云南省自然科学基金(2002C0024Q)
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
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- 相关机构：成都军区昆明总医院昆明市第一人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- bcl-2基因转染对大鼠胰岛细胞培养的影响被引量：3
- 2005年
- 目的探讨bcl-2基因转染对培养的胰岛细胞凋亡和生物活性的影响。方法用腺病毒介导的基因转染方法把bcl-2转染入胰岛细胞,用RT-PCR和免疫细胞化学方法检测转染细胞中bcl-2的表达,原位末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡,台盼蓝测定细胞活度,放免法测定培养液中胰岛素水平了解胰岛功能。结果转染的胰岛细胞中70%的细胞有bcl-2蛋白的表达,转染细胞的凋亡率为6%,对照组为22%,转染胰岛细胞的活度为91%,对照组为68%,转染胰岛细胞在高糖培养基中胰岛素水平高于对照组结论腺病毒介导的基因转染方法能成功转染胰岛细胞,bcl-2基因转染能降低细胞凋亡率,改善胰岛细胞功能。
- 鞠海兵王力舒子正胡灯明朱姿英沈菲菲杨举伦
- 关键词：基因,BCL-2转染胰岛
- 重组人Bcl-2腺病毒载体的构建与鉴定被引量：4
- 2004年
- 目的 构建人bcl-2重组腺病毒载体。方法 通过酶切分析获得正向插入目的基因的真核表达载体pcDNA/bcl -2 ,然后将bcl -2定向克隆到腺病毒穿梭质粒pAdCMV中 ,通过体内同源重组 ,重组质粒与质粒pJM17共转染 2 93细胞 ,获得复制缺陷型重组腺病毒AdCMV/bcl -2 ,进行扩增、纯化。通过PCR检测病毒DNA ,空斑实验检测病毒滴度。结果 腺病毒穿梭质粒与pJM17体内同源重组后获得含目的基因的重组腺病毒 ,病毒滴度为 2 0× 10 1 0 pfu/ml。
- 鞠海兵程在全舒子正胡灯明王力沈菲菲杨举伦
- 关键词：BCL-2腺病毒载体质粒基因重组原癌基因
- 垂体腺瘤继发库欣病病理分析被引量：1
- 2012年
- 目的探讨垂体腺瘤的病理特征,分析其与库欣病的关系。方法对1例垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)腺瘤继发库欣病的临床资料进行回顾性分析。结果本例手术切除垂体腺瘤后送病理检查,镜下可见肿瘤细胞密集,弥漫排列或呈裂隙状结构,瘤细胞巢之间为血管丰富的纤细间质;免疫组化:垂体腺瘤ACTH阳性,胞浆着色,CD56、CgA、EMA、Syn、Vim胞膜和胞浆阳性,Ki-67核阳性。病理诊断为垂体ACTH腺瘤。结论垂体腺瘤免疫组化检测可作为功能性垂体腺瘤病理诊断的主要手段。垂体腺瘤分泌过多的ACTH是库欣病的病因。
- 戴芳王丽鞠海兵赵玺龙杨倩成友华王力宋蜀怜崔静蔡琳
- 关键词：垂体肿瘤库欣综合征
- Bcl-2基因转染胰岛细胞移植的实验研究被引量：1
- 2006年
- 目的探讨Bcl-2基因转染胰岛细胞同种移植治疗糖尿病大鼠的效果。方法腺病毒介导胰岛细胞的Bcl-2基因转染,以表达Bcl-2的胰岛细胞经门静脉肝内移植治疗链脲菌素诱导的糖尿病大鼠。通过观察受体大鼠的血糖变化和组织学改变来了解排斥反应和移植物的功能。结果胰岛细胞植入后48h内,基因转染组和未转染组糖尿病大鼠血糖均有明显下降。与未转染组比较,基因转染组大鼠移植物存活有效时间明显延长(16·4±4·3天vs6·8±2·2天,P<0·05),移植部位可见到结构和功能完好的胰岛细胞,局部炎性反应也明显减轻。结论胰岛细胞的Bcl-2基因转染对移植物的存活和功能有保护作用。
- 鞠海兵舒子正胡灯明王力朱姿英沈菲菲
- 关键词：基因,BCL-2转染胰岛移植
- 大鼠胰岛细胞的分离纯化及培养被引量：8
- 2005年
- 目的 探讨大鼠胰岛细胞分离纯化和培养的方法。方法 采用胰导管逆行灌注Hanks液分离成年大鼠胰岛,Ⅴ型胶原酶消化,不连续密度梯度Ficoll 4 0 0纯化胰岛。用台盼蓝和双硫腙染色检测胰岛活性和纯度,葡萄糖刺激胰岛素释放试验检测胰岛功能。结果 胰岛细胞的收获量为5 4 0±15 0个胰岛 胰腺,活性>90 % ,纯度>90 % ,高糖刺激后胰岛素释放量为低糖刺激的2倍多。结论 胰导管灌注Hanks液,Ⅴ型胶原酶消化和不连续密度梯度葡聚糖纯化胰岛,可以获取数量多。
- 鞠海兵王力舒子正胡灯明朱姿英沈菲菲杨举伦
- 关键词：胰岛素释放试验逆行灌注染色检测高糖刺激导管灌注台盼蓝
