河北省自然科学基金(302489) 作品数:30 被引量:129 H指数:7 相关作者: 刘殿武 李青 肖永红 贺宇彤 张丽梅 更多>> 相关机构: 河北医科大学 唐山职业技术学院 河北医科大学第四医院 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 河北省科技厅科研项目 河北省科技厅博士基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
抗纤Ⅰ号和硒对肝纤维化大鼠免疫功能的调节作用 被引量:12 2004年 目的 :研究抗纤Ⅰ号、抗纤Ⅰ号加硒对大鼠肝纤维化的治疗作用和免疫调节作用 ,并从分子水平对其机制进行探讨。方法 :利用CCl4、胆固醇等复合因素制造大鼠肝纤维化模型 ,设立空白对照组、肝纤维化模型组、西药组、抗纤Ⅰ号及抗纤Ⅰ号加硒组 ,治疗组灌胃治疗 4 2d ,检测病理学指标、血清酶学、肝纤维化指标、肝组织羟脯氨酸含量、脾指数、胸腺指数、T淋巴细胞亚群、T淋巴细胞增殖、血清循环免疫复合物、巨噬细胞吞噬功能、肝组织TGF β1mRNA表达量的变化。结果 :与秋水仙碱组相比 ,中药治疗组大鼠肝脏损伤明显减轻 ,血清ALT、AST、HA、LN和Hyp均显著降低 ,提示抗纤Ⅰ号和硒具有很好的抗肝纤维化作用。同时中药治疗组大鼠脾指数降低 ,胸腺指数升高 ,胸腺组织CD+4 、CD+4 CD+8明显高于秋水仙碱组 ,T淋巴细胞增殖抑制得到大大改善。血清循环免疫复合物明显减少 ,巨噬细胞吞噬功能有所上升。RT PCR实验表明 ,抗纤Ⅰ号能够明显抑制TGF β1mRNA的表达量。结论 :抗纤Ⅰ号对大鼠肝纤维化具有明确的治疗作用 ,且有提高机体免疫力的作用 ,同时加硒效果更好。其作用机制可能是通过下调TGF β1mRNA ,从而抑制胶原合成实现的。 贺宇彤 刘殿武 丁里玉关键词:肝纤维化 硒 免疫学指标 MRNA 抗纤Ⅰ号对实验性肝纤维化大鼠组织Ⅰ、Ⅲ型胶原及转移生长因子β_1mRNA表达的影响 被引量:36 2003年 目的 :从分子水平研究抗纤Ⅰ号方剂治疗肝纤维化作用机理。方法 :利用CCl4 制造大鼠肝纤维化模型 ,设立正常对照组、肝纤维化模型组及中药治疗组 ,中药灌胃治疗 4 2d ,检测病理学指标、肝纤维化血清学指标、肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的免疫组化 ,以及肝组织TGFβ1mRNA表达量的变化。结果 :肝组织病理学以及血清学指标同对照组统计学尚有显著差异 ,同时实验也表明治疗组能够明显减少肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原以及TGFβ1mRNA的表达量。结论 :抗纤Ⅰ号具有逆转肝纤维化的作用 ,其作用机理可能是通过下调TGFβ1mRNA ,抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成而减轻肝纤维化。 朱冰 刘殿武 房文亮 杨霞关键词:肝纤维化 胶原 RT-PCR 大鼠肝再生增强因子真核表达质粒的构建及其抗急性肝功能衰竭作用的研究 被引量:1 2004年 目的研究肝再生增强因子真核表达质粒对急性肝功能衰竭的保护作用。方法PCR扩增的大鼠肝再生增强因子基因与真核表达载体 pcDNA3重组 ,重组后转化到大肠杆菌DH5α细胞内 ,扩增后提取重组的pcDNA3质粒。将重组的 pcDNA3质粒 (2 0 0 μg/kg)和生理盐水分别注射到 5 0 %CCL4复制的急性肝功能衰竭大鼠腹腔。在CCL4染毒后 4h开始注射 ,存活超过 96h计为存活 ,观察肝再生增强因子对大鼠急性肝功能衰竭的保护作用。结果 pcDNA3 ALR重组质粒目的基因与文献报道的大鼠ALRcDNA序列相同。