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国家自然科学基金(30671852)

作品数:5 被引量:25H指数:2
相关作者:刘宏生郑方亮朱春玉艾海新朱俊丰更多>>
相关机构:辽宁大学辽宁省生物大分子计算模拟与信息处理工程技术研究中心更多>>
发文基金:国家自然科学基金辽宁省教育厅高校重点实验室项目病毒学国家重点实验室开放研究基金更多>>
相关领域:生物学农业科学轻工技术与工程自然科学总论更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学
  • 2篇农业科学
  • 1篇轻工技术与工...
  • 1篇自然科学总论

主题

  • 3篇禽流感
  • 3篇禽流感病
  • 3篇禽流感病毒
  • 3篇流感
  • 3篇NS1蛋白
  • 3篇病毒
  • 1篇亚细胞
  • 1篇亚细胞定位
  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇生物学
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞定位
  • 1篇克隆及原核表...
  • 1篇核表达
  • 1篇NS
  • 1篇NS1
  • 1篇NS1基因
  • 1篇PHAGE_...
  • 1篇PROTEI...

机构

  • 4篇辽宁大学
  • 1篇辽宁省生物大...

作者

  • 4篇刘宏生
  • 3篇艾海新
  • 3篇朱春玉
  • 3篇郑方亮
  • 2篇孙婷婷
  • 2篇商玲玲
  • 2篇朱俊丰
  • 2篇王宁
  • 1篇段艳婷
  • 1篇赵丹
  • 1篇朱俊峰
  • 1篇白婷婷
  • 1篇姜秋实

传媒

  • 2篇微生物学杂志
  • 1篇动物医学进展
  • 1篇辽宁大学学报...
  • 1篇Chemic...

年份

  • 1篇2013
  • 1篇2012
  • 3篇2011
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
禽流感病毒H5N1亚型NS1蛋白的研究进展被引量:2
2013年
NS1蛋白(non-structural protein 1)是A型流感病毒重要的非结构蛋白,作为流感病毒的致病因子,NS1通过多种方式增强病毒的致病性和毒力。就H5N1禽流感病毒NS1蛋白的结构与功能进行了综述。
刘宏生赵丹段艳婷
关键词:NS1H5N1禽流感病毒
“太岁”生物学组分的研究被引量:18
2011年
"太岁"是一种存在于地球上分类地位尚不清楚的生物体。对实验室保藏的7种不同的"太岁"样品进行了生物学组分的定性定量分析,旨在科学地了解"太岁"的组成成分,同时为"太岁"有效成分的开发利用和分类鉴定提供理论依据。对实验室保藏的7种"太岁"样品做生物组分及含量分析,具体包括:苯酚硫酸法测粗多糖含量、凯氏定氮法测粗蛋白含量、索氏提取法测粗脂肪含量、钒钼酸显色法测核酸含量、灼烧重量法测粗灰分含量、恒温干燥法测水分含量、原子吸收法测微量元素含量。实验结果表明,7种"太岁"样品含水量均较高,除LNUT006含水量73.58%外,其余"太岁"样品均达到90%以上;"太岁"样品中粗多糖含量在8.97~46.57 mg/g之间,其中LNUT006多糖含量明显高于其他"太岁"样品;粗蛋白含量在20.35~184.18 mg/g之间,其中LNUT006蛋白含量明显高于其他"太岁"样品;"太岁"样品中净核酸含量在2.053~35.128 6μg/g之间;灰分含量在42.93~246.4 mg/g之间;"太岁"样品钙、铁含量较高,分别为2 907.09μg/g和3 929.09μg/g,铅、镉含量最低。首次对未知生物"太岁"样品的组成成分进行初步系统的研究,为明确其组分和对其进一步的开发利用均有很重要的意义。
朱春玉白婷婷姜秋实郑方亮艾海新朱俊丰刘宏生
禽流感病毒NS1蛋白亚细胞定位研究被引量:1
2011年
为深入研究NS1蛋白的生物学功能,了解NS1蛋白在哺乳动物细胞中的分布和亚细胞定位情况。采用RT-PCR扩增出禽流感病毒NS1基因片段,克隆至载体pEGFP-N1,经酶切和测序鉴定后,将构建的重组质粒pEGFP-N1-NS1经脂质体介导转染293T细胞和Hela细胞,在荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察NS1在细胞中的分布、亚细胞定位情况。成功构建了真核重组表达质粒pEGFP-N1-NS1,并在293T细胞及Hela细胞中得到高效表达。融合蛋白发出的绿色荧光表明NS1蛋白主要分布在细胞核,在胞浆中有少量表达。本研究成功在哺乳动物细胞中表达NS1蛋白,并对其进行亚细胞定位,为流感病毒的相关功能研究奠定了基础。
朱春玉孙婷婷郑方亮艾海新朱俊丰王宁商玲玲刘宏生
关键词:禽流感病毒NS1蛋白亚细胞定位
H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及原核表达被引量:4
2011年
克隆、表达和纯化禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为筛选与NS1相互作用的宿主蛋白以及深入研究NS1蛋白的功能打下基础.根据GenBank中收录的H5N1亚型禽流感病毒NS1基因序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增AIV NS1基因,将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a载体上,经酶切分析及序列测定正确后,鉴定出NS1基因的阳性重组子.阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用1 mmol/L IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,通过Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对NS1蛋白进行纯化.结果成功克隆H5N1亚型AIV的NSl基因,其核苷酸序列长度为678 bp,重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,表达产物在上清及包涵体中均有表达.经纯化,目的蛋白纯度高达90%,成功表达纯化出28KD的NS1融合蛋白并鉴定其免疫学活性.成功克隆和表达了禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为进一步研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础.
朱春玉孙婷婷郑方亮艾海新朱俊峰王宁商玲玲刘宏生
关键词:NS1蛋白原核表达纯化
Screening of Proteins Interacting with Nonstructural 1 Protein of H5N1 Avian Influenza Virus from T7-phage Display Library被引量:1
2012年
Avian influenza virus(AIV) nonstructural 1(NS1) gene was amplified by real-time polymerse chain reac tion(RT-PCR) and inserted into pET28a, then transformed into E. coli BL21(DE3) competent cell. With the induction of isopropyl-β-D-thiogalactoside(IPTG) and the purification of Ni-NTA column, we finally obtained purified NS1 protein. T7-phage display system was used to screen the proteins that interacted with NS1 from lung cell cDNA li brary. The selected positive clones were identified by DNA sequencing and analyzed by BLAST program in Gene Bank. Two proteins were obtained as NS1 binding proteins, Homo sapiens nucleolar and coiled-body phosphoprotein 1(NOLC1) and Homo sapiens similar to colon cancer-associated antigen. By co-immunoprecipitation and other me thods, Homo sapiens NOLC1 was found to interact with the NS1 protein, the results would provide the basis for fur ther studying biological function of NS1 protein.
ZHU Chun-yu1,2, SUN Ting-ting2, ZHAO Jian1,2, WANG Ning1,2, ZHENG Fang-liang1, AI Hai-xin1, ZHU Jun-feng1,2, WANG Xiao-ying3, ZHU Ying4, WU Jian-guo4 and LIU Hong-sheng1,2 1. Key Laboratory of Animal Resource and Epidemic Disease Prevention of Liaoning Province, 2. Research Center for Computer Simulating and Information Processing of Bio-macromolecules of Liaoning Province, Academy of Science, Liaoning University, Shenyang 110036, P. R. China
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