国家自然科学基金(81070014)
- 作品数：6 被引量：13H指数：3
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- 布地奈德对人气道上皮9HTEo-细胞增殖的影响及机制
- 2011年
- 探究布地奈德（budesonide,BUD）对人气道上皮9HTEo-细胞增殖的影响及机制,利用CCK-8法检测BUD对9HTEo-细胞增殖的影响,荧光显微镜观察经BUD处理后9HTEo-细胞形态的改变,流式细胞术检测细胞周期分布变化,Western blot检测p27kip1蛋白表达.CCK-8法结果显示3-10μmol/L BUD对细胞具有显著的抑制作用（P〈0.01）;荧光显微镜下,1-10μmol/L BUD处理后细胞可见明显的增殖受抑、凋亡形态;流式细胞术检测G0/G1期细胞随着BUD浓度的增加而增多,S期细胞逐渐减少;Western blot检测结果提示BUD能使p27kip1表达增加.由此可见,BUD对人气道上皮细胞株9HTEo-具有显著增殖抑制作用,其作用与提高p27kip1蛋白的表达,将细胞阻滞在G0/G1期有关.
- 余圆兰符州张明香刘恩梅罗征秀戴继宏王丽佳
- 关键词：布地奈德细胞增殖P27KIP1蛋白
- CXCR4在哮喘小鼠肺组织中的表达及氯喹的干预作用被引量：2
- 2014年
- 目的检测哮喘小鼠中趋化因子受体CXCR4的表达及其拮抗剂氯喹（CQ）的干预作用。方法将6-8周SPF级Balb/c小鼠随机分成对照组、哮喘组和氯喹干预组,哮喘组和氯喹干预组用鸡卵清蛋白（OVA）致敏和激发建立哮喘小鼠模型,干预组于激发前30 min给予CQ,连续3 d,对照组用PBS代替。最后1次激发24 h内小鼠肺功能仪检测小鼠气道高反应;最后1次激发48 h内检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数及细胞分类计数;HE染色光镜下观察肺组织的病理炎症改变,免疫组化染色检测肺组织CXCR4的表达;荧光定量PCR（Q-PCR）测定肺组织中CXCR4 mRNA的表达。结果哮喘组气道高反应及BALF中细胞总数明显高于对照组,干预组小鼠气道高反应及BALF中细胞总数与哮喘组相比显著降低;BALF中哮喘组嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和单核细胞数较空白组显著增加,而氯喹干预组较哮喘组显著减低;HE染色结果显示哮喘组肺部炎症细胞浸润明显,干预组与哮喘组相比明显减轻,病理评分降低;免疫组化显示哮喘组CXCR4在气道上皮细胞呈强阳性表达,干预组表达呈弱阳性;哮喘组CXCR4 mRNA的表达较对照组升高,氯喹干预组较哮喘组CXCR4 mRNA表达量降低;CXCR4表达量与BALF细胞总数呈正相关。结论 CXCR4可能参与哮喘小鼠的气道炎症和气道高反应的发生,氯喹能改善哮喘小鼠的气道高反应和气道炎症可能与拮抗CXCR4相关,为氯喹治疗哮喘提供理论和实验依据,为开发治疗哮喘新药提供新的思路。
- 胡晓燕孙晓春刘娜王莉佳刘恩梅罗征秀戴继宏符州
- 关键词：哮喘趋化因子受体CXCR4氯喹
- Wnt5a在哮喘小鼠肺组织中的异常高表达被引量：6
- 2015年
- 目的探究WNT5a在小鼠支气管哮喘模型肺组织中的表达。方法将24只脱敏饮食3周的6周龄Balb/c小鼠随机分为2组：对照组和哮喘组。哮喘组小鼠在第0、14天分别腹腔注射0.2 ml致敏液[100μg OVA,100μl PBS,100μl Al（OH）3凝胶]致敏,于第21-30天1%OVA雾化。对照组小鼠在同时间给予同剂量的PBS。于最后1次处理后masson染色观察小鼠肺组织上皮下纤维化的情况,QT-PCR检测小鼠肺匀浆中Wnt5a、TGF-β1的分子表达,Western blot检测肺匀浆中Wnt5a的蛋白表达。结果哮喘组小鼠上皮下纤维化增多,TGF-β1表达增加;肺组织中Wnt5a较对照组表达增加。结论小鼠哮喘模型肺匀浆中Wnt5a在分子和蛋白水平表达较对照组明显增加,这可能和哮喘中气道重塑相关。
- 刘娜牛超胡晓燕徐洁刘恩梅罗征秀代继宏彭东红符州
- 关键词：支气管哮喘WNT5A小鼠
- 氯喹对哮喘小鼠气道高反应性的抑制作用被引量：3
- 2015年
