国家自然科学基金(31072060)
- 作品数：12 被引量：25H指数：3
- 相关作者：陈玉林杨明明杨雨鑫黄亚娟王磊更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学青海大学河南科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家绒毛用羊产业技术体系建设专项国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 知识图谱方法科学前沿进展实证分析——以动物肠道纤维素酶基因工程研究为例被引量：3
- 2012年
- 为了系统、全面、准确的反映动物消化道基因工程研究演进及知识间的联系,本研究以与该专业科研人员互动为基础确定检索式,通过高级检索,采用多元统计、战略坐标、社会网络分析等知识图谱方法,在分时段分析该领域前沿热点特征的同时,增加对该研究密切相关的非热点内容的观察,结果显示：该领域研究热点从个别酶研究开始,进而是一类酶的性质研究,目前的研究热点是纤维素酶类在糖尿病、高雪病等代谢疾病的应用研究,同时观察到2007~2010年该领域研究中罗伊氏乳杆菌Pg4、肉仔鸡、瘤胃微生物、益生菌等一些低频词与β-葡聚糖酶的联系和增长态势.说明精准检索、仔细求证、量化图解分析,热点轨迹跟踪,挖掘隐含信息是科研人员多视角科学观察,准确掌握科研动态,科学决策重要参考依据.
- 李雅黄亚娟杨明明陈玉林
- 关键词：知识图谱动物瘤胃纤维素酶基因工程
- 陕北白绒山羊瘤胃乳酸杆菌的分离鉴定及生物学特性研究
- 2014年
- 无菌采集陕北白绒山羊瘤胃内容物,梯度稀释后涂布CaCO3-MRS培养基,厌氧培养分离乳酸杆菌,并对分离菌株的生长、发酵液pH、酸耐受性、胆盐耐受性、抑菌性及有无内源质粒等生物学特性进行了比较研究。结果显示:从陕北白绒山羊瘤胃液中共分离出11株乳酸杆菌,经16S rDNA比对鉴定,分别是植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)4株(ZW-4、ZW-8、ZW-10、ZW-11),干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)2株(GL-1、GL-5),罗伊乳酸杆菌(Lactobacillus reuteri)2株(LY-6、LY-7),短乳杆菌(Lactobacillus brevis)1株(DR-9),棒状乳酸杆菌(Lactobacillus coryniformis)1株(BZ-2)及弯曲乳酸杆菌(Lactobacillus curvatus)1株(WQ-3)。在相同培养条件下,植物乳酸杆菌ZW-4和干酪乳酸杆菌GL-1生长、产酸以及抑菌能力较强,同时植物乳酸杆菌ZW-4对胆盐和酸的耐受能力强于其他菌株;在上述菌株中,仅罗伊乳酸杆菌LY-7没检测到内源质粒,而植物乳酸杆菌ZW-4有6个内源质粒,明显多于其他几株乳酸杆菌。结果表明,分离自陕北白绒山羊瘤胃的植物乳酸杆菌ZW-4和干酪乳酸杆菌GL-1具有优良生物学特性,初步具备了作为益生菌使用的基本条件。
- 方明建王磊胡艳平陈玉林
- 关键词：陕北白绒山羊乳酸杆菌生物学特性
- 日粮营养水平对22～40kg滩羊不同脂肪组织中FABP4 mRNA表达影响的研究被引量：1
- 2016年
