 本实验室在葡萄上研究发现,玫瑰香葡萄果实始熟前ABA的积累归因于VvNCED1基因的高水平表达,始熟后ABA的积累主要归因于VvBG1基因的高水平表达。草莓果实与葡萄同属典型的非乙烯跃变型果实,而关于NCED和BG是否参...; 柴叶茂贾海锋李春丽秦岭沈元月; 关键词：草莓果实发育荧光实时定量PCR; 文献传递

气-质联用和酶联免疫检测草莓花托中ABA含量被引量：2: 2010年; 以草莓"杜克拉"为试材,分别利用ELISA和GC-MS测定草莓花托中4个时期ABA含量。结果表明,ELISA(ng/g)/GC-MS(ng/g)检测草莓大绿期(大绿)、白色期(纯白)、着色期(始红)和始熟期(片红)花托中ABA含量分别为65.93/72.90,74.49/233.55,69.56/172.11和78.26/225.07。除大绿果期外,其他时期GC-MS检出结果极显著高于ELISA,但二者变化趋势基本相同,即呈N型升-降-升趋势,这表明ABA与草莓果实成熟存在密切关系。通过对造成差异原因、操作程序复杂性和成本比较分析后认为,GC-MS虽然测量精度高,但如果研究ABA的变化趋势,可选择成本低、操作简便、安全的ELISA方法。; 李春丽冯永庆沈元月; 关键词：酶联免疫草莓果实花托

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北京市自然科学基金(6082005)

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