国家自然科学基金(81072324)
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
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- 百草枯诱导PC12细胞MicroRNA的变化及bcl-2调控机制被引量：3
- 2014年
- 目的探讨百草枯（paraquat，PQ）诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PCI2）细胞毒性中MicroRNA（miRNA）的表达及bcl-2的调控机制。方法以PCI2细胞为多巴胺能神经元的细胞模型，用终浓度为0、62．5μmol/LPQ分别诱导PCI2细胞24h，用微列阵芯片技术筛选变化显著的miRNA，实时荧光定量反转录一聚合酶链反应（realtimePCR）进行验证；根据microRNA数据库（TargetScan5．1）提供的靶标预测分析结果，搜寻其相关的靶标；用终浓度为0、62．5、125．0、250．0、500．0、1000．0μmol／LPQ染毒细胞24h，Annexin V-FITC／PI法流式细胞仪测定细胞凋亡，RT-PCR测定miR．34a、miR-Let-7e的相对表达水平，免疫印迹法（Western blot）测定bcl-2蛋白表达水平。结果与对照组比较，125．0、250．0、500．0、1000．0μmol／LPQ染毒PCI2细胞24h后，细胞存活率明显降低，细胞凋亡率明显上升，差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01），且呈现剂量依赖性。基因芯片技术显示，62．5μmol／LPQ作用于PCI2细胞24h引起8个miRNA表达下调，11个miRNA表达上调；其中miR-34a上调、miR-Let-7e下调最为明显。RT-PCR显示，随着PQ浓度的增加，miR-Let-7e表达水平持续下降，miR-34a表达水平持续上升，与芯片结果一致；随着PQ染毒剂量增加，bcl-2蛋白表达水平明显降低，且与miR-34a的表达量呈剂量一反应关系。结论miRNAs的异常表达参与了PQ致PCI2细胞损伤过程。PQ可能通过上调miR-34a表达增加bcl-2蛋白表达，进而诱导PCI2细胞凋亡。
- 黄敏娄丹常秀丽周志俊
- 关键词：百草枯PC12细胞
- 百草枯对小鼠神经行为发育及学习记忆功能的影响被引量：3
- 2013年
- 目的观察百草枯(PQ)对发育期C57BL/6J小鼠神经发育的毒性作用,并探讨百草枯对小鼠学习记忆的影响。方法 80只出生21日龄的仔鼠分为对照组(生理盐水)、1.25、2.5、5、10 mg/(kg·d)五组,灌胃染毒百草枯,每天一次,连续30 d。观察小鼠的一般生理和神经行为发育情况,并在染毒结束后进行Morris水迷宫实验和避暗实验,测试小鼠的学习记忆功能。神经行为学测试结束后取小鼠大脑,称重并进行病理检查,同时利用透射电镜观察各组小鼠中脑黑质部超微结构。结果染毒期间小鼠一般状况没有明显变化,染毒结束后各组体重没有统计学差异;在Morris水迷宫测试中,各组差异没有统计学意义,而避暗实验中与对照组相比,高剂量组的避暗潜伏期延长,差异有显著性(P<0.05);在病理切片和透射电镜观察中,在高剂量组分别观察到黑质细胞减少和神经元细胞凋亡。结论百草枯暴露对发育期小鼠成年后神经行为有影响,同时会使小鼠成年后出现脑组织的病理变化,发生器质性的病变。
- 王翘楚娄丹田雨来常秀丽周志俊
- 关键词：百草枯神经毒性
- 百草枯对人胚胎神经干细胞分化过程中Wnt通路分子表达的影响被引量：9
- 2013年
- [目的]通过对神经干细胞Wnt信号通路中关键分子β-catenin/DVL2基因表达的研究,探讨百草枯对分化中的神经干细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响。[方法]以人胚胎神经干细胞为研究对象,观察体外诱导分化情况,并采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度百草枯对细胞活力的影响,选取未观察到细胞毒性的浓度为0.10、1.00、10.00μmol/L的百草枯染毒,在分化2、4、8、12d利用实时荧光定量多链聚合反应技术检测Wnt信号通路关键分子β-catenin和DVL2 mRNA的表达情况。[结果]百草枯在100.00μmol/L时可明显抑制细胞活力(P<0.01)。百草枯在神经干细胞分化期2、8、12d明显下调β-catenin mRNA的表达,除10.00μmol/L染毒组在分化期8d以外,其余各剂量组与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。百草枯在神经干细胞分化期2、12d DVL2 mRNA的表达明显下调,除0.10μmol/L染毒组在分化期12d该基因mRNA表达升高外,其余各剂量组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01);在分化期4dDVL2 mRNA的表达明显上升,各剂量组与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。[结论]百草枯抑制Wnt信号通路中关键分子β-catenin和DVL2基因mRNA的表达,最终可影响神经干细胞的分化过程。
- 窦婷婷常秀丽吕文周志俊
- 关键词：神经干细胞百草枯分化WNT通路
- 动物神经行为测试方法的研究现状被引量：3
- 2012年
- 神经行为是动物机体的一项重要功能,神经系统支配神经行为,进而实现对机体正常活动的协调。神经行为是一项相对敏感的指标,通过测试神经行为功能变化,能够有效地评价健康危害因素对机体的作用,因此动物神经行为测试对于评价毒物毒性具有重要的意义。近年来,动物神经行为测试方法已经逐渐走向系统化、规范化,随着科学研究的不断深入,测试方法的不断优化,动物神经行为测试已经成为整体动物实验中十分重要的一个环节。基于现有的学界研究成果,本文介绍了动物神经行为测试方法的研究现状,同时对动物神经行为测试的理论基础和影响因素等问题进行了讨论。
- 王翘楚娄丹常秀丽周志俊
- 关键词：神经行为学动物
- PC12细胞在神经细胞分泌研究中的应用被引量：1
- 2012年
- 1概述细胞分泌（胞吐作用）是神经元之间信息交流的关键环节,也是多年来学者们广泛研究的焦点之一。细胞外分泌可以看作是包含有神经递质的囊泡向细胞膜迁移（入坞）并与之融合,随后释放内容物的过程[1-3]。这一过程使电信号转变为化学信号,从而实现细胞之间的信息交流。
- 娄丹王翘楚周志俊
- 关键词：PC12细胞囊泡儿茶酚胺