- 为了探讨营养水平对22~40kg滩羊不同脂肪组织中FABP4mRNA表达的影响,为滩羊脂肪代谢的营养调控研究提供基础数据,本试验选择年龄、体重相近的健康滩羊112只,公母各半,随机分为4组,每组4个重复,每个重复7只羊。并参考肉羊饲养标准NY/T（816-2004）,根据生长阶段（22~28kg,29~35kg,36~40kg）,以目标增重设计标准日粮,每阶段设置4个营养水平,日粮能量和蛋白质水平分别为0.84×标准（Ⅰ组）、0.96×标准（Ⅱ组）、1.08×标准（Ⅲ组）和1.20×标准（Ⅳ组）,分别饲喂4组试验滩羊。于每阶段末每个重复屠宰1只试验羊,取尾部脂肪、肾周脂肪和皮下脂肪组织,通过实时荧光定量PCR检测FABP4mRNA表达水平。结果表明：（1）尾部脂肪和皮下脂肪FABP4mRNA的表达量随体重增加呈上升趋势;（2）Ⅰ组中,三个生长阶段滩羊肾周脂肪FABP4mRNA的表达量均显著高于尾部脂肪（P〈0.05）,皮下脂肪FABP4mRNA的表达量在第一阶段和第三阶段显著高于尾部脂肪（P〈0.05）;（3）Ⅱ组中,随着体重增加,尾部脂肪FABP4mRNA的表达量增速较快;（4）Ⅲ组中,随着体重增加,滩羊肾周脂肪FABP4mRNA的表达量增速较慢;（5）Ⅳ组中,第二阶段滩羊皮下脂肪FABP4mRNA的表达量显著高于尾部脂肪和肾周脂肪（P〈0.05）。因此,滩羊首先保证肾周脂肪沉积,且受营养水平影响较小,营养充足（或过剩）有利于增加皮下和尾部脂肪的沉积。
- 王小芳曾洁田崇奇王小龙杨雨鑫陈玉林张恩平
- 关键词：滩羊营养水平脂肪组织
- 产酸性木聚糖酶链霉菌的鉴定、酶学特性及发酵工艺研究被引量：1
- 2016年
- 木聚糖是谷物类饲料中的主要抗营养因子。为筛选高效降解半纤维素的菌株，提高粗饲料利用率，本试验采用水解圈法从土壤中筛选出1株产木聚糖酶的细菌，经鉴定为灰略红链霉菌，命名为Streptomyces griseorubens WL003。该菌所产木聚糖酶的最适酶促反应温度和pH分别为65℃、4．5，于30～55℃处理10min后，残余酶活不低于80％：于pH3．5～11．0处理1．5h，残余酶活仍保持在88％以上；Tween-80可提高木聚糖酶活力，而Cu^2＋．SDS及β-巯基乙醇则会较强地抑制酶活。该菌株以9％接种量接种至最适发酵培养基，碳源为10％麦秸，氮源为1．41％牛肉膏，0．1％吐温-80，初始pH为6．0，经32℃、180r／min下培养7d时，所产木聚糖酶活性最高，可达50．82u／InL，为优化前2．5倍。菌株WL003对麦秸的粗纤维降解效果最好，对苜蓿草粉的粗纤维降解效果最差。证明从土样分离到的酸性木聚糖酶菌株WL003，在降解饲料粗纤维方面具有较好的应用潜力。
- 周宁王智伟曹平华王磊王磊陈玉林
- 关键词：链霉菌木聚糖酶酶学性质产酶条件优化
- 罗伊乳酸杆菌高效电转化方法的建立被引量：1
- 2011年
- 【目的】建立野生型罗伊乳酸杆菌的高效电转化方法,为乳酸杆菌工程菌的研究提供参考。【方法】采用醋酸锂(LiAc)和二硫苏糖醇(DTT)对不同浓度(0.5×109,1.0×109,2.5×109,5.0×109,10.0×109 mL-1)的罗伊乳酸杆菌分别预处理0,10,20,30min,制备罗伊乳酸杆菌感受态细胞,用于电转化,采用PCR和EcoRⅠ酶切鉴定阳性转化子,建立罗伊乳酸杆菌高效电转化方法。【结果】罗伊乳酸杆菌转化效率随LiAc和DTT处理时间的延长和细胞密度的升高而提高,在本试验条件下罗伊乳酸杆菌电转化的最佳菌体浓度为10.0×109 mL-1,LiAc和DTT的最佳处理时间为20min,在该条件下转化效率达(32.60±7.12)×107 cfu/μg,比未经LiAc和DTT处理的细胞转化效率高104倍以上。【结论】建立了罗伊乳酸杆菌高效电转化方法,电转化的最佳菌体浓度为10.0×109 mL-1,LiAc和DTT的最佳处理时间为20min。
