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辽宁省自然科学基金(21012295)
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
相关作者:
李丹
初阳
刘雅茹
张岐山
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相关机构:
中国医科大学附属第一医院
中国医科大学
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发文基金:
沈阳市科学技术计划项目
辽宁省自然科学基金
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相关领域:
生物学
医药卫生
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张岐山
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刘雅茹
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初阳
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李丹
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2012
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醛酮还原酶AKR7A5蛋白的纯化及其对萘醌类化合物的底物特异性研究
被引量:2
2012年
目的:探讨小鼠醛酮还原酶AKR7A5蛋白对萘醌及其衍生物的底物特异性。方法:IPTG(异丙基硫代半乳糖糖苷)诱导BL21pLysS大肠杆菌中His标签的AKR7A5融合蛋白大量表达,利用FPLC系统通过HiTrap亲和柱纯化His-AKR7A5融合蛋白,经SDS-PAGE和Western blot法鉴定纯化的AKR7A5蛋白。使用AKR酶活性实验检测纯化的重组AKR7A5蛋白对萘醌类化合物的底物特异性。结果:经SDS-PAGE和Western blot验证,成功纯化了His标签的AKR7A5融合蛋白;AKR酶活性实验结果显示,重组AKR7A5蛋白对散沫花醌有中等亲和力,对胡桃醌和维生素K3有较低的亲和力,对1,4-萘醌无亲和力。结论:成功纯化了重组AKR7A5蛋白,并检测了其对萘醌类化合物的底物特异性,结果表明醛酮还原酶很可能选择性地参与萘醌类化合物的代谢。
李丹
刘雅茹
张岐山
初阳
关键词:
醛酮还原酶
蛋白纯化
底物特异性
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