科技部科研院所技术开发研究专项(NCSTE-2007-JKZX-023)
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
- 相关作者：卢英华蚁细苗黄曾慰曾练强梁达奉更多>>
- 相关机构：厦门大学广东工业大学广州甘蔗糖业研究所更多>>
- 发文基金：科技部科研院所技术开发研究专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 重组大肠杆菌高效分泌表达α-1-6-葡聚糖酶
- 2010年
- 以pLF3为模板,PCR扩增得到葡聚糖酶的启动子,并将启动子基因重新连接到切除启动子基因及葡聚糖酶基因的pLF3载体上,构建pLF3-pro载体.采用PCR的方法扩增朱黄青霉总DNA中的α-1-6-葡聚糖酶基因,并插入到pLF3-pro载体上,构建pLF3-Pro-Dex质粒,以大肠杆菌DH5α为宿主菌,酶切验证及PCR验证均表明成功构建了pLF3-Pro-Dex质粒,且重组质粒中的α-1-6-葡聚糖酶基因与朱黄青霉中的α-1-6-葡聚糖酶基因有93%的同源性.
- 钟丽娟Bwegendaho Damien牛牧张敏卢英华
- 关键词：大肠杆菌
- 重组大肠杆菌产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的培养基优化被引量：5
- 2011年
- 为了提高重组大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta(DE3)-pET-22-bgl-(kil-Km)的产酶能力,采用单因素试验研究了培养基碳源、氮源及碳氮比(摩尔比)对重组大肠杆菌Rosetta(DE3)-pET-22-bgl-(kil-Km)分泌表达重组β-1,3-1,4-葡聚糖酶H(A107-M)的影响.在此基础上,采用Box-Behnken设计法和响应面分析法对以上影响因素进行优化,得出最优培养基成分为(g/L):甘油10.01,酪蛋白胨12.03,酵母粉24,NaCl 10,(NH4)2SO44.77,KH2PO42.31,K2HPO412.54.
- 陈亚兰黄伟强周晓波凌雪萍卢英华
- 关键词：重组大肠杆菌培养基优化
- α-葡聚糖酶在毕赤酵母中的组成型表达被引量：11
- 2012年
- 为避免α-葡聚糖造成的制糖过程中的糖分损失、制炼难度增加以及糖产品质量下降,利用α-葡聚糖酶分解而直接去除α-葡聚糖是目前最佳的选择.文中扩增了α-葡聚糖酶基因dex,构建组成型表达载体pGAPZαA-dex;以毕赤酵母KM71H为受体菌,将表达载体整合进入受体菌基因组,构建了组成型表达α-葡聚糖酶的毕赤酵母工程菌.摇瓶发酵120h,α-葡聚糖酶酶活达到60.4U/mL,从而实现了α-葡聚糖酶在毕赤酵母中的组成型表达,使发酵过程无需使用甲醇进行诱导,提高了生产和使用安全性.
- 梁达奉黄曾慰曾练强蚁细苗李雨虹余林
- 关键词：制糖组成型表达毕赤酵母发酵
