辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(2004C041)
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 相关作者：张劲松王欣玲于韬阎启昌张国刚更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第四医院辽宁省肿瘤医院沈阳药科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目中国博士后科学基金辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 层黏连蛋白促进人晶状体上皮细胞蛋白激酶B的活性被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨层黏连蛋白(Ln)对传代培养的人晶状体上皮细胞(hLECs)的蛋白激酶B(PKB)活性的影响,以及Ln激活PKB的信号分子途径。方法:选取第5代hLECs,分为对照组和处理组,在处理组的培养液中加入层黏连蛋白,终浓度为5mg/L。分别在处理后0,10,20,40,60min取出细胞,[γ-32P]-ATP掺入法测定胞膜和胞质PKB比活性。以PI3K的特异性抑制剂Wortmannin(终浓度100nmol/L)预处理1h,再加入层黏连蛋白,0,10,20,40,60min测定胞膜和胞质PKB比活性。结果:hLECs胞膜和胞质PKB比活性在层黏连蛋白作用40min时达到最高值,分别为空白对照的2.72和2.00倍。层黏连蛋白处理的各组胞膜和胞质PKB比活性显著高于对照组(P<0.05)。经Wortmannin预处理后,再加入层黏连蛋白,胞膜和胞质PKB比活性与未经预处理的各时间组相比均显著下降(P<0.05)。结论:层黏连蛋白通过PI3K途径激活人晶状体上皮细胞的PKB活性,比活性随时间变化而发生改变。
- 王欣玲阎启昌张国刚于韬张劲松
- 关键词：层黏连蛋白晶状体上皮细胞蛋白激酶B
- 层黏连蛋白和纤维连接蛋白对传代人晶状体上皮细胞生长和Cx43表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的:观察层黏连蛋白(Ln)和纤维连接蛋白(Fn)对传代培养的人晶状体上皮细胞(hLECs)形态学和连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法:以层黏连蛋白(Ln)和纤维连接蛋白(Fn)处理培养皿表面,以倒置显微镜观察第3代培养的hLECs生长的形态,MTT法记录其生长曲线,免疫荧光法检测Cx43表达,比较两组表达阳性率的变化。结果:在层黏连蛋白处理组,传代细胞以典型的六角形上皮细胞形态为主,而纤维连接蛋白处理组则表现为以梭形的成纤维细胞为主。MTT实验显示,传代后4～7d纤维连接蛋白处理组细胞数多于层黏连蛋白处理组(P<0.05)。免疫荧光反应中,两组Cx43表达的阳性率有明显差别(23/28vs16/28,P<0.05)。结论:层黏连蛋白可以提供适宜hLECs保持上皮细胞状态的体外培养微环境,而纤维连接蛋白可以促进hLECs的增殖和分化。
- 王欣玲张国刚于韬阎启昌张劲松
- 关键词：层黏连蛋白纤连蛋白类晶状体连接蛋白
- 高度近视白内障患者植入人工晶体度数的计算被引量：7
- 2008年
- 目的探讨高度近视白内障患者行超声乳化及人工晶体植入术时的人工晶体度数计算。方法有高度近视的白内障患者49例(76眼)行白内障超声乳化吸除联合人工晶体植入术,观察术后1个月、3个月时裸眼视力和最佳矫正视力以及术后3个月屈光度数与术前预测值的差异。结果术后1个月裸眼视力≥0.5者43眼(56.58%),最佳矫正视力≥0.5者61眼(80.26%);3个月裸眼视力≥0.5者48眼(63.16%),最佳矫正视力≥0.5者66眼(86.84%)。术后3个月实际屈光度数与术前估计值相差≤±1D者49眼(64.47%),±(1～2D)者25眼(32.89%),±(2～3D)者2眼(2.63%)。SRK-T公式对各眼轴长度组计算值的预测性明显优于其他公式(P<0.05)。结论对于高度近视患者的人工晶体度数的计算,不仅要精确术前的生物测量、选择合适的计算公式,还要根据患者不同的视力需求进行人工晶体度数的设计。
- 王欣玲阎启昌张劲松尚琢
- 关键词：白内障高度近视人工晶体
- 层粘连蛋白和纤维连接蛋白对人晶状体上皮细胞传代性质和波状蛋白表达的影响(英文)被引量：1
- 2006年
- 目的:观察层粘连蛋白和纤维连接蛋白对原代和传代培养的人晶状体上皮细胞(hLECs)形态学和波状蛋白表达的影响,探讨更适合的hLECs体外培养条件。方法:以层粘连蛋白(Ln)和纤维连接蛋白(Fn)处理培养皿表面,以倒置显微镜观察原代和传代培养的hLECs生长的时间和形态,MTT法记录传代后第3代细胞的生长曲线,免疫荧光法显示第3代细胞的波形蛋白表达形态的变化。结果:在层粘连蛋白和纤维连接蛋白处理组,原代hLECs长出的时间明显早于对照组;两处理组的原代细胞可以正常传代,对照组细胞传代后不能存活。传代晚期层粘连蛋白处理组细胞发生凋亡,而纤维连接蛋白处理组出现多数晶状体小结。MTT实验显示,传代后4～7d纤维连接蛋白处理组细胞数多于层粘连蛋白处理组。免疫荧光反应中,两组波状蛋白形态有明显差别。结论:层粘连蛋白可以提供适宜hLECs保持上皮细胞状态的体外培养微环境,而纤维连接蛋白可以促进hLECs的增殖和分化。
