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浙江省医药卫生科学研究基金(2004A018)

作品数：27 被引量：160H指数：8
相关作者：孙爱华严杰范兴丽吴森林吴颖更多>>
相关机构：杭州医学院浙江大学杭州市第一人民医院更多>>
发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 27篇中文期刊文章

领域

  • 27篇医药卫生

主题

  • 8篇淋病
  • 8篇梅毒
  • 7篇淋病奈瑟菌
  • 7篇奈瑟菌
  • 6篇突变
  • 6篇螺旋体
  • 6篇基因
  • 5篇血清
  • 5篇梅毒螺旋体
  • 5篇酶联
  • 5篇酶联免疫
  • 5篇酶联免疫吸附
  • 5篇酶联免疫吸附...
  • 5篇免疫吸附
  • 5篇耐药
  • 5篇耐药性
  • 3篇血清学
  • 3篇人乳
  • 3篇人乳头瘤
  • 3篇人乳头瘤病毒

机构

  • 21篇杭州医学院
  • 7篇浙江大学
  • 5篇杭州市第一人...
  • 4篇台州市中西医...
  • 2篇金华职业技术...
  • 1篇杭州市萧山区...
  • 1篇杭州师范大学
  • 1篇徐州医学院
  • 1篇义乌市中心医...
  • 1篇杭州市中医院
  • 1篇嘉兴市第一医...
  • 1篇上海市东方医...

作者

  • 21篇孙爱华
  • 7篇严杰
  • 6篇范兴丽
  • 4篇吴森林
  • 4篇吴颖
  • 3篇诸伟红
  • 2篇毛亚飞
  • 2篇黄赣英
  • 2篇沈香娣
  • 2篇俞月萍
  • 2篇钟雅文
  • 2篇姚洁
  • 2篇钟利君
  • 2篇张一沙
  • 1篇彭敏峰
  • 1篇方海俊
  • 1篇李明雷
  • 1篇胡美多
  • 1篇冯燕
  • 1篇卢彩霞

传媒

  • 6篇中国卫生检验...
  • 5篇中华医院感染...
  • 3篇中华流行病学...
  • 3篇中国现代医生
  • 2篇医学研究杂志
  • 1篇中国微生态学...
  • 1篇中华实验和临...
  • 1篇中华微生物学...
  • 1篇浙江大学学报...
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇中国人兽共患...
  • 1篇中华全科医学