- 孙琳胡雄兵王磊黄亚娟杨明明陈玉林
- 关键词：电转化乳酸杆菌
- 饲喂青贮桑叶对陕北白绒山羊PPARγ、ADIPOQ、aP2 mRNA表达的影响被引量：3
- 2017年
- 试验旨在研究日粮中添加不同水平的青贮桑叶对陕北白绒山羊脂肪组织(皮下脂肪、尾部脂肪、肾周脂肪)、肝脏、肌肉组织中PPARγ、ADIPOQ、aP2mRNA表达的影响。选取8~9月龄体重相近体况基本一致的陕北白绒山羊羯羊40只,随机分为4组,分别饲喂含青贮桑叶为0%(Ⅰ组),10%(Ⅱ组),15%(Ⅲ组),20%(IV组)的日粮,试验期70d,其中预试期10d,正试期60d;饲养试验结束后屠宰,取皮下脂肪、尾部脂肪、肾周脂肪、肝脏、背最长肌组织进行RT-PCR,检测上述基因mRNA表达量。结果如下,PPARγ、ADIPOQ、aP2 mRNA在陕北白绒山羊不同组织部位均有表达,PPARγ、aP2mRNA在皮下脂肪组织表达量显著高于所检测的其他组织(P<0.05),ADIPOQ mRNA在脂肪组织的表达显著高于肝脏和肌肉组织(P<0.05)。在皮下脂肪组织和肝脏,PPARγ、ADIPOQ、aP2mRNA的表达量I组显著高于其他组(P<0.05),不同添加水平的青贮桑叶对其他组织部位PPARγ、ADIPOQ、aP2mRNA的表达量的影响不一致。结果表明,饲喂青贮桑叶能显著影响陕北白绒山羊脂肪代谢相关基因mRNA的表达,青贮桑叶可以作为潜在的具有降脂功效的饲料补充料添加到山羊饲料中以调节脂肪沉积改善肉品质。
- 侯海瑞刘功炜王尧悦杨雨鑫贾亚洲张恩平
- 关键词：陕北白绒山羊PPARΓ
- 基于动物纤维素酶基因工程的科学前沿动态可视化方法研究被引量：1
- 2013年
- 为了系统、全面、准确地反映国内动物基因工程研究演进及知识结构,以CNKI为平台,采用多元统计等可视化方法,在分时段分析国内该领域前沿热点特征的同时,增加对该研究密切相关的非热点主题的观察。结果显示:相关研究主要集中于纤维素酶产生菌的分离鉴定,纤维素基因的克隆、表达;纤维素酶基因的筛选集中于天牛、白蚁等真核生物;纤维素酶基因的研究更多集中于实际研究方法学的改进,建立宏基因组文库对瘤胃中产纤维素酶的微生物进行研究。通过精确检索,多视角科学观察,为该领域科研人员提供了科学决策参考依据。
- 李宁宁李雅黄亚娟陈玉林
- 关键词：动物小鼠纤维素酶基因工程可视化
- 6株羊源乳酸杆菌电转化条件的优化
- 2013年
- 选取质粒pLEM415-egfp电转化源于陕北白绒山羊瘤胃的乳酸杆菌,研究不同生长时期及电场强度对6株羊源乳酸杆菌电转化效率的影响,并优化其转化条件。在37℃培养条件下,培养6株羊源乳酸杆菌,当D600 nm达到0.4、0.6、0.8、1.0和1.2时,离心收集菌体,制备感受态细胞;在电阻200Ω、电容25 uF条件下,分别采用1.5、2.0和2.5 kV 3种电场强度电击转化感受态细胞。结果表明,羊源植物乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei)、罗伊乳酸杆菌(Lactobacillus reuteri)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、棒状乳酸杆菌(Lactobacillus coryniformis)和弯曲乳酸杆菌(Lactobacillus curvatus)获得最高转化效率的D600 nm和电场强度分别为0.8、1.2、1.0、0.6、0.8、0.4和1.5、1.5、1.5、1.5、1.5、2.0 kV。羊源乳酸杆菌最佳转化条件的确立,为后续乳酸杆菌转基因工程菌的构建及其应用奠定了基础。
