国家科技支撑计划(2011BAD28B05-3)
- 作品数：11 被引量：54H指数：6
- 相关作者：曹斌云杨伟平彭甲银赵海波白龙更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学洛阳师范学院杨凌职业技术学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学更多>>
- 畜牧专业实践教学现状及改革策略被引量：3
- 2016年
- 实践教学是高等院校教育体系中的重要组成部分,旨在培养学生的实践操作能力。为了使高校畜牧专业能培养出能力强的应用型人才,满足市场需求,作者就高校畜牧专业实践教学的存在的问题提出了几点改革策略,希望能够提高高校畜牧专业的教学水平,促进高校畜牧专业毕业生顺利就业,推动畜牧业的发展。
- 安小鹏侯金星宋宇轩李广曹斌云
- 关键词：畜牧专业实践教学
- 脱脂羊脑蛋白酶解条件优化及酶解产物体外抗氧化活性被引量：6
- 2015年
- 以脱脂羊脑蛋白为原料,采用响应面(response surface method,RSM)法建立脱脂羊脑蛋白的枯草芽孢杆菌中性蛋白酶水解回归模型,优化酶解工艺条件,在体外研究脱脂羊脑中性蛋白酶酶解产物的抗氧化性能。结果表明:脱脂羊脑蛋白底物质量浓度为3.03 g/100 mL,酶添加量为5 653.20 U/g,温度为39.4 ℃时,脱脂羊脑蛋白水解度最高,达到(14.59±1.26)%。当脱脂羊脑蛋白水解度为(14.39±1.17)%时,酶解产物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和羟自由基(?OH)清除能力最强;当脱脂羊脑蛋白水解度为(12.48±0.71)%时 ,酶解产物对超氧阴离子自由基(O2-?)清除能力和总还原能力最强;当脱脂羊脑蛋白水解度为(12.48±0.71)%时,酶解产物对DPPH自由基、?OH、O2-?、亚硝酸根阴离子的IC50分别2.49、3.13、10.37、10.89 mg/mL,酶解产物对Fe2+螯合率的IC50为7.48 mg/mL,证明脱脂羊脑蛋白酶解产物具有一定抗氧化活性。
- 常飞杨雪果肖士成段旭昌
- 关键词：酶解产物响应面抗氧化活性
- 纤维素酶高产菌的筛选鉴定及纤维素酶基因的克隆与表达被引量：6
- 2012年
- 为寻找新纤维素酶和纤维素酶基因资源,以羧甲基纤维素钠(CMC)改良的BHM培养基筛选菌株,经初筛和复筛筛选出目的菌株后,采用革兰氏染色法和16SrDNA基因片段比对法对筛选出的菌株进行鉴定;设计引物对P扩增其纤维素酶基因,连于pET-28a(+)载体构建原核表达载体并转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,表达结果采用SDS-PAGE和测定表达产物活性的方法来检验。结果显示,本研究成功筛选出一株新的具有较高纤维素酶活的短小芽孢杆菌BY-1,该菌所产纤维素酶具有较好的热稳定性和酸碱稳定性,最适宜温度和pH分别为55℃和7.45,在此条件下最高酶活性为0.921 6μmol/(mL.min);此外,还成功克隆出1个1 851bp的纤维素酶新基因bglC-BY,具有GH9/CBM3纤维素酶结构,经IPTG诱导,SDS-PAGE图谱上于70ku有1个明显的蛋白条带,表达产物酶活性为0.541 3μmol/(mL.min)。本研究筛选出的短小芽孢杆菌内切纤维素酶活较高,具有一定的应用前景。
- 刘海艳白龙赵海波杨明明曹斌云
- 关键词：纤维分解菌纤维素酶基因克隆
- 枯草芽孢杆菌酸性内切葡聚糖酶的分离纯化及酶学性质
- 2015年