年份

  • 2篇2016
  • 4篇2015
  • 1篇2014
  • 2篇2013
  • 6篇2012
  • 2篇2011
  • 1篇2010
  • 1篇2009
  • 3篇2008
  • 3篇2007
  • 2篇2006
共 27 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
淋病、梅毒和尖锐湿疣三联金标试纸条的制备及其应用被引量：2
2008年
目的:建立能同时检测梅毒螺旋体(TP)血清抗体、淋病奈瑟菌(NG)PIA-PIB及人乳头瘤病毒(HPV)L1抗原的三联金标试纸条并进行临床标本检测。方法:梅毒螺旋体tpN15-17-47和淋病奈瑟菌pIA-pIB融合基因、人乳头瘤病毒L1基因原核表达系统在IPTG诱导下表达目的重组蛋白抗原rTpN15-17-47、rPIA-PIB和rL1。采用SDS-PAGE观察表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯目的重组蛋白。参照文献用常规方法制备能同时检测TP血清抗体、PIA-PIB及HPV L1抗原的三联金标试纸条。分别建立TpN15-17-47-IgG-ELISA、PIA-PIB-ELISA和L1-ELISA作为对照。采用三联金标试纸条和上述ELISAs检测120例梅毒病人血清、65例淋病病人脓性分泌物、45例尖锐湿疣组织标本。结果:三联金标试纸条与TpN15-17-47-IgG-ELISA检测梅毒血清标本的阳性率分别为91.7%和96.6%。三联金标试纸条与PIA-PIB-ELISA检测淋病脓性分泌物标本的阳性率分别为75.4%和86.2%。三联金标试纸条与L1-ELISA检测尖锐湿疣组织标本的阳性率分别为71.1%和82.2%。所有ELISAs检测抗体或抗原的阳性率虽均高于三联金标试纸条,但无显著性差异(χ21=1.55-2.73,P>0.05)。三联金标试纸条与三种ELISAs对健康人血清、非淋病脓性分泌物和包皮组织标本检测结果均为阴性。结论:本研究成功地建立了快速、敏感和特异的能同时检测TP血清抗体、NG PIA-PIB和HPV L1抗原的三联金标试纸条。
孙爱华范兴丽孙琦
淋病奈瑟菌临床菌株porB基因分型及其突变与耐药相关性研究被引量：1
2012年
目的:分析本地区淋病奈瑟菌临床菌株porB基因分型特点及其Gly120和Ala121突变与耐药性关系。方法:多重PCR扩增非产酶淋病奈瑟菌临床菌株porB基因、测序分析Gly120和Ala121突变,并与药敏试验比较。结果:154株非产酶淋病奈瑟菌临床菌株中,porB1A型和porB1B型临床菌株分别占29.9%和70.1%。porB1A型菌株均出现Gly120Asp/Ala121Gly双突变,对青霉素和四环素的耐药率分别为15.2%和10.9%;95.4%porB1B菌株存在出现Gly120和/或Ala121突变,耐药率分别为99.1%和97.2%,其中4株porB1B菌株121和122位氨基酸存在删除突变的菌株对青霉素和四环素的MICs分别高达为8 mg/L～16mg/L和8 mg/L。结论:建立的多重PCR可用于淋病奈瑟菌porB基因分型。本地区流行的非产酶淋病奈瑟菌主要携带porB1B基因,不同基因型临床菌株对抗生素的耐药率有显著性差异(P<0.05)。Gly120和/或Ala121突变增强耐药性仅限于porB1B菌株。
董继忠吴森林孙爱华
关键词：淋病奈瑟菌
PIB基因点突变与淋病奈瑟菌对青霉素和四环素耐药相关性的研究被引量：2
2007年
目的：了解浙江地区分离的淋病奈瑟菌临床菌株对青霉素和四环素的耐药率及该菌PIB基因G120和A121点突变与青霉素和四环素耐药性的关系。方法：采用高保真PCR扩增25株淋病奈瑟菌PIB基因序列，T-A克隆后测序。分析测序菌株PIB基因中与耐药性密切相关的G120和A121变异情况，采用二倍琼脂稀释法确定PIB菌株的耐药性。结果：25株淋病奈瑟菌临床菌株对青霉素和四环素均耐药，耐药率为100％。经测序的25株PIB淋病奈瑟菌中，1株（4．0％）G120或A121均未突变，其对青霉素和四环素的MIC分别为8μg／ml和4μg／ml。5株（20．0％）G120D／N突变而A121不变，1株（4．0％）G120不变而A121G突变，2株（8．0％）G120N突变但A121缺失，16株（64．0％）G120K和A121D双位点突变。24株G120和／或A121突变的PIB菌株均对青霉素和四环素的MIC为4～128μg／ml不等。结论：浙江地区分离的PIB型淋病奈瑟菌对青霉素和四环素的耐药率为100％。上述淋病奈瑟菌对青霉素和四环素的耐药与PIB基因氨基酸序列G120和／或A121突变密切相关。
