湖南省自然科学基金(06JJ4051)
- 作品数：13 被引量：68H指数：5
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- 相关机构：中南大学湘雅二医院中南大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 金黄葡萄球菌中毒休克综合征毒素1的研究被引量：1
- 2008年
- 目的应用PCR技术，检测金黄葡萄球菌的mecA基因和染色体上编码中毒休克综合征毒素1（TSST-1）的tst基因，了解tst基因的携带情况。方法用PCR法对我院2006年8月-2007年5月临床分离的84株金黄葡萄球菌mecA基因和tst基因进行体外扩增，建立快速、特异、灵敏的检测产TSST-1耐甲氧西林金黄葡萄球菌（MRSA）的方法。结果成功的对金黄葡萄球菌mecA基因和埘基因进行了检测，并进行基因测序。在我院84株受检金黄葡萄球菌中，41株金黄葡萄球菌的mecA基因扩增呈阳性，阳性株占48．81％。16株tst基因阳性，阳性株占19．05％。10株金黄葡萄球菌同时扩增出mecA基因和tst基因，阳性株占24．39％（10／41）。结论tst基因阳性株在临床分离的耐甲氧西林金黄葡萄球菌中占有较高的比例，应予以足够重视。
- 王敏李先平付炅范婧唐爱国
- 关键词：金黄葡萄球菌MECA基因
- 三种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的比较被引量：2
- 2008年
- 目的:对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)3种检测方法的可靠性和临床实用性进行评价。方法:用检测mecA基因的PCR扩增法、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法对临床分离的84株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果:苯唑西林纸片扩散法的敏感性、特异性分别为97.6%、95.3%,mecA基因的PCR扩增法和头孢西丁纸片扩散法的敏感性、特异性均为100.0%。结论:PCR技术检测MRSA具有快速、敏感和特异的特点,是一种非常有效的鉴别方法。纸片扩散法简便易行,成本低廉,尤其是头孢西丁纸片扩散法的敏感性和特异性较苯唑西林纸片扩散法更高,值得在临床实验室中推广应用。
- 王敏范婧李先平唐爱国
- 关键词：葡萄球菌甲氧西林抗药性苯唑西林头孢西丁MECA基因
- 耐甲氧西林金黄葡萄球菌高变区基因分型及其与耐药性的关系被引量：3
- 2009年
- 目的调查本地区耐甲氧西林金黄葡萄球菌（MRSA）的高变区（HVR）基因分型，分析HVR基因型与MRSA耐药谱的关系，并初步探讨其在分子流行病学分析中的作用。方法收集80株MRSA，采用PCR方法扩增MRSA的HVR，并根据扩增片段大小进行基因分型。同时统计各MRSA菌株对多种抗菌药物的药敏结果，并分析基因型与耐药性的关系。结果根据PCR产物片段大小，80株MRSA被分为A、B、C、D、E5种基因型，其中以D和E型多见，分别占61．25％和21．25％，A（3．75％）、B（5．00％）、C（8．75％）型少见。各基因型MRSA除对万古霉素敏感外，对头孢唑啉、庆大霉素、红霉素、阿奇霉素、克林霉素、环丙沙星、复方新诺明、阿米卡星的耐药率为61．5％～100％。结论MRSA的HVR基因分型是一种快速、简单、可靠的分型方法，适用于MRSA感染的流行病学调查，有利于抗菌药物的选用。
- 王敏李先平李文娟何斌
- 关键词：耐药性
- PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的mecA基因被引量：6
- 2008年
- 目的应用mecA基因PCR扩增法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。方法对临床分离的84株金黄色葡萄球菌,应用mecA基因PCR扩增法鉴定MRSA,并与苯唑西林纸片扩散法和头孢西丁纸片扩散法进行比较。结果84株金黄色葡萄球菌中,41株金黄色葡萄球菌的mecA基因扩增呈阳性,其中有1株表现为对苯唑西林敏感;苯唑西林纸片扩散法检出42株阳性,其中有2株mecA基因呈阴性。头孢西丁纸片扩散法与PCR扩增法的试验结果完全符合。结论mecA基因PCR扩增法可以准确、快速判定MRSA。
- 王敏范婧李先平
- 关键词：MECA基因耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PCR
- 重组金黄色葡萄球菌肠毒素C3生物学活性的初步研究被引量：3
- 2012年
- 目的:表达和纯化重组金黄色葡萄球菌肠毒素C3(rSEC3),并初步探讨rSEC3的生物学活性。方法:将转化有pET-32a(+)-SEC3重组质粒的大肠杆菌BL21经IPTG诱导表达、纯化后,MTT法检测0.1、0.5、1、5、10、50、100μg/ml的rSEC3促进人外周血单个核细胞(PBMC)增殖及抑制人宫颈癌细胞(Hela细胞)、人食管癌细胞(KYSE细胞)的作用。结果:重组金黄色葡萄球菌肠毒素C3在大肠杆菌BL21中成功表达。与空白对照相比,0.1～100μg/ml的rSEC3对PBMC均有显著的促增殖作用(P<0.05),1μg/ml时促增殖作用最强(t=113.851,P=0.000),和100μg/ml PHA作用相似(t=0.693,P=0.527)。以Hela细胞为靶细胞,培养48小时后,与空白对照相比,0.5、1、5μg/ml的rSEC3能显著增强PBMC对Hela细胞杀伤作用(P<0.05),抑瘤率分别为(70.44±9.27)%、(93.65±8.05)%、(103.40±6.65)%;以KYSE细胞为靶细胞,与空白对照相比,3个浓度的rSEC3也都有抑瘤作用(P<0.05),抑瘤率分别为(28.10±2.72)%、(46.62±4.17)%、(19.35±3.05)%。结论:rSEC3蛋白具有良好促人外周血单个核细胞增殖活性,并能够增强PBMC对肿瘤细胞的杀伤活性。
