云南省自然科学基金(2002C0023Q)
- 作品数:2 被引量:11H指数:1
- 相关作者:杨红军赵彬赵晶更多>>
- 相关机构:成都军区昆明总医院昆明医学院第一附属医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- β分泌酶抑制剂体外筛选模型的构建与验证被引量:1
- 2006年
- 目的构建β分泌酶抑制剂筛选模型用于治疗阿尔采末病药物筛选。方法克隆人β分泌酶基因,并在大肠杆菌中表达,经纯化、复性后获得重组蛋白。以重组β淀粉样肽融合蛋白为底物,体外建立酶学反应。酶切反应液用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,或将其包被金属螯和酶标板,用抗β淀粉样肽抗体行ELISA检测。结果用RT-PCR法克隆了人β分泌酶基因,构建入表达载体,诱导表达后获得高效表达。建立体外酶学反应,用ELISA和SDS-PAGE检测,二者检测结果一致,且用所构建方法测得阳性抑制剂的IC50值与文献报道吻合。对77种用于老年痴呆治疗的中草药提取物进行筛选,仅发现有17种显示微弱的β分泌酶抑制活性。结论成功构建了β分泌酶抑制剂筛选模型并用于中草药提取物活性筛选。
- 赵彬杨红军赵晶
- 关键词:Β分泌酶阿尔采末病ELISA
- β淀粉样肽聚集抑制剂体外筛选模型的建立及木栓酮抑制活性研究被引量:10
- 2005年
- 目的从天然药物中筛选β淀粉样肽聚集抑制剂。方法建立β淀粉样肽聚集抑制剂筛选模型的酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法,同时使用刚果红结合试验和硫磺素T分析试验对部分中草药提取物进行活性筛选,并对活性部位进行分离跟踪。结果灯盏细辛乙醇提取物显示β淀粉样肽聚集抑制活性,经跟踪分离测定发现其所合成分木栓酮为抑制作用活性成分。结论成功地建立了一种基于ELISA原理的β淀粉样肽聚集抑制剂筛选模型;用该模型筛选到灯盏细辛提取物及其所含化学成分木栓酮具有抑制β淀粉样肽体外聚集的活性。
- 赵彬杨红军赵晶
- 关键词:Β淀粉样肽木栓酮灯盏细辛