孙爱华
关键词：淋病奈瑟菌点突变
梅毒螺旋体TpN17与TpN47表位肽融合抗原的重组表达及其酶联免疫吸附试验的建立和应用被引量：8
2009年
以重组TpNs为抗原的ELISAs已被证明是具有较高敏感性和特异性的梅毒血清学检测方法,若ELISAs使用多种TpNs抗原,可进一步提高检测敏感性和特异性。根据抗原表位分析结果,本研究首先采用连接引物PCR获得了TpN17和TpN47抗原表位序列融合成的人工基因片段tpE17-47,然后构建了全长tpN17、tpN47基因以及tpE17-47融合基因的原核表达系统。SDS-PAGE和BioRad凝胶图象分析系统检查结果显示,所构建的原核表达系统能稳定表达目的重组蛋白rTpN17、rTpN47和rTpE17-47,其产量分别约占细菌总蛋白的36%、20%和28%。采用Ni-NTA亲和层析法提纯的rTpN17、rTpN47和rTpE17-47蛋白经SDS-PAGE分析,均显示为单一的蛋白条带。Western blotting结果表明,rTpN17、rTpN47和rTpE17-47蛋白均可被梅毒抗体阳性的病人血清所识别。以rTpE17-47为包被抗原的rTpE17-47-ELISA检测630例临床确诊梅毒患者血清标本的阳性率为98.6%,仅略高于TPPA(97.9%)(P>0.05),但明显高于rTpN17-ELISA(83.8%)、rTpN47-ELISA(83.3%)和RPR(72.1%)(P<0.01)。上述ELISAs和TPPA对25例SLE、36例RA患者和250例健康体检者的血清标本检测结果均为阴性,但RPR分别有1、2和2例标本检测结果为阳性。本试验成功地构建了rTpE17-47抗原表位融合基因及其高效原核表达系统,所建立的rTpE17-47-ELISA可作为一种快速、简便、安全、敏感和特异的梅毒血清学筛查或诊断新方法。
孙爱华范兴丽沈香娣汤仁仙严杰
关键词：梅毒螺旋体抗原表位融合基因酶联免疫吸附试验
聚维酮碘联合湿润烧伤膏对血液科老年患者肛周感染的预防效果研究被引量：10
2016年
目的探讨聚维酮碘擦拭联合湿润烧伤膏对血液科老年患者肛周感染的防治效果,为临床治疗提供参考依据。方法选取2012年1月-2015年6月血液科肛周感染老年患者982例,随机选取其中490例患者作为研究组,采用聚维酮碘擦拭联合湿润烧伤膏进行治疗,将其余的492例患者作为对照组,采用单独的聚维酮碘擦拭治疗,整理研究结果并对其进行统计分析比较;采用SPSS13.0软件对数据进行统计分析。结果患者依从性研究组患者明显高于对照组患者,15d后患者依从性观察组也明显高于对照组;患者感染率研究组为3.7%,明显低于对照组的9.9%,且重度感染率(0.4%)明显低于对照组患者(1.8%);研究组患者SAS、SDS以及CPSS评分差值明显高于对照组患者,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论聚维酮碘擦拭联合湿润烧伤膏对血液科老年患者肛周感染有明显的防治作用,且作用明显,值得在临床推广普及。
单丽明沈国英滕玉琴励佳章芬娟
关键词：聚维酮碘湿润烧伤膏肛周感染
绍兴地区妇科就诊妇女高危型人乳头瘤病毒感染及亚型分布调查被引量：11
2015年
目的人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染与宫颈癌的发生密切相关,然而绍兴地区关于HPV感染率与宫颈病发生报道很少,本研究的目的是确定该地区宫颈病妇女宫颈部位人乳头瘤病毒感染率及亚型分布特点。方法选择2010年1月—2013年9月在浙江省绍兴县中医院妇科就诊妇女4273例,常规行薄层液基细胞学检查,并采用PCR-反向点杂交法进行HPV 23种亚型检测,采用统计软件分析HPV和高危型HPV(HRHPV)感染率及不同HPV亚型在不同人群中的分布。结果 HPV感染率为21.8%(932/4273)。