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L型钙离子通道在体外鼠牙胚发育中的表达被引量：1: 2013年; 目的观察L型钙离子通道在体外培养的牙胚发育过程中表达的时空特异性。方法取20只18 d胎龄的ICR孕鼠下颌第一磨牙牙胚,用Trowell培养系统进行培养。分别培养4 d、7 d,用小鼠抗Cav1.1单克隆抗体、兔抗Cav 1.2、Cav 1.3、Cav 1.4多克隆抗体进行免疫组织化学染色,光镜下观察在小鼠牙胚发育的不同阶段L型钙离子通道各种亚型的表达情况。结果 Cav 1.2和Cav 1.3在E 18 d、培养4 d、培养7 d时在不同的部位都有表达,但表达的强弱不同。未见有Cav 1.1和Cav 1.4的表达。结论 L型钙离子通道在牙胚发育过程中的表达具有时空特异性。; 李艳赵守亮梁丽许多; 关键词：牙胚 L型钙离子通道

L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体对人牙本质形成的影响研究被引量：3: 2007年; 目的:采用人牙齿切片体外器官培养的方法研究L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体对牙本质形成的影响。方法:收集年轻人健康前磨牙,用慢速切锯制备2 mm厚的牙齿横切片,将在L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体中浸泡过的琼脂糖微球与在PBS液中浸泡过的琼脂糖微球对称放置在牙片上,将切片用含琼脂糖的半固体培养基包被后采用Trowel器官培养方法培养1周,观察其对牙本质形成和矿化的影响。结果:L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体组四环素线状荧光带较对照组变细,von Kossa染色前期牙本质处球状矿化也较对照组减少,I型胶原免疫组化染色显示实验组与对照组无明显区别。结论:L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体能够影响牙本质的矿化,但对牙本质基质的合成和分泌无明显影响。该结果提示成牙本质细胞膜上的L型钙离子通道α1亚基D亚型对牙本质矿化过程中的钙离子转运有重要作用。; 朱晓茹赵守亮唐荣银张蓉李玉成; 关键词：器官培养矿化牙本质形成

后牙复合树脂修复各类洞形4年临床疗效评估被引量：5: 2007年; 目的:采用USPHS&Ryge标准,对比评估后牙复合树脂CLEARFIL AP-X/SE BOND在成人后牙不同洞形(牙合面洞、邻牙合面洞、牙颈部洞)的4年临床疗效。方法:对61人、100个患牙(牙合面龋51,邻牙合面龋20,牙颈部龋29)进行复合树脂充填修复。分别于治疗后1、2、4年对修复体的保存率以及边缘密合性、继发龋、表面粗糙度、颜色匹配状况、边缘着色、磨耗、牙龈健康状况进行疗效评估。结果:CLEARFIL AP-X的4年保存率达到97%;磨耗、继发龋、边缘密合性、边缘着色、粗糙度、色泽匹配和牙龈刺激性的疗效评估结果满意率分别为:92.6%、92.6%、92.6%、77.9%、93.7%、77.9%和100%。1年与4年疗效存在明显统计学差异(P<0.05),但是各洞形之间的保存率和临床疗效没有明显差异。结论:后牙复合树脂CLEARFIL AP-X在不同洞形的修复治疗中具有良好的临床适用性。; 叶楠卫克文吴补领; 关键词：后牙复合树脂

尼莫地平对人牙本质形成的影响被引量：2: 2008年; 目的采用人牙齿切片体外器官培养的方法研究尼莫地平对牙本质形成的影响。方法收集年轻人健康前磨牙,用慢速切锯制备2mm厚的牙齿横切片,将在尼莫地平溶液中浸泡过的琼脂糖微球与在PBS液中浸泡过的琼脂糖微球对称放置在牙片上,将切片用含琼脂糖的半固体培养基包被后采用器官培养方法培养1周,观察其对牙本质形成的影响。结果尼莫地平处理后四环素线状荧光带较对照组变细、变淡,Von-Kossa染色前期牙本质处球状矿化也较对照组减少,透射电镜显示实验组成牙本质细胞内的分泌小泡与对照组相比略有增多,但是Ⅰ型胶原免疫组化染色显示实验组和对照组无明显区别。结论尼莫地平能够影响牙本质的矿化形成,但对牙本质基质的合成和分泌无明显影响。; 朱晓茹张蓉李玉成唐荣银赵守亮; 关键词：器官培养尼莫地平矿化牙本质形成