- 李先平王敏武婷梅城曹虹
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素生物学活性
- 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的主动外排系统基因qacA/B的检测及其意义被引量：8
- 2009年
- 目的:应用半巢氏聚合酶链式反应(PCR)技术检测临床分离耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)主动外排系统qac基因,了解qac基因的存在状况。方法:根据MRSA主动外排系统qacA和qacB基因序列设计引物,采用半巢氏PCR法对中南大学3所附属医院2006年8月至2008年3月临床分离的80株MRSA分别扩增qacA/B和qacB基因,并进行序列分析。结果:在80株受检MRSA中,检出qacA/B基因19株,检出率23.75%;qacB基因18株,检出率22.5%。序列分析显示,qac基因与qacA的参考序列(X56628)98%相同,与参考序列qacB(AF535087)97%相同。结论:半巢氏PCR法可成功检测MRSA的主动外排系统qac基因。qac基因阳性株在临床分离的MRSA中占有较高的比例,可能与其多重耐药有关。
- 郑荣王敏何斌李先平曹虹梁好卿之驹唐爱国
- 关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
- 甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌qac基因的检测及其耐药性研究被引量：1
- 2009年
- 甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）是引起医院感染的主要病原菌之一，目前临床上只有少数药物对MRSA感染有效。文献报道MRSA的多重耐药机制可能与产生灭活酶mec基因编码的青霉素结合蛋白以及主动外排等因素有关。为了解主动外排系统在MRSA多重耐药中所起的作用，我们进行了以下实验。
- 王敏何斌李先平曹虹梁好郑荣
- 关键词：甲氧西林耐药C基因MRSA感染多重耐药机制主动外排系统青霉素结合蛋白
- 金黄色葡萄球菌临床分离株肠毒素基因的调查分析被引量：17
- 2012年
- 目的检测临床分离的金黄色葡萄球菌(SA)肠毒素基因,了解肠毒素基因的携带情况与SA耐药的关系。方法采用聚合酶链反应检测SA mecA基因和肠毒素基因,了解肠毒素基因在SA中分布的状况,并对其进行耐药性分析。结果 67株甲氧西林耐药的SA(MRSA)和57株甲氧西林敏感的SA(MSSA)肠毒素基因携带率(100%vs 83.5%)无明显差异(χ2=0.203,P>0.05)。肠毒素基因检出率为93.5%(116株),其中SEA、SEB、SEC、SED和SEF的检出率分别为90.5%、6.9%、61.3%、5.2%和25.9%,未检测出SEE基因。同时检出2种及2种以上的肠毒素基因的菌株有78株(67.2%),以携带SEA+SEC、SEA+SEF和SEA+SEC+SEF基因为主,检出率分别为33.6%、7.8%和13.8%。与携带一种肠毒素基因的菌株耐药率相比,携带多种肠毒素基因的菌株耐药率呈上升趋势,其中携带SEA+SEC+SEF的菌株对复方新诺明的耐药率为75.0%,高于单独携带SEA(28.6%)、SEA+SEC(38.7%)的耐药率,具有统计学差异(P<0.05)。携带SEA+SEC+SEF、SEA+SEF、SEA的菌株对阿米卡星耐药率分别为75.0%、77.0%和21.5%,前两者与携带SEA的菌株相比有显著差异(P<0.05)。结论临床分离的SA中携带多种肠毒素基因的菌株在耐药率上高于只携带一种肠毒素基因的菌株,提示肠毒素在SA耐药中起重要作用。
- 曹虹王敏郑荣李先平王芳蒋云生杨一芬
- 关键词：金黄色葡萄球菌肠毒素基因耐药性
- 金黄色葡萄球菌中毒休克综合征毒素1基因的检测被引量：8
- 2008年
- 目的检测编码金黄色葡萄球菌中毒休克综合征毒素l(TSST-1)的tst基因,了解该基因的携带情况。方法用PCR法对产毒素金黄色葡萄球菌染色体上编码TSST-1的tst基因进行体外扩增,并对临床分离的84株金黄色葡萄球菌进行tst基因检测及序列分析。结果对tst基因进行了检测及测序,84株受检的金黄色葡萄球菌中,tst基因阳性株占19.05%(16/84),测序结果与GenBank公布的金黄色葡萄球菌产TSST-1基因的同源性较高。结论用PCR法检测tst基因,具有良好的重复性、特异性和敏感性。tst基因阳性株在临床分离的金黄色葡萄球菌中占有较高的比例。
- 王敏付炅李先平
- 关键词：PCR金黄色葡萄球菌
- PCR技术检测金黄葡萄球菌肠毒素A基因被引量：1
- 2009年
- 目的建立一种快速、准确检测金黄葡萄球菌肠毒素A的PCR方法,了解引起临床感染的金黄葡萄球菌携带肠毒素A基因的情况。方法根据金黄葡萄球菌肠毒素A基因编码序列设计一对PCR引物来特异性扩增靶基因片段,建立快速、特异、灵敏的检测金黄葡萄球菌肠毒素A基因的方法。同时对我院2006年8月-2008年10月临床分离的120株金黄葡萄球菌进行肠毒素A基因检测。结果成功的对肠毒素A基因进行检测并进行基因测序。在我院120株受检金黄葡萄球菌中,基因阳性株占83.3%。结论用PCR技术检测金黄葡萄球菌肠毒素A基因具有特异性强,灵敏度高,速度快和易操作特点。金黄葡萄球菌肠毒素A阳性株在临床分离的金黄葡萄球菌中占有较高比例,应予以足够重视。
- 曹虹王敏李先平
- 关键词：PCR金黄葡萄球菌