未见上皮内病变细胞或恶性细胞(NILM)、非典型鳞状上皮细胞(ASC)和癌前病变(SIL)患者HPV感染率分别为15.5%(601/3888)、83.7%(236/282)和92.2%(95/103);HPV阳性的NILM、ASC和SIL患者中HR-HPV构成比分别为83.0%(601/724)、94.8%(274/289)和96.7%(118/122);不同人群HR-HPV型排在前五位分别为:NILM患者是HPV-16、HPV-52、HPV-58、HPV-33和HPV-68,ASC患者是HPV-16、HPV-58、HPV-52、HPV-18和HPV-33,SIL患者是HPV-16、HPV-58、HPV-33、HPV-52和HPV-31。NILM、ASC和SIL患者重叠HPV感染率分别为17.6%(106/601)、16.9%(40/236)和18.9%(18/95),不同人群重叠HPV感染率差异无统计学意义(χ2≤0.2,P>0.05)。结论本地区HPV感染率和HR-HPV构成比与宫颈上皮内瘤变程度密切相关,而HPV重叠感染与瘤变严重程度无关,与欧美国家不同,HPV-16、HPV-58和HPV-52是该地区最常见的HR-HPV亚型。
金秀萍凌伟江俞月萍刘小香孙爱华
关键词：人乳头瘤病毒宫颈病变高危型HPV
综合干预措施对急诊留观危重患者获得性感染控制的研究被引量：4
2015年
目的研究综合干预方案对急诊留观危重患者获得性感染的影响,以降低感染率。方法选取2014年1-12月收治的960例急诊留观危重患者为研究对象,按照随机数表法分为对照组与观察组,每组480例患者,对照组采取常规干预,观察组采取综合方案干预,比较两组患者获得性感染率、生命体征、转归、治疗费用、住院时间、住院时间与感染的关系。结果观察组患者感染率为15.42%,明显低于对照组患者的40.21%;观察组患者血氧饱和度SaO2高于对照组,平均呼吸频率、体温均低于对照组;观察组患者病死率为6.67%、治愈率93.33%,明显优于对照组的16.88%、83.12%;观察组患者住院时间(12.8±0.3)d、治疗费用(1 059.7±11.2)元,均低于对照组(21.6±1.5)d、(1 402.1±31.4)元,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组与对照组患者住院时间>23d时,感染率均最高,分别为26.03%和57.28%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论综合干预方案干预可有效降低患者获得性感染率、住院时间及治疗费用。
钟利君诸伟红何志文黄赣英谢菊艳
关键词：综合干预急诊留观危重患者获得性感染
淋病奈瑟菌临床菌株PⅠ基因型及PⅠB基因点突变分析被引量：8
2006年
目的分析浙江地区淋病奈瑟菌株外膜孔蛋白PⅠ基因序列及其点突变与耐药性关系,了解本地区淋病奈瑟菌株PⅠA与PⅠB基因分布及其优势基因型。方法采用高保真PCR扩增34株淋病奈瑟菌全长PⅠ基因序列,T-A克隆后测序。根据测序结果,建立多重PCR同时检测113株淋病奈瑟菌PⅠA和PⅠB基因。分析测序菌株PⅠB基因中与耐药性密切相关的G120和A121变异情况,采用二倍琼脂稀释法确定PⅠB菌株的耐药性。结果11株PⅠA+淋病奈瑟菌均为ⅠA6血清型。23株PⅠB+淋病奈瑟菌中,6株(26．1％)为ⅠB3血清型、5株(21．7％)为ⅠB3／6血清型、2株(8．7％)为ⅠB4血清型、9株(39．1％)为ⅠB3／6-ⅠB2嵌合血清型、1株(4．3％)为ⅠB2-ⅠB4嵌合血清型。所建立的多重PCR可特异和准确地对PⅠA和PⅠB基因分型,检测灵敏度为10 ng DNA模板。113株淋病奈瑟菌中,26株(23．0％)和87株(77．0％)分别携带PⅠA和PⅠB基因。经测序的23株PⅠB+淋病奈瑟菌中,1株(4．3％)G120和A121均未突变,3株(13．0％)G120或A121突变,2株8．7％)G120突变但A121缺失,17株(73．9％)双位点突变。22株G120和／或A121突变的PⅠB+菌株均对青霉素和四环素耐药。结论所建立的多重PCR可用于淋病奈瑟菌PⅠA和PⅠB基因的分型检测。本地区流行的淋病奈瑟菌主要携带PⅠB基因。ⅠA6为PⅠA菌株优势血清型。PⅠB菌株以ⅠB3／6-ⅠB2嵌合、ⅠB3和ⅠB3／6血清型常见,但主要为耐药性G120和,或A121突变株。
孙爱华罗冬娇胡美多周晓辉严杰
关键词：淋病奈瑟菌突变