- 目的探讨氯喹对哮喘小鼠气道高反应性的作用及其可能机制。方法 Balb/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、氯喹治疗组、地塞米松治疗组、氯喹+地塞米松治疗组,除对照组外,其余各组小鼠均给予OVA致敏和激发,建立哮喘小鼠模型,于每次激发前腹腔注射给药,对照组则于同一时间予等量PBS处理,末次激发后24 h内小鼠肺功能仪检测小鼠气道高反应性;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类计数;制作肺组织病理切片,HE染色后光镜下观察病理变化;ELISA检测支气管肺泡灌洗液中细胞因子IL-6、PGF2α水平。结果氯喹可明显降低哮喘小鼠气道高反应性(吸入25 mg/ml Ach时4.5±0.4 vs 6.1±0.9,P<0.05,吸入50 mg/ml Ach时4.6±0.5 vs 8.2±1.0,P<0.001);明显降低哮喘小鼠支气管肺泡灌洗液中炎症细胞数(P<0.01);显著降低哮喘小鼠病理评分(P<0.05);可一定程度降低哮喘小鼠BALF中PGF2α因子水平;与地塞米松合用可明显减轻哮喘小鼠支气管细支气管周围炎症(P<0.05)、血管周围炎症(P<0.01)、肺组织病理评分(P<0.001),明显降低哮喘小鼠BALF中IL-6因子水平(P<0.05)。结论氯喹可抑制哮喘小鼠气道高反应性;地塞米松与氯喹合用较单独用药效果更好,可能对中性粒细胞参与的哮喘有效。
- 孙晓春胡晓燕王莉佳刘恩梅符州
- 关键词：哮喘氯喹气道高反应性IL-6PGF2Α
- 糖皮质激素诱导人气道上皮细胞9HTE_0凋亡的研究
- 2011年
- 目的探讨不同浓度及不同时间的糖皮质激素诱导人气道上皮细胞9HTE0凋亡的机制。方法采用Annexin V/PI双染法检测低浓度组(0.3μmol/L)、中浓度组(3μmol/L)、高浓度组(10μmol/L)地塞米松(dexamethasone,Dex)作用6 h、12 h、24 h对人气道上皮细胞9HTE0早期凋亡的比例变化;RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax mRNA的表达情况;细胞免疫荧光法检测Bcl-2、Bax蛋白的定位及表达情况。结果 Annexin V/PI双染法检测中、高浓度组Dex在作用12 h、24 h后,早期凋亡率较正常组有显著性差异(P<0.05);Bcl-2 mRNA于高浓度组Dex作用6 h后即出现变化,而在中、高浓度组Dex作用12 h及24 h后,Bcl-2 mRNA均显著下降(P<0.05),Bax mRNA均显著增高(P<0.05);Bcl-2、Bax蛋白定位于细胞核和细胞浆中,中、高浓度组Dex作用24 h后荧光有明显变化。结论糖皮质激素作为哮喘一线用药,诱导了人气道上皮细胞9HTE0凋亡同时使其具有浓度和时间依赖性,从而为气道上皮的损伤提供了理论依据。
- 刘静月符州罗征秀王莉佳李欣
- 关键词：气道上皮细胞凋亡BCL-2BAX
- 糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白(GILZ)在人气道上皮细胞中的表达及对MAPK信号通路的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白(GILZ)在人气道上皮细胞9HTE0中的表达以及对MAPK信号通路因子Raf-1、Mek1/2、Erk1/2的影响。方法:采用RT-PCR及Western blot法检测地塞米松(Dex)作用后GILZ mRNA及蛋白的表达,同时细胞免疫荧光法检测GILZ蛋白的定位;合成三条GILZ-SiRNA分别转染人气道上皮细胞9HTE0,用Q-PCR及Western blot法筛选出沉默效果最佳的一条;Western blot法检测MAPK信号通路因子Raf-1、Mek1/2、Erk1/2磷酸化蛋白及其总蛋白的表达。结果:Dex能够明显刺激人气道上皮细胞9HTE0GILZ mRNA及蛋白的表达,GILZ蛋白主要定位在细胞浆中,Dex抑制了Raf-1、Mek1/2、Erk1/2磷酸化蛋白的表达,而GILZ-SiRNA转染后,Raf-1.Mek1/2、Erk1/2磷酸化水平有所回升。结论:糖皮质激素作为支气管哮喘一线用药,虽然能够诱导GILZ表达并发挥一定的抗炎作用,但同时GILZ却抑制了在气道上皮修复中起重要作用的MAPK信号通路的激活,这为临床上研究哮喘防治新措施提供了理论依据。
- 刘静月符州张明香刘恩梅罗征秀王莉佳
- 关键词：糖皮质激素气道上皮细胞MAPK支气管哮喘