- 将来源于藏猪粪便的枯草芽孢杆菌BY-4菌株接种于含4%麸皮的产酶培养基中,37℃、220r/min培养48h,发酵上清液经HiTrap Phenyl HP疏水作用层析、HiPrep 16/60Sephacryl S-100凝胶过滤层析分离纯化得到一个内切葡聚糖酶组分,纯化倍数为15.5,回收率为25.0%。经SDS-PAGE、酶谱分析鉴定,两步分离纯化后为电泳纯的纤维素酶,相对分子量约为55 000。酶学性质研究表明,该酶的最适反应pH为4.5,最适反应温度为60℃。Mg2+、Zn2+对该酶有一定的激活作用,而Mn2+、Co2+、Ag+对该酶产生了抑制作用。
- 马丽孟凡旭杨伟平姬生跃辛海云曹斌云
- 关键词：枯草芽孢杆菌酸性纤维素酶分离纯化酶学性质
- 不同发酵剂对羊奶干酪成熟期间脂肪降解的影响
- 2012年
- 【目的】探讨3种发酵剂在羊奶干酪成熟期间对脂肪降解程度的影响。【方法】以鲜羊奶为原料,用嗜温发酵剂、嗜热发酵剂和混合发酵剂分别生产羊奶干酪,并在羊奶干酪成熟的第1,7,15,30,60和90天分别取样,测定其酸度值(ADV)、过氧化值(POV)、羰基价(CBV)和硫代巴比妥酸值(TBA)。【结果】3种发酵剂在羊奶干酪成熟期间对脂肪降解有明显的影响,用嗜热发酵剂生产的羊奶干酪在干酪成熟期间脂肪降解程度较高,其ADV和POV显著高于用嗜温发酵剂和混合发酵剂生产的羊奶干酪(P<0.05);CBV(干酪成熟的60～90d)显著高于嗜温发酵剂生产的羊奶干酪(P<0.05);TBA高于嗜温发酵剂和混合发酵剂生产的羊奶干酪,但差异不显著。用嗜温发酵剂和混合发酵剂生产的羊奶干酪脂肪降解程度较低。【结论】嗜温发酵剂和混合发酵剂可用于羊奶干酪生产。
- 宋社果安小鹏刘海燕曹斌云
- 关键词：发酵剂羊奶干酪脂肪降解
- 藏猪食草机理的研究——藏猪肠道微生物的多样性分析被引量：10
- 2013年
- 采用PCR/DGGE技术和16SrDNA序列分析方法,对2种猪(普通猪、藏猪)肠道细菌优势菌群结构进行了比较分析。研究结果表明,从DGGE图谱中均可以发现2种猪肠道细菌具有一定的相似性,种内个体间相似性明显高于种间相似性。同时进行了部分优势细菌16SrDNA基因V6～V8区序列的系统发育分析发现,DGGE图谱中优势条带的16SrDNA基因序列中有7条克隆的序列与基因库最相似菌的相似性大于97%,其余的克隆序列相似性在90%～96%,其中有1条序列被鉴定为与纤维素分解菌产琥珀酸厌氧螺菌相似。本试验分析结果可为进一步研究藏猪及其肠道微生物的特性及其食草机理提供依据。
- 肖文萍刘海艳赵海波白龙彭甲银刘雪青王建刚宋宇轩曹斌云
- 关键词：藏猪RDNA基因肠道微生物DGGE
- OSP-1启动子在奶山羊卵巢颗粒细胞中的转录活性
- 2013年
- 采用大鼠OSP-1启动子替换掉pcDNA3.1(+)中的CMV启动子,在其下游插入EGFP基因片段,构建载体pOSP-1-EGFP,脂质体转染不同细胞,利用荧光检测、RT-PCR以及相对定量PCR鉴定该启动子启动基因表达的活性。结果表明,在卵巢颗粒细胞、人卵巢癌细胞系HO-8910中可看到有绿色荧光;OSP-1片段只在卵巢颗粒细胞和人卵巢癌细胞系HO-8910有表达,并在人卵巢癌细胞系HO-8910中表达量较高,但是两者之间差异不显著。说明OSP-1启动子可调控外源基因在奶山羊卵巢颗粒细胞中特异性的表达。
- 白龙刘海艳赵海波彭甲银曹斌云
- 关键词：EGFP卵巢颗粒细胞RT-PCR
- 1株藏猪源枯草芽孢杆菌BY-2的益生特性分析被引量：9
- 2015年