pcDNA3 ALR重组质粒应用后 ,肝功能衰竭大鼠存活率 4 0 % ,明显高于生理盐水对照组的存活率 (1 5 % ,P <0 .0 1 )。 张丽梅 刘殿武 杨洁 李青关键词:肝再生 基因疗法 硒强化软肝胶囊对大鼠实验性肝纤维化的治疗作用 被引量:12 2004年 目的 :探讨硒强化软肝胶囊对大鼠实验性肝纤维化的治疗作用。方法 :采用CCl4反复给予诱发大鼠产生肝纤维化模型后 ,分别灌胃给硒强化软肝胶囊、软肝胶囊和秋水仙碱药液 ,每日1次 ,连续 8W ,观察各组大鼠肝组织、血清酶、血清学HA、LN含量。结果 :各项检查结果均显示硒强化组和软肝胶囊组均优于秋水仙碱组 ;硒强化软肝胶囊组改善肝功能、抗肝纤维化作用明显优于软肝胶囊组 ,但两组间无统计学意义。结论 :软肝胶囊有显著降低大鼠实验性肝纤维化反应 ,增强机体抗肝纤维化损伤能力的作用 ,这种作用在经硒强化后尤为明显。 丁里玉 刘殿武 贺宇彤关键词:肝纤维化 免疫学 肝脏 荧光标记mRNA差异显示法研究中药对肝星状细胞基因表达的影响 被引量:15 2003年 目的 :用荧光标记 m RNA差异显示方法研究抗纤维化中药作用于肝星状细胞过程中基因表达的变化。方法 :分离培养肝星状细胞 (HSC) ,分别由正常大鼠血清和中药大鼠血清处理 HSC,用荧光标记 m RNA差异显示方法分离中药血清抑制或者诱导 HSC表达的特异基因。结果 :用荧光标记 m RNA差异显示方法共分离得到 c DNA差异片段 4 5条。结论 :荧光标记 m RNA差异显示方法是一种快速、敏感。 朱冰 刘殿武 崔俊生 郭丽丽关键词:荧光标记 MRNA差异显示 中药 星状细胞 转化生长因子-β_1抗体对体外培养肝星状细胞内皮素和一氧化氮的影响 被引量:1 2007年 目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)抗体对肝星状细胞(HSC)分泌一氧化氮(NO)和内皮素-1(ET-1)的影响.方法:HSC以1×10^8/L的密度接种于细胞培养皿中,37℃,50mL/L CO2条件下培养24h进行以下分组实验,每组重复4个培养皿:①HSC空白对照组;②HSC+TGF-B1抗体.TGF-β1抗体为5—20mg/L,继续培养24h.取培养上清液,用硝酸还原酶法测定NO水平,化学比色法测定一氧化氮合成酶(NOS)活性,酶联免疫吸附(ELISA)双抗体夹心法检测ET-1含量.结果:TGF-β1抗体能明显抑制HSC分泌ET-1,且随着抗体剂量的增加ET-1含量降低,对照组、10,15mg/L TGF-β1抗体组分别为(8.50±0.46),(5.33±0.27),(3.69±0.33)μg/L,且各剂量组之间两两比较差异均有统计学意义(P〈0.05);随着TGF-B,抗体剂量加大,iNOS活性和N0的合成增加,对照组,10,15mg/L TGF-β1,抗体组分别为(1.94±0.16)、(3.29±0.42),(3.88±0.32)ku/L和(46.75±4.72),(80.68±5.44),(88.58±2.84)μmol/L.结论:TGF-β1抗体能降低HSCET-1水平,增加NO含量. 肖永红 刘殿武 张浩关键词:转化生长因子-Β1 抗体 肝星状细胞 内皮素 一氧化氮 肝再生增强因子重组质粒在大鼠肝组织中的表达 2006年 李青 刘殿武 何海艳 肖永红 刘英丽关键词:肝再生增强因子 肝纤维化大鼠 重组质粒 肝组织 肝细胞增殖 抗转化生长因子-β_1抗体对肝星状细胞内Ca^(2+)的影响 2004年 肖永红 刘殿武 李青关键词:钙 星形细胞 抗体特异性 荧光标记mRNA差异显示技术分离肝纤维化相关基因 2005年 张丽梅 刘殿武 王晓波 张晓林 刘建波关键词:肝硬化 基因 MRNA差异显示 抗纤Ⅰ号复方药物血清对肝星状细胞内钙离子的影响 被引量:1 2004年 肖永红 刘殿武 李青关键词:方剂 肝星状细胞 显微镜检查 共焦