- 王欣玲张劲松于韬
- 关键词：层粘连蛋白纤维连结蛋白晶状体上皮细胞
- bFGF对人晶状体上皮细胞中FAK表达的影响被引量：5
- 2007年
- 目的:观察不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)引起体外培养的人晶状体上皮细胞迁移和黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)mRNA水平的动态变化。方法:体外培养的第3代人晶状体上皮细胞,建立细胞划痕损伤模型,经0,5,10,15μg/LbFGF作用8～16h后,电脑图像法测定细胞迁移距离,RT-PCR法检测0,1,4,8,16hFAK mRNA水平,免疫荧光法检测整合素β1和增殖细胞核抗原表达阳性率的变化。结果:与对照组比,5μg/L组细胞迁移距离和FAKmRNA表达显著增加(P<0.05);10μg/L组细胞整合素β1表达阳性率显著增加(P<0.05);15μg/L细胞迁移距离和FAKm RNA显著降低(P<0.05)。结论:bFGF引起人晶状体上皮细胞迁移距离和FAK mR-NA表达的变化。
- 王欣玲于韬张国刚阎启昌张劲松
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子上皮细胞晶状体黏着斑激酶
- 维甲酸对晶状体上皮细胞的作用
- 2005年
- 目的通过观察维甲酸(RA)对传代培养的人晶状体上皮细胞(hLECs)生长特性的影响,探讨RA抑制晶状体后囊混浊形成(PCO)的细胞学机制.方法选取第2～5代hLECs,利用倒置显微镜观察RA对细胞形态的影响;MTT法观察RA对细胞增殖的影响,计算RA对细胞增殖的抑制率;间接免疫荧光法观察RA对整合素β1表达阳性率和波形蛋白形态的影响.结果倒置显微镜下,1×10-8～1×10-6mol·L-1组上皮细胞增多,成纤维细胞减少,1×10-5mol·L-1组2种细胞都减少;MTT法显示,1×10-7～1×10-5mol·L-1组细胞增殖受抑制,抑制作用呈剂量、时间依赖性(F检验,P＜0.05),抑制率在10.8%～32.0%.1×10-6～1×10-5 mol·L-1组整合素β1表达明显增高(x2检验,P＜0.05),1×10-7～1×10-5 mol·L-1组波形蛋白在细胞内铺展较均匀.结论RA具有抑制传代细胞增殖的作用,但表现为抑制成纤维细胞和促进上皮细胞二者作用的总和,只是抑制作用远远大于促进作用.RA抑制PCO的功能,可能是通过整合素途径来实现的.
- 王欣玲张劲松张国刚于韬丁立成
- 关键词：维甲酸晶状体细胞增殖整合素
- 层黏连蛋白对人翼状胬肉成纤维细胞生长的抑制作用被引量：1
- 2007年
- 目的:探讨层黏连蛋白对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞增殖的影响。方法:体外培养的第3代翼状胬肉成纤维细胞,接种于层黏连蛋白包被培养皿(Ln组)和空白培养皿(对照组)中,倒置显微镜观察细胞生长状态,MTT法检测细胞增殖状态,作出生长曲线;免疫荧光法检测α-SMA在细胞内的表达;RT-PCR法检测TGF-β1和cytokeratin mRNA的表达水平。结果:Ln组成纤维细胞数量少于对照组;3～7d,Ln组A570明显低于对照组(0.20vs0.28,0.22vs0.30,0.28vs0.34,0.31vs0.36,0.33vs0.36,P<0.05);α-SMA在对照组细胞内表达良好,在Ln组的表达受到抑制;与对照组相比,Ln组TGF-β1mRNA的表达下降,cytokeratin mR-NA表达增加。结论:层黏连蛋白能抑制翼状胬肉中成纤维细胞的增殖。
- 王欣玲于韬张国刚阎启昌张劲松
- 关键词：层黏连蛋白翼状胬肉成纤维细胞
- 层黏连蛋白体外对人虹膜色素上皮细胞的影响
- 2007年
- 目的:研究不同浓度的层黏连蛋白对体外培养的人虹膜色素上皮细胞(IPE)的作用。方法:采用酶辅助的显微分离法对成人眼进行IPE的原代和传代培养,观察其形态;以不同浓度的层黏连蛋白(0,1,5,10mg/L)处理第3代IPE细胞,MTT法作出生长曲线,免疫荧光法检测细胞角蛋白1(CK1)表达的变化。结果:原代培养的IPE细胞内色素丰富,而传代培养后色素显著减少;低浓度层黏连蛋白(5mg/L)明显促进IPE细胞增殖(0.187vs0.151,0.236vs0.176,0.245vs0.215,0.261vs0.238,0.279vs0.254;P<0.05);高浓度(10mg/L)明显抑制细胞增殖(0.121vs0.151,0.081vs0.176,0.094vs0.215,0.065vs0.238,0.078vs0.254;P<0.05);CK1染色均为阳性,高浓度层黏连蛋白(10mg/L)使IPE细胞聚集,CK1表达明显增强。结论:层黏连蛋白对IPE细胞具有双重作用,低浓度的层黏连蛋白适于IPE细胞的体外培养。
- 王欣玲于韬张国刚阎启昌张劲松
- 关键词：层黏连蛋白虹膜色素上皮细胞