周期性张应变对人牙髓细胞形态、存活率和增殖活性的影响: 2009年; 目的:研究周期性张应变对人牙髓细胞形态、存活率和增殖活性的影响。方法:取新鲜拔除的健康恒牙牙髓,采用组织块贴壁法培养原代人牙髓细胞,通过Flexcell细胞应力培养系统,分别加载2%和8%的周期性张应变,加载频率为1Hz,加载时间分别为0.5h、12h及24h,以未加载的静态细胞作为对照组。应用倒置相差显微镜、台盼蓝法及MTT法分别检测细胞形态、存活率和增殖活性的变化。数据采用SPSS16.0软件包进行单因素方差分析。结果:张应变加载后,贴壁的牙髓细胞形态为长梭形,有明显的极性突起,并且排列趋向一致,加载24h变化更明显。2%、8%加载组细胞的存活率显著大于对照组,12h加载组细胞存活率最高,24h加载组略有下降。2%、8%加载组细胞的增殖能力与对照组相比增加,2%组加载24h增加最明显(P<0.01)。结论:周期性张应变对离体培养的人牙髓细胞形态、存活率和增殖活性有明显影响,并呈应变大小和时间依赖性。; 余晶谢亚佳许多赵守亮; 关键词：周期性张应变人牙髓细胞细胞形态存活率增殖活性

人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性基因的克隆、原核表达和纯化被引量：6: 2006年; 目的:获得原核表达的人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性蛋白。方法:采用RT-PCR技术从人成牙本质样细胞系中获得cDNA,亚克隆至PUC18载体中,经测序确认后,将该基因插入原核表达载体pProEXHTb中,通过电穿孔技术转化E.coli表达菌DH5α,以IPTG诱导蛋白表达,并经Ni-NTA亲和柱层析纯化,SDS-PAGE鉴定。结果:获得的人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性cDNA序列与GenBank登录的cDNA序列一致。结论:成功克隆人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性基因,建立了原核表达、纯化体系,制备了纯化的人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性蛋白。; 吕海鹏史俊南赵守亮张伟滑玮雷迎峰Athony J.Smith; 关键词：原核表达蛋白纯化

周期性张应变对人牙髓细胞L型钙离子通道基因表达的影响被引量：4: 2009年; 目的:研究机械张应变对人牙髓细胞L型钙离子通道基因表达的影响。方法:取新鲜拔除的健康恒牙牙髓,采用组织块贴壁法培养原代人牙髓细胞,通过Flexcell细胞应力培养系统,分别施加2%和8%的周期性张应变,加载时间分别为0.5、12、24 h,观察机械牵张力对人牙髓细胞L型钙离子通道不同亚型表达的影响。结果:人牙髓细胞(HDPCs)主要表达L型钙离子通道α1亚基C亚型(L type calcium channelα1 Csubunit,Cav1.2)和L型钙离子通道α1亚基D亚型(Ltype calcium channelα1 D subunit,Cav1.3),未见L型钙离子通道α1亚基S亚型(L type calcium channelα1 S subunit,Cav1.1)和L型钙离子通道α1亚基F亚型(Ltype calcium channelα1 F subunit,Cav1.4)的表达。在2%和8%张应变下,加载0.5 h至12 h Cav1.2和Cav1.3均有上调(P<0.05),而加载24 h后2个亚型与对照组间均无明显差异(P>0.05)。结论:人牙髓细胞主要表达Cav1.2和Cav1.3,应力和作用时间对L型钙离子通道表达量有明显影响。; 谢亚佳余晶许多赵守亮; 关键词：周期性张应变人牙髓细胞 L型钙离子通道

人成牙本质细胞L型钙离子通道α_1亚基D亚型特异性基因原核表达质粒的构建和鉴定被引量：2: 2006年; 目的:构建人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性基因原核表达质粒。方法:采用RT-PCR技术从人成牙本质样细胞系中获得cDNA,将该基因插入原核表达载体pProEXHTb中,通过电穿孔技术转化E.coli表达菌DH5α,随机挑选阳性克隆并提取质粒酶切鉴定,同时对阳性克隆进行测序鉴定。结果:获得的人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性cDNA序列,与GenBank登录的cDNA序列一致。结论:成功地构建了人成牙本质细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性基因原核表达质粒。; 吕海鹏史俊南滑玮张伟Athony J.Smith4赵守亮; 关键词：基因克隆原核表达

人成牙本质细胞样细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性基因的表达、纯化和多克隆抗体的制备: 目的:获得原核表达的人成牙本质细胞样细胞L型钙离子通道α1亚基D亚型特异性蛋白,并制备其多克隆抗体。方法: 采用RT-PCR技术从人成牙本质细胞样细胞系中获得cDNA,亚克隆至PUC18载体中,经测序确证后,将该基因插入...; 吕海鹏史俊南赵守亮Athony J．Smith; 关键词：钙离子通道成牙本质细胞基因克隆; 文献传递

人成牙本质细胞的分离和鉴定被引量：6: 2005年; 　目的:分离并鉴定完整的成熟人成牙本质细胞。方法:收集人健康恒牙,采用胶原酶和蛋白酶联合消化法分离出成牙本质细胞,并对分离出的细胞进行细胞形态学和免疫组织化学鉴定。结果:实验分离出的细胞为柱状或立方状,有较长的细胞突起,具有典型的成牙本质细胞形态,免疫组化染色显示细胞表达Ⅰ型胶原、DMP1和DSP蛋白。结论:本研究分离得到了完整的成熟人成牙本质细胞,为后期研究成牙本质细胞的分化、功能及特点奠定基础。; 宋玮赵守亮石勇何文喜; 关键词：细胞分离细胞鉴定

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