国家自然科学基金(30671848)
- 作品数：5 被引量：37H指数：4
- 相关作者：唐家琪潘秀珍王长军郑峰葛俊超更多>>
- 相关机构：中国人民解放军南京军区军事医学研究所北京华大基因研究中心南京医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 猪链球菌2型唾液酸合成酶neuB基因敲除突变株的构建及其生物学特性被引量：8
- 2009年
- 利用同源重组基因敲除方法构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33唾液酸合成酶neuB基因敲除突变株。PCR和Southern杂交结果均显示neuB基因在1株转化重组体中完全被壮观霉素抗性基因替代,表明neuB基因敲除突变体构建成功。生物学特性鉴定显示,突变体与强毒株在菌落形态、溶血活性以及染色特性方面均无明显差异;电镜检查发现突变体表面结构组分与强毒株有显著差异,荚膜明显变薄,质地更加紧密;小鼠致病性试验结果显示,突变体毒力显著减弱。研究结果提示菌体荚膜中的唾液酸对于猪链球菌2型侵袭和致病具有重要作用。
- 董瑞萍王长军程功李明王晶潘秀珍唐家琪
- 关键词：猪链球菌2型基因敲除生物学特性
- gdh基因在猪链球菌中的分布及重组GDH的抗原性研究被引量：7
- 2008年
- 目的了解谷氨酸脱氢酶基因(gdh)在不同血清型猪链球菌(S.suis)中的分布情况,分析重组谷氨酸脱氢酶(GDH)的抗原性,为其应用于S.suis感染诊断和疫苗研究提供实验数据。方法应用PCR方法检测不同血清型S.suis中的gdh;利用45 kD重组GDH制备多克隆抗体,Western blot方法分析S.suis各血清型菌株与多克隆抗体的反应以及实验感染S.suis2型的猪血清与重组GDH的反应情况。结果在S.suis35个血清型标准株中,除了22、26、27、29、32及34型以外,其余包括1、2、1/2、7、9和14型在内的29个血清型、61株国内外S.suis2型分离株全部扩增出目的条带。用重组GDH免疫小鼠,在小鼠血清中均检测到抗GDH的抗体;Western blot结果显示,全部被检菌株与抗GDH血清反应均有单一特异性反应条带,6份实验感染猪血清均能与重组GDH产生反应条带。结论重组GDH具有免疫原性和反应原性,该蛋白有可能作为建立诊断试验的候选抗原,为进一步开展相关的血清学诊断方法和疫苗研究奠定基础。
- 潘秀珍赵华梅葛俊超王长军李先富郑峰唐家琪
- 关键词：猪链球菌谷氨酸脱氢酶抗原
- 江苏省中部地区猪链球菌主要致病血清型分子流行病学调查被引量：6
- 2008年
- 目的了解江苏省中部地区正常猪群猪链球菌及主要致病血清型分布。方法采集江苏省中部地区正常屠宰猪样本303份，用聚合酶链反应（PCR）法进行猪链球菌及主要致病血清型的检测，并对3株分离的猪链球菌菌株进行系统的生物学和分子遗传学鉴定。结果303份猪标本中，2005年正常猪群中猪链球菌的携带率达88．0％，其中1（或14）型、2（或1／2）型、7型和9型携带率分别为9．6％、8．5％、11．3％、29．5％；2006年正常猪群中猪链球菌的携带率为82．5％，1（或14）型、2（或1／2）型、7型和9型携带率分别为17．6％、2．4％、25．8％、20．0％；3株分离菌株均为2型，2a毒力因子表现型为cps2^＋／gdh^＋／mrp^-／epf^-／sly^-／fops^＋／orf2^＋／89k^-，2f、14e毒力因子表现型均为cps2^＋／gdh^＋／mrp^-／epf／sly^-／fbps^-／orf2^-／89k；3株分离菌株对阿莫西林、氨苄西林、青霉素等高度敏感，但对阿米卡星和四环素有显著的耐药性；对BALB／c小鼠和家兔无明显致病性。结论江苏省中部地区正常猪群中猪链球菌携带率处于较高水平，多种血清型同时存在，毒力因子表型与流行毒力株有显著差异。
- 鞠爱萍王长军郑峰潘秀珍董亚青葛俊超陆承平唐家琪
- 关键词：猪链球菌聚合酶链反应流行病学分子
- 猪链球菌基因芯片检测方法的研究被引量：15
- 2008年
- 目的建立猪链球菌基因芯片检测方法,实现对猪链球菌种、致病血清型及毒力相关基因的同步检测和鉴定。方法根据GenBank中猪链球菌的相关序列,设计并合成探针,采用点样法制备芯片;检测样本基因组DNA标记后与基因芯片杂交,激光扫描检测信号。结果检测结果显示,针对猪链球菌种、主要致病血清型及主要毒力相关基因设计的寡核苷酸探针可特异地识别对应靶基因,重复性好;而针对不同菌株设计的株特异性探针未获得预期检测效果。结论初步建立猪链球菌基因芯片检测体系,敏感性与特异性高,对于高通量鉴定猪链球菌菌种及其毒力有重要价值。
- 郑峰王长军曾海攀董亚青鞠爱萍潘秀珍朱进唐家琪
- 关键词：猪链球菌基因芯片血清型毒力
- 应用上转换发光技术快速检测抗2型猪链球菌抗体被引量：2
- 2008年
- 目前，国内针对猪链球菌2型（S．suis2）抗体的检测方法仅限于用ELISA进行实验室分析，而且各种免疫学检测方法均有一定的非特异性反应。因此，建立适用于现场的S．suis2抗体快速检测方法，对于流行区疫情监测预警、早期控制以及临床诊断均有重要的应用价值。
- 郑峰周蕾葛俊超魏华潘秀珍季红峰朱进杨瑞馥唐家琪
- 关键词：2型猪链球菌抗体