- 方明建王磊陈玉林
- 关键词：乳酸杆菌电场强度电转化
- 不同来源乳酸杆菌生物学特性的比较被引量：4
- 2011年
- 【目的】比较不同来源乳酸杆菌的生物学特性,为益生菌及重组乳酸菌的宿主选择提供理论依据。【方法】采用CaCO3质量浓度为20g/L的CaCO3-MRS培养基,从山羊瘤胃液和粪便、土鸡嗉囊和小肠壁附着物、青贮玉米秸秆、泡菜等不同样品中厌氧培养分离乳酸杆菌,对其耐热性、耐酸性、胆盐耐受性、抑菌性及耐药性、黏附性等生物学特性进行比较研究。【结果】共分离出了20株乳酸杆菌,其中7株含有内源性质粒,分别是SN1、JXH1、JXQ2、YF2、PC1、QZ5、QZ7,其耐热范围为37～60℃;其中PC1、JXH1具有较强的耐酸性;JXH1、JXQ2的胆盐耐受性为2～8g/L,其上清液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌均有抑制作用,对临床常用的氨基糖类、青霉素类、头孢菌素类和呋喃类抗生素敏感,对磺胺类、喹诺酮类、多肽类均有不同程度的耐药性;PC1、QZ5、SN1、JXQ2、YF2、JXH1对Caco-2细胞的黏附个数均为8.0～9.5个。【结论】在7株含有内源性质粒的乳酸杆菌中,SN1、JXQ2、YF2、JXH1对Caco-2细胞有较好的黏附性,同时表现出了较好的耐热、耐酸性和胆盐耐受性、抑菌性及对大多数抗生素的敏感性。
- 黄亚娟宋萌萌孙琳杨明明陈玉林
- 关键词：乳酸杆菌生物学特性宿主菌
- 日粮能量和蛋白水平对滩羊脂肪组织PPARγ和FABP4 mRNA表达的影响被引量：4
- 2016年
- 旨在研究日粮能量和蛋白水平对滩羊脂肪组织中PPARγ和FABP4mRNA表达的影响。选择健康、体重相近的滩羊112只,公母各半,随机分4组,每组4个重复,每个重复7只羊。参考肉羊饲养标准NY/T（816-2004）,根据生长阶段（22-28、29-35、36-40kg）以目标增重设计标准日粮,每阶段设置0.84×标准（I组）、0.96×标准（II组）、1.08×标准（III组）和1.20×标准（IV组）4个营养水平日粮,分别饲喂4组试验滩羊。于每阶段末每个重复屠宰1只试验羊,取尾部脂肪、肾周脂肪和皮下脂肪组织,通过实时荧光定量PCR检测PPARγ和FABP4mRNA表达水平。结果表明,尾部脂肪组织,在22-28和36-40kg阶段末,II组PPARγ和FABP4mRNA表达量显著高于其他组（P〈0.05）;在29-35kg阶段末,II组FABP4mRNA表达量显著高于其他组（P〈0.05）,且IV组mRNA表达量显著低于其他组（P〈0.05）。肾周脂肪组织,在3个不同阶段末,II组PPARγmRNA表达量显著高于其他组（P〈0.05）,且IV组mRNA表达量显著低于III组（P〈0.05）。在22-28kg阶段末,II组和III组FABP4mRNA表达量显著高于其他组（P〈0.05）;在29-35kg阶段末,II组FABP4mRNA表达量显著高于IV组（P〈0.05）;在36-40kg阶段,I组和II组FABP4mRNA表达量显著高于其他组（P〈0.05）。皮下脂肪组织,在3个阶段末,各组PPARγ和FABP4mRNA表达无显著差异（P〉0.05）。结果表明,日粮能量和蛋白水平对滩羊深层脂肪组织（肾周脂肪）中PPARγ和FABP4mRNA表达的影响大于浅层脂肪组织（皮下脂肪）,对尾部脂肪组织中PPARγ和FABP4mRNA的表达有影响。
- 王小芳曾洁田崇奇王小龙杨雨鑫陈玉林张恩平
- 关键词：滩羊脂肪组织PPARΓ