梅毒螺旋体重组蛋白rTpN17或rTpN47为抗原的ELISA与TRUST和TPHA血清学检测效果的比较被引量：9
2008年
目的:克隆并构建梅毒螺旋体tpn17、tpn47基因原核表达系统,建立基于rTpN17、rTpN47的ELISAs,并对其用于梅毒血清学诊断的敏感性和特异性进行评价。方法:采用PCR扩增tpn17和tpn47基因并构建tpn17和tpn47基因原核表达系统。采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rTpN17和rTpN47表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rTpN17和rTpN47,Western blot检测rTpN17和rTpN47免疫反应性。分别以rTpN17和rTpN47为包被抗原,建立检测血清标本中梅毒抗体的ELISAs(rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA),检测200例健康人、25例类风湿关节炎(RA)和17例系统性红斑狼疮(SLE)患者血清样本,并与甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体间接血凝试验(TPHA)检测效果进行比较。结果:克隆的tpn17和tpn47基因与GenBank中相关序列相似性为100%。rTpN17和rTpN47表达量分别为细菌总蛋白的37.2%和26.8%。提纯后的rTpN17和rTpN47能与梅毒抗体阳性血清发生明显的结合反应。TPHA检测阳性率最高(99.1%,P<0.001),rTpN17-ELISA和rTpN47-ELISA检测阳性率相近(85.3%和84.3%,P=0.427),TRUST检测阳性率低于rTpN17-ELISA(P=0.001),但与rTpN47-ELISA相近(P=0.014)。所有健康人血清、RA和SLE患者血清标本的rTpN17-ELISA、rTpN47-ELISA和TPHA检测结果均为阴性,但有7.1%(3/42)RA和SLE患者血清标本TRUST检测结果阳性。结论:以rTpN17和rTpN47为抗原的ELISAs可作为快速、简便、敏感性和特异性较高的梅毒血清学筛查方法,而且rTpN17和rTpN47仍保持原有免疫反应特异性。
孙爱华范兴丽毛亚飞彭敏峰范春红严杰
关键词：梅毒密螺旋体抗原
尖锐湿疣组织中人乳头瘤病毒6和11型的感染率及其L1基因的表达被引量：4
2006年
目的了解尖锐湿疣组织标本中人乳头瘤病毒6型（HPV-6）和11型（HPV-11）感染率的差异,构建HPV-6型主要衣壳蛋白L1基因原核表达系统,建立ELISA方法检测标本中L1基因表达情况.方法采用基于HPV-6型和HPV-11型11基因的双重PCR,检测尖锐湿疣组织标本中HPV-6型和HPV-11型的感染率;采用PCR扩增HPV-6型全长L1基因,T-A克隆后测序,构建原核表达系统pET32a-L1-E.coli BL21（DE3）,采用SDS-PAGE检测目的重组蛋白rL1的表达.制备rL1兔抗血清,用免疫双扩散试验检测抗血清的效价;建立ELISA方法检测标本中L1基因的表达情况.结果116例患者尖锐湿疣组织标本中,92.2%（107/116）检出HPV-6型和/或HPV-11型.其中单一HPV-6型阳性者占70.1%（75/107）,单一HPV-11型阳性者占23.4%（25/107）,HPV-6型和HPV-11型混合感染者占6.5%（7/107）.与报道的相应序列比较,所克隆的HPV-6型L1基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为99.20%～99.93%和99.80%～100%.IPTG能诱导rL1表达,rL1兔抗血清免疫双扩散效价为1：4.尖锐湿疣组织标本88.8%（103/116）检出L1蛋白.结论成功地构建了HPV-6型L1基因原核表达系统,并建立了HPV-6型和HPV-11型L1基因分型的双重PCR和L1蛋白ELISA检测方法.浙江省尖锐湿疣患者主要感染HPV-6型,病灶中HPV高频率表达病毒主要衣壳蛋白L1.
孙爱华徐莹冯燕严杰
关键词：尖锐湿疣
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