- 评价了来自藏猪盲肠的1株生长快,能高效降解纤维素的细菌枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）BY-2的益生特性。结果表明,BY-2能够耐受高温,在65～85℃条件下培养20min,其存活率均达到90%及以上,均显著高于BY-2在100℃条件下的存活率（59.1%）（P〈0.05）。BY-2在人工胃液中培养,随着pH值的升高存活率呈上升趋势,在不同pH1～4下培养长达4h时,存活率为73.78%～83.61%,其中pH1条件下BY-2的存活率显著低于pH2～4的存活率（P〈0.05）。人工肠液和不同浓度胆盐对BY-2的存活率均有影响,但胆盐浓度对BY-2存活率的影响差异不显著（P〉0.05）,当在不同胆盐浓度的人工肠液中培养4h,BY-2的存活率均在75%以上。此外,BY-2的提取液对大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌均有强的抑制能力。由试验结果看,BY-2表现出强的抗逆特性及抗菌特性,具有作为猪源益生菌微生态制剂开发的潜力。
- 杨伟平彭甲银王方圆辛海云曹斌云
- 关键词：藏猪益生菌益生特性
- 脱脂羊脑蛋白水解多肽的分离纯化及抗氧化活性被引量：10
- 2016年
- 为制备羊脑蛋白抗氧化肽,本实验对脱脂羊脑蛋白含量及氨基酸组成进行了分析;采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)对枯草芽孢杆菌中性蛋白酶不同酶解时间的酶解液分子质量进行了分析;采用交联葡聚糖凝胶Sephadex G-25和Sephadex G-15对羊脑酶解产物进行了逐级分离纯化,以羟自由基(·OH)和亚硝酸根离子清除能力为指标对分离组分进行抗氧活性评价,并对纯化后的组分抗氧化活性进行了测定。结果表明,脱脂羊脑粉中蛋白含量为60.55%,在测定的17种氨基酸中,谷氨酸和天冬氨酸这两种酸性氨基酸含量最高,且含有7种必需氨基酸;羊脑蛋白经酶解后,分子质量集中在10 k D以下;经Sephadex G-25纯化后,得到了6个组分,其中组分F4的抗氧化活性最强,组分F4经Sephadex G-15纯化后,得到3个组分,其中组分F4-2的抗氧化活性最强,组分F4-2对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、·OH、超氧阴离子自由基(O_2^-·)、亚硝酸根离子的半数抑制率IC_(50)分别为1.64、2.47、7.98、5.14 mg/m L。
- 常飞杨雪果肖士成蒋鹏飞黄慧娜段旭昌
- 关键词：多肽分离纯化抗氧化活性
- 藏香猪源纤维素分解菌的分离鉴定及酶学特性分析被引量：12
- 2014年
- 本试验旨在从藏香猪盲肠内容物中分离筛选能够高效分解纤维素的菌株,并对该菌株进行鉴定和酶学特性分析。采用羧甲基纤维素平板法初筛和摇瓶发酵法复筛,从藏香猪盲肠内容物中分离筛选出1株能够高效降解纤维素的纤维素分解菌；结合该菌株的形态学特征、生理生化特性以及16 S rRNA基因序列的同源性对其进行分类鉴定；根据该菌株不同时间的生长特性和产酶特性评定其产酶能力；从其所产羧甲基纤维素酶反应的适宜pH、温度和时间来研究该菌株的酶学特性。结果表明：从藏香猪盲肠内容物中分离到了1株能够高效降解纤维素的菌株,经鉴定将其命名为枯草芽孢杆菌BY-2,该菌株为好氧的革兰氏阳性菌,有芽孢,且生长速率快、产酶早、产酶时间长。酶学特性分析表明：枯草芽孢杆菌BY-2产羧甲基纤维素酶的最适反应条件为pH 5.5、65℃下反应5 min,且其在pH 3~8的范围内具有强的酸碱稳定性。
- 杨伟平孟凡旭马丽姬生跃曹斌云
- 关键词：藏香猪纤维素分解菌酶学